A型核纤层蛋白在腰椎退行性疾病中的表达及其意义

目的初步探讨A型核纤层蛋白(Lamin A)在腰椎退行性疾病中的表达特点及意义。方法将74例腰椎退行性疾病患者分为腰椎间盘突出组(32例)及腰椎管狭窄组(42例),另设腰椎正常组(12例)作为对照。采用免疫组织化学检查(免疫组化)及蛋白免疫印迹法检测Lamin A在3组腰椎间盘组织标本中的表达情况。结果免疫组化显示Lamin A在3组的椎间盘细胞中均有表达,腰椎管狭窄组的Lamin A在椎间盘细胞中的表达较腰椎正常组及腰椎间盘突出组明显;蛋白免疫印迹法检测3组椎间盘的纤维环组织均有Lamin A的表达,腰椎管狭窄组Lamin A条带灰度值为3.55±0.16,腰椎间盘突出组为1.02±0.13,腰椎正常组为0.78±0.14,3组比较差异有统计学意义(F=14.326,P<0.01),腰椎管狭窄组与腰椎间盘突出组及腰椎正常组比较差异均有统计学意义(P均<0.001),腰椎间盘突出组与腰椎正常组比较差异尚未有统计学意义(P=0.134)。结论随着腰椎退行性疾病病程的发展,Lamin A的表达逐渐升高,其可能与腰椎退行性疾病的发生、发展有一定联系。

雌激素联合甘草酸对去卵巢小鼠骨代谢及生物力学指标的影响

目的探讨雌激素联合甘草酸对去卵巢小鼠骨代谢及生物力学的影响。方法将60只小鼠随机分为6组,假手术组不作任何处理,余5组行去卵巢手术,术后4 d无异常开始灌胃给药。去卵巢组不予任何药物,雌激素组予32μg/(kg.d)雌激素,低剂量甘草酸组予50μg/(kg.d)甘草酸,高剂量甘草酸组予100μg/(kg.d)甘草酸,联合组予32μg/(kg.d)雌激素和50μg/(kg.d)甘草酸,给药45 d后处死小鼠。采用分析天平称量小鼠器官并计算内脏指数,检测血清钙及碱性磷酸酶(ALP)水平,化学比色法检测骨组织羟脯氨酸(Hyp)水平,计算股骨断裂载荷、最大载荷及第四腰椎最大载荷。结果低剂量甘草酸组子宫指数明显低于假手术组及雌激素组,Hyp高于去卵巢组;高剂量甘草酸组第四腰椎最大载荷明显低于雌激素组;联合组子宫指数、第四腰椎最大载荷明显高于去卵巢组,第四腰椎最大载荷明显高于假手术组;去卵巢组子宫指数低于假手术组,子宫指数、胸腺指数低于雌激素组;雌激素组子宫指数、第四腰椎最大载荷高于去卵巢组,胸腺指数低于去卵巢组,第四腰椎最大载荷高于假手术组;P<0.05或0.01。结论甘草酸单用或联用雌激素对骨质疏松有一定的防治作用。

骨形态发生蛋白7通过PI3K/Akt通路可抑制人髓核细胞的凋亡

背景:骨形态发生蛋白7可促进人髓核细胞的细胞外基质合成,减缓椎间盘退变。近年来,有学者提出其可能通过对抗髓核细胞凋亡从而发挥上述作用,但其进一步的分子机制一直未被详细阐明。目的:观察骨形态发生蛋白7对无血清诱导下发生凋亡的人髓核细胞产生的作用及其对PI3K/Akt通路的影响,分析并探讨骨形态发生蛋白7抑制人髓核细胞凋亡的分子机制。方法:通过改良Pfirrmann分级及相关条件选取12例患者获取椎间盘组织,采用酶消化法获取人髓核细胞后分组实验,以含体积分数15%胎牛血清的培养基正常培养的髓核细胞设为空白组;使用无血清培养基培养48 h诱导凋亡作为阳性对照组;在无血清条件下,通过加入不同剂量的骨形态发生蛋白7以及同时添加PI3K/Akt通路拮抗剂LY294002形成处理组和拮抗组。使用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;免疫荧光观察p-Akt表达;蛋白印迹法检测Akt,p-Akt,BAD和Caspase 9等通路蛋白的表达变化。结果与结论:无血清凋亡诱导下,流式细胞术结果显示,随着骨形态发生蛋白7处理浓度上升,髓核细胞凋亡率明显下降,加入LY294002共同作用后细胞凋亡率再次升高(P<0.05)。p-Akt免疫荧光和蛋白印迹法检测结果进一步表明,与凋亡阳性对照组相比,加入骨形态发生蛋白7的实验组中,p-Akt表达明显增加,其下游凋亡相关蛋白BAD、Caspase 9蛋白表达减少(P<0.05),而在同时加入Akt通路拮抗剂LY294002后,p-Akt蛋白表达下降而凋亡相关蛋白的表达又恢复到相对较高的水平(P<0.05)。结果证明,骨形态发生蛋白7在无血清诱导的人类髓核细胞凋亡中通过激活PI3K/Akt通路,拮抗了BAD-Caspase 9相关的细胞凋亡过程,抑制了髓核细胞的退变。

同种异体肌腱双束单隧道及单束单隧道重建膝关节前交叉韧带

背景:前交叉韧带是维持膝关节稳定结构极其重要的静力结构。许多学者发现,前交叉韧带损伤重建后效果不佳的原因之一是对前交叉韧带的正常解剖结构以及生物学特性的认识不足。目的:比较关节镜下前交叉韧带损伤后同种异体肌腱双束单隧道重建及单束单隧道重建的疗效差异。方法:①解剖学研究:取6个新鲜人尸的正常膝关节,每个标本均拍摄正侧位X射线,CT以及MRI,证实标本无膝关节软骨破坏、膝周肿瘤以及前交叉韧带断裂等问题。沿前交叉韧带胫骨端骨面取下前交叉韧带,苏木精-伊红染色,观察各个截段韧带的纤维分布;②临床研究:对40例前交叉韧带重建病例进行研究,其中股骨端双束单隧道重建21例,股骨端单束单隧道重建19例。术前和随访时,所有患者都需要接受Lyrsholm、Tegner评分和IKDC2000,对比术后膝关节功能恢复情况。结果与结论:①解剖学显示,苏木精-伊红染色未发现胫骨端存在双束的分界;②临床研究:40例患者(40个膝关节)均获得12个月以上随访,关节活动度均正常,股骨端双束单隧道重建和股骨端单束单隧道重建术后Lysholm评分、Larson评分和IKDC评分均显著高于术前;两组比较,股骨端双束单隧道重建Larson评分显著高于股骨端单束单隧道重建;③结果表明,前交叉韧带双束单隧道重建更加符合前交叉韧带胫骨端的解剖特点,可以比单束单隧道重建更好地重建膝关节的稳定性,术中操作简便,在胫骨端可较好恢复解剖重建,近期疗效佳,远期效果有待进一步观察。

中药甘草调控G蛋白偶联受体信号通路的研究进展

目的为深入研究和开发利用中药甘草提供科学依据,综述了近年来中药甘草主要活性成分在细胞G蛋白偶联受体(Gprotein coupled receptor,GPCR)信号转导通路中的作用。方法以近几年具有代表性的文献为依据,进行分析、归纳和整理,并对其研究开发前景进行探讨。结果与讨论目前已知中药甘草具有抗炎、保肝、抗癌、抗病毒等药理活性,大量研究表明,中药甘草在细胞GPCR信号转导通路的作用靶点中起着重要的作用,从而参与机体防御反应、组织损伤和应激、细胞分化和凋亡以及肿瘤生长抑制等过程。