福建省莆田地区猪源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及耐药情况检测

为了了解福建省莆田地区猪源肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)的耐药情况,试验采集猪粪便拭子样品共340份,采用细菌分离培养与PCR方法进行细菌分离鉴定,通过微量肉汤稀释法检测分离菌株对9种抗菌药物的耐药性,并检测耐药基因和整合子的携带情况。结果表明:从粪便拭子中共分离鉴定出58株肺炎克雷伯菌,分离率为17.1%(58/340)。分离菌株对四环素的耐药率最高,为96.6%(56/58);对呋喃妥因、氯霉素和多黏菌素的耐药率分别为84.5%(49/58)、81.0%(47/58)和50.0%(29/58);对亚胺培南的耐药率最低,为5.2%(3/58)。分离菌株中耐药基因aadA1、tetA、phoQ、phoP和oqxA的检出率较高,均大于70.0%;从13株分离菌株中检测到Ⅰ类整合子,携带率为22.4%(13/58),主要携带的是氨基糖苷核苷酸转移酶(ANT)aadA22耐药基因盒,未测到Ⅱ类整合子。说明福建省莆田地区猪源肺炎克雷伯菌的耐药情况比较严重。

鞣花酸对肠道上皮细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax、cle-Caspase-3表达的影响

为了探究鞣花酸对猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)凋亡和相关蛋白Bcl-2、Bax、cle-Caspase-3含量的影响,以浓度为20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL的鞣花酸处理细胞12 h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测其对正常细胞生长的影响、用流式细胞术测定细胞凋亡率以及用ELISA方法检测Bcl-2、Bax、cle-Caspase-3的含量。结果表明:鞣花酸对小肠上皮细胞具有保护作用,与空白对照组相比,不同浓度鞣花酸作用细胞12h后,细胞凋亡率、Bax、cle-Caspase-3的含量下降(P<0.05,或P<0.01),细胞增值率、Bcl-2/Bax的含量升高(P<0.05,或P<0.01)。研究结果说明,抑制细胞的抗凋亡机制可能与抑制Bax、cle-Caspase-3的表达以及提高Bcl-2/Bax的比率有关。

鞣花酸对IPEC-J2细胞凋亡及相关基因表达的影响

为了探究鞣花酸对猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)凋亡和相关基因Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-8、caspase-9表达的影响,试验用浓度为20,40,60,80μg/mL的鞣花酸处理IPEC-J2 24小时,并以不添加作为对照,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度鞣花酸对IPEC-J2增殖的影响,用流式细胞术测定IPEC-J2凋亡率,用ELISA方法检测caspase-3的含量,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测Bcl-2、Bax、caspase-8、caspase-9 mRNA的表达情况。结果表明:鞣花酸对IPEC-J2具有保护作用,与不添加相比,不同浓度鞣花酸作用IPEC-J2 24 h后,IPEC-J2凋亡率、Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-8、caspase-9的表达量均显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01)。说明鞣花酸的抗凋亡机制与抑制Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-8、caspase-9的表达有关。