青蒿琥酯对耐地塞米松的多发性骨髓瘤细胞株增殖及NF-κB p65、P-gp表达影响

目的探讨青蒿琥酯对耐地塞米松人多发性骨髓瘤(MM)细胞株MM.1R增殖的影响,并探讨其可能作用机制。方法取对数生长期MM.1S、对塞米松敏感的MM细胞株MM.1R,各分为空白对照组、地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组,分别加入等量培养液、20 ng/m L的地塞米松、25μg/m L的青蒿琥酯、20 ng/m L的地塞米松+25μg/m L的青蒿琥酯,观测各组细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率。取MM.1R细胞加入终浓度为25μg/m L的青蒿琥酯,分别于给药前、给药24 h、给药48 h检测细胞核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白、P糖蛋白(P-gp)蛋白的表达。结果给药24 h时,MM.1S细胞地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组的细胞增殖抑制率分别为20.41%±2.75%、29.07%±2.71%、68.92%±4.12%,组间两两比较,P均<0.05;给药24 h,MM.1R细胞地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组的细胞增殖抑制率分别对为4.13%±3.10%、27.43%±2.67%、60.14±3.24%,组间两两比较,P均<0.05;青蒿琥酯给药前、给药24 h、给药48 h,MM.1R细胞NF-κB p65蛋白的相对表达量分别为0.89±0.21、0.42±0.13、0.23±0.08;P-gp蛋白的相对表达量分别为0.86±0.19、0.43±0.13、0.25±0.09,随干预时间增加,MM.1R细胞NF-κB p65、P-gp蛋白的相对表达量均降低(P均<0.05)。结论青蒿琥酯可抑制MM.1S以及MM.1R细胞的增殖,与地塞米松联用有协同效应。青蒿琥酯抑制MM.1R细胞增殖的机制可能为下调NF-κB p65、P-gp蛋白的表达。

粒细胞集落刺激因子对大鼠实验性心肌梗死的治疗作用

目的 探讨粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)动员的自体骨髓来源的干细胞对大鼠急性心肌梗死动物模型的治疗作用。方法 用异丙肾上腺素 (ISO)复制大鼠急性心肌梗死动物模型 ,用骨髓干细胞动员剂G -CSF动员自体骨髓干细胞释放和迁移至心肌梗死部位 ,于用ISO后 2 4,48h和 2周后杀死大鼠 ,取出心脏 ,用免疫组化和HE染色方法检测动物模型心梗区的CD3 4+ 单个核细胞浸润以及心肌细胞和血管的再生情况。结果 用ISO后 2 4h ,G -CSF处理组大鼠心梗区可见大量CD3 4+ 单个核细胞浸润 ,并有CD3 4+ 的新生心肌细胞生长 ,2周后瘢痕组织较少 ,毛细血管密度明显高于对照组 ;而用ISO后 2 4h ,对照组心梗坏死区有大量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润 ,无CD3 4+ 细胞浸润及新生心肌细胞生长 ,2周后出现较大量的瘢痕组织。结论 G -CSF能促进心肌梗死后心肌细胞和血管的再生 ,减小心肌梗死的范围。用G -CSF动员自体骨髓干细胞来修复坏死心肌组织的“干细胞自身移植”疗法 。

血小板生成因子的研究进展

Currently, platelet transfusion is the primary treatment for thrombocytopnia which results from intensive chemotherapy and radiotherapy of cancer. While repeated platelet transfusions are associated with several problems. The clinical availability of safe and effective platelet growth factors is eagerly awaited. Currently, a mumber of hematopoietic growth factors with thrombopoietic activity have been identified. This review discusses the biological characteristics and the clinical trial investigation development of platelet growth factors.

青蒿琥酯联合来那度胺对多发性骨髓瘤耐药细胞株的作用

目的探讨青蒿琥酯联合来那度胺对多发性骨髓瘤耐药(MM.1R)细胞株增殖的影响并分析其作用机制。方法实验设4组,空白对照组只加RPMI 1640培养液、来那度胺组加20μmol/L来那度胺、青蒿琥酯组加25μg/m L青蒿琥酯、来那度胺联合青蒿琥酯组加20μmol/L来那度胺浓度和25μg/m L青蒿琥酯浓度,终体积为200μL,分别对MM.1R细胞株处理24和48 h,MTT法检测细胞增殖;Western blot检测来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,MM.1R细胞株NF-κB P65蛋白,Bcl-2家族抗凋亡蛋白Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad,多药耐药基因MDR1蛋白表达产物P-gp的表达水平。结果来那度胺、青蒿琥酯、来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,各组抑制率分别为15.16%、28.28%、45.98%和17.19%、34.53%、65.16%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),来那度胺联合青蒿琥酯组抑制率高于单药处理组(P<0.05),两药联合有良好的协同效应,两药联合处理48 h抑制率高于24 h,抑制效应呈时间依赖性;来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,MM.1R细胞株P-gp、NF-κB P65、Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad表达量均低于对照组(P<0.05),两药联合处理48 h,MM.1R细胞株NF-κB P65、Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad蛋白表达量低于24 h(P<0.05),表现出时间依赖性。结论青蒿琥酯、来那度胺可抑制耐药MM细胞增殖,两药联合有协同效应,时间依赖性下调NF-κB P65蛋白、Bcl-2家族抗凋亡蛋白Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad的表达,降低P-gp表达水平可能为其逆转肿瘤细胞耐药的作用机制。

异基因造血干细胞移植治疗粘多糖病I型1例报告

目的粘多糖病I型是一种进行性多器官受累的遗传代谢性疾病,Hurler综合征是粘多糖病I型的最严重类型,常导致进行性的中枢神经系统受损和早期死亡。该研究进行了异基因造血干细胞移植治疗该病的初步尝试,探讨异基因干细胞移植治疗粘多糖病的疗效。方法1例男性粘多糖病I型Hurler综合征患者,2岁1个月,供者为其胞姐,HLA配型一个HLA-B位点不合。预处理方案为减低预处理剂量的BuCy方案马利兰(BU)每日3.7mg/kg,-9^-6d;环磷酰胺(Cy)每日42.8mg/kg,-5^-2d;抗胸腺细胞球蛋白每日3.5mg/kg,-7,-5,-3,-1d。输入重组人粒细胞集落刺激因子动员的供者CD34+细胞(12.8×106/kg),以环孢素A、骁悉、赛呢哌、抗胸腺细胞球蛋白和氨甲喋呤预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果移植后14d,短串联重复序列结合聚合酶链反应(STR-PCR)检测显示为完全供者型嵌合,中性粒细胞和血小板植活时间分别为+11d和+19d。仅出现肝、胃肠Ⅰ级预处理相关毒性,无严重预处理相关并发症。未发生急、慢性移植物抗宿主病和移植物衰竭,移植后临床症状明显改善,认知能力持续增加。结论异基因造血干细胞移植治疗粘多糖病I型疗效肯定,减低剂量的预处理方案有利于降低预处理相关毒性;移植前后加强免疫抑制治疗,适当增加供者造血干细胞输注数量,有利于促进植入,减少移植物衰竭以及GVHD的发生。

减低预处理剂量的异基因造血干细胞移植治疗难治性急性白血病

目的 探讨减低预处理剂量的异基因造血干细胞移植在难治性急性白血病治疗中的安全性和疗效.方法 6例难治性急性白血病,其中5例耐药复发,1例继发性白血病,经常规化疗2～11个疗程未能达到完全缓解.预处理方案为减低预处理剂量的BuCy方案.结果 除1例死于肠道Ⅳ度急性GVHD外,其余5例均获得造血重建,各脏器预处理相关毒性（RRT）大多数为Ⅰ～Ⅱ级,未发生严重预处理相关并发症.移植后11～24 d均有经DNA检测证实的完全供者嵌合.发生急性GVHD 4例,2例为Ⅳ度肠道GVHD,分别于＋18 d和＋64d死亡.1例为Ⅰ度皮肤GVHD治愈,1例先后出现Ⅳ度皮肤aGVHD和肝脏cGVHD经治疗得到良好控制,无白血病生存.3例移植后发生髓外软组织肿瘤（EMD）,采用联合化疗＋放疗、供者淋巴细胞输注（DLI）,2例进行了二次移植,2例无病生存,1例带瘤生存.结论 减低预处理剂量的BuCy方案治疗难治复发性急性白血病,有较好的耐受性,可取得完全型供者细胞植入及血液学缓解,但有可能增加髓外复发的风险.

自体骨髓干细胞原位移植治疗急性心肌梗死的临床研究

目的 :用粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)动员自体骨髓干细胞进入心肌梗死部位原位移植以修复梗死心肌组织 ,探讨其对急性心肌梗死患者心肌梗死面积及心功能的影响。方法 :2 5例初次急性心肌梗死患者在入院后随机分为干细胞原位移植组 (n =12 )和对照组 (n =13)。干细胞原位移植组于入院后在常规治疗基础上加用G -CSF动员自体骨髓干细胞进行心肌梗死原位移植 ;对照组按急性心肌梗死常规方法治疗。于入院第 ( 1、2 8d)描记常规 12导联心电图 ,采用Wagner的QRS波群记分法评价心功能 ,于入院 ( 7、2 8d)行核素心肌灌注断层显像 ,测量心肌梗死面积。结果 :G -CSF治疗 4周 ,干细胞原位移植组QRS记分值明显降低 ,显著低于对照组 (P <0 0 5 ) ;心肌梗死面积由 36 0 %± 8 3%下降至 18 0 %± 5 8%,显著小于对照组 (P <0 0 5 )。结论 :用G -CSF动员自体骨髓干细胞来修复坏死心肌组织的“干细胞原位移植”疗法 ,能减小心肌梗死的范围 ,改善心功能。

粒细胞集落刺激因子干预性治疗大鼠心肌梗塞的实验研究

目的 :探讨用粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)干预性治疗心肌梗塞动物模型的作用。方法 :健康大鼠随机分为心肌梗塞干预性治疗组和心肌梗塞对照组。干预性治疗组予G -CSF 10 μg·kg-1·d-1皮下注射 5d ,并于第 3d用盐酸异丙肾上腺素 (ISO) 5mg/kg腹腔注射复制大鼠心肌梗塞模型。对照组皮下注射等量生理盐水 5d ,也于第 3d用ISO复制心肌梗塞模型。两组均于注射ISO后 2周、4周将动物处死 ,取出心脏 ,病理检查大鼠心肌梗塞的病理变化情况。结果 :注射ISO后 2周、4周 ,干预性治疗组心室肌疤痕组织面积显著小于对照组 (P <0 .0 5 ) ,并可见到心肌细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞的再生。结论 :G -CSF能促进梗死后心肌组织再生 ,明显减少心肌梗塞后疤痕组织范围 ,可用于急性心肌梗塞的干预性治疗。

粒细胞集落刺激因子动员骨髓干细胞治疗大鼠急性心肌梗塞

目的 :探讨G -CSF动员的骨髓来源干细胞对急性心肌梗塞动物模型的治疗作用与对缺血濒死心肌的保护作用。方法 :用异丙肾上腺素 (ISO)复制急性心肌梗塞大鼠动物模型 ,于 3h后用G -CSF动员骨髓干细胞释放和迁移至心肌梗塞部位 ,并分别于 2 4h、48h和 2周后杀死大鼠 ,取出心脏 ,检测心肌的病理变化情况。结果 :用ISO后 2 4h对照组可见散在心肌梗塞灶 ,坏死区周围有多量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润 ,而治疗组大鼠心肌坏死程度较对照组轻 ,浸润的细胞以单个核细胞为主 ;48h后对照组心肌梗塞灶进一步扩大 ,呈散在片状分布 ,而治疗组心肌梗塞灶扩大不明显 ,呈散在灶性分布 ,并可见成堆或散在分布的淋巴细胞样细胞 ;2周后 ,治疗组未见明显心肌梗塞后疤痕组织 ,可见新生的心肌细胞生长。结论 :G -CSF对缺血濒死心肌有保护作用 ,用G -CSF动员骨髓来源的干细胞进行“自我移植” ,可用于急性心肌梗塞的治疗。

CD34^+细胞的心肌细胞分化潜能研究

目的 :了解粒细胞集落刺激因子 (G -CSF)动员的CD3 4 +细胞的心肌细胞分化潜能。方法 :用异丙肾上腺素 (ISO)复制急性心肌梗死大鼠动物模型 ,于 3h后用G -CSF动员骨髓造血干细胞进行心肌梗死动物模型的“自身干细胞移植” ,用免疫组化和HE染色方法检测动物模型心梗区的CD3 4 +细胞浸润以及心肌细胞再生情况。结果 :用ISO后 2 4h ,G -CSF处理组大鼠心梗区可见大量CD3 4 +单个核细胞浸润 ,并有CD3 4 +的新生心肌细胞生长 ,2周后疤痕组织不明显 ;而对照组心梗坏死区有大量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润 ,无CD3 4 +细胞浸润及新生心肌细胞生长 ,2周后出现较大量的疤痕组织。结论 :G -CSF动员CD3 4 +细胞具有向心肌细胞分化的潜能 ,用G -CSF动员造血干细胞的“干细胞自身移植” ,可治疗急性心肌梗死。

电凝烧灼冠状动脉制作大鼠心肌梗死动物模型

[目的]探讨一种新的大鼠心肌梗死模型制作方法。[方法]大鼠麻醉后,经口腔插管连通动物呼吸机,切开胸廓暴露心脏,电凝烧灼其左冠状动脉前降支。然后于12 h,2 d和2周后将大鼠处死,取出心脏,显微镜下观察其病理变化。对照组使用冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型。[结果]在电凝烧灼大鼠冠状动脉后,大鼠心肌组织出现凝固性坏死,继而有肉芽组织长入梗死灶内,最后形成疤痕。用电凝烧灼法可成功复制心肌梗死大鼠动物模型。与冠状动脉结扎法相比较,操作简单,手术时间短,死亡率低。[结论]电凝烧灼法作为一种复制心肌梗死模型的新方法,有其自身的优势,可用于心肌梗死发生机制和治疗等方面的研究。

自体骨髓干细胞原位移植对急性心肌梗死后梗死面积和心功能的影响(英文)

目的:探讨应用粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colonystimulatingfac-tor,G-CSF)动员自体骨髓干细胞进入心肌梗死部位原位移植以修复梗死心肌组织,对急性心肌梗死患者心肌梗死面积及心功能的影响。方法:25例初次急性心肌梗死患者在入院后随机分为干细胞原位移植组(n=12)和对照组(n=13)。干细胞原位移植组于入院后在常规治疗基础上加用G-CSF动员自体骨髓干细胞进行心肌梗死原位移植;对照组按急性心肌梗死常规方法治疗。于入院第1,28d描记常规12导联心电图,采用Wagner的QRS波群记分法评价心功能,于入院后7,28d行核素心肌灌注断层显像,测量心肌梗死面积。结果:G-CSF治疗4周,干细胞原位移植组QRS记分值明显降低(2.14±0.21),显著低于对照组(5.07±0.31)(t=5.2,P<0.05);心肌梗死面积由(36±8)%下降至(18±6)%,显著小于对照组(33±7)%(t=12.6,P<0.05)。结论:用G-CSF动员自体骨髓干细胞来修复坏死心肌组织的“干细胞原位移植”疗法,能减小心肌梗死的范围,改善心功能。

血小板生成素Ⅱ体内生物活性研究

目的 :探讨血小板生成素受体的两种新配体—血小板生成素Ⅱ (TPOⅡ )在体内的生物学活性。方法 :以Babl c纯系小鼠为实验对象 ,通过腹腔连续 7d分组注射提纯的TPOⅡ配体Ⅰ、人工合成的TPOⅡ配体Ⅱ及重组的人血小板生成素 ,并于第 7d末测定小鼠外周血小板数量 ,分析TPOⅡ体内的生物学活性。结果 :在实验第 7d ,TPOⅡ配体Ⅰ实验组小鼠外周血小板数明显高于同期阴性对照组 (P <0 0 5 ) ,与rhTPO阳性对照组相比则无明显差异 (P >0 0 5 ) ;第 14d ,TPOⅡ的两个实验组的血小板数均较同期阴性对照组明显升高 (P <0 0 1) ;与阳性对照组相比亦无明显差异 (P >0 0 5 )。而且随实验时间的延长 ,TPOⅡ实验组及阳性对照组血小板数均呈升高趋势。结论 :提纯的TPOⅡ配体Ⅰ促进小鼠外周血小板的产生 ,其升高血小板的能力与rhTPO无明显差别。

血小板生成素及血小板生成素Ⅱ对人血小板活化的影响

目的 :检测血小板生成素 (TPO)及TPOⅡ在体外对人血小板活化的影响。方法 :取正常健康成人富血小板血浆 ,分别与血小板生成素 (rhTPO)、TPOⅡ及磷酸盐溶液孵化 ,通过荧光单克隆抗体标记血小板表面CD6 2P及CD41分子 ,用流式细胞术测定CD6 2P/CD41比率 ,观察各组血小板活化率。结果 :rhTPO、TPOⅡ组血小板活化率与PBS组无明显差异 ,P >0 0 5。结论 :血小板生成素不会导致血小板异常活化 。

肿瘤坏死因子基因多态性与急性淋巴细胞白血病的相关研究

背景与目的:急性淋巴细胞白血病(acutelymphocyticleukemia,ALL)是来源于淋巴细胞系统的对肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)敏感的血液系恶性肿瘤,TNF基因具有多态性并可影响其转录及表达。本试验拟对肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactoralpha,TNFα)基因-308位和淋巴毒素(lymphotoxin-α,LTα)基因+252位基因多态性与ALL发病、临床及预后的关系进行初步研究。方法:用聚合酶链反应(PCR)、限制性内切酶消化及电泳技术,对29例ALL患者和72名正常对照者的TNFα和LTα基因的单碱基突变多态性进行检测,并收集患者组的临床资料,进行生存状况分析。结果:ALL患者TNF两位点基因型频率、等位基因频率、联合单倍体分型中各型的频率与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);两位点联合单倍体分型在不同性别、白细胞高低、有否中枢白血病、治疗反应等临床特征中的分布无显著性差异(P>0.05);用Kaplan-Meier方法进行生存分析,没有发现高危型与低危型的总生存时间有显著性差异:高危型组和低危型组的1年生存率差异无统计学意义(P>0.05);Cox回归模型显示两位点联合单倍体分型不是影响预后的危险因素(P>0.05)。结论:TNFα-308位、LTα+252位基因多态性在ALL患者发病的易感性、临床和预后中可能不起重要作用。

造血干细胞的可塑性及临床应用

Traditional concept has been that hematopoietic stem cells (HSC) are tissue-specific stem cells, which are restricted to generate the cell types of the blood and immune system. However, recent studies have shown that there is a higher plasticity of the HSC than previous expected, it can be induced to transdifferentiated into mature cells of other nonhematopoietic organs after transplantation in vivo. In this article, the recent advances in the plasticity of HSC and its potential clinical application are reviewed.

rhG-CSF对健康供者外周血粒细胞形态的影响

目的观察30例健康供者在应用rhG-CSF动员前后外周血中性粒细胞形态有无改变。方法注射rhG-CSF前后采集静脉血制备血涂片,pH6.4～6.8条件下瑞特-姬姆萨混合染色后在油镜下观察中性粒细胞形态,同时进行中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色、pH5.4条件下姬氏染色观察中毒颗粒。结果应用rhG-CSF前1 d中性粒细胞形态无明显异常,中毒颗粒、NAP阳性率及积分值均在正常范围内;应用rhG-CSF后中毒颗粒、NAP阳性率及积分明显增高,96%的中性粒细胞胞体偏大,胞浆内见大量"中毒"性颗粒、D hle小体、空泡数量增加。结论应用rhG-CSF可引起外周血中性粒细胞出现明显的形态变化。

急性髓系白血病应用G-CSF后对中性粒细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的探讨急性髓系白血病患者化疗后应用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)治疗对中性粒细胞碱性磷酸酶活性(NAP)的变化及其临床意义。方法选择97例急性髓系白血病患者作为观察组,检测使用rhG-CSF治疗前后NAP的活性,另选29例急性髓系白血病患者作为对照组,单用常规化疗,化疗前后均未予以rhG-CSF治疗,检测化疗前后NAP的变化。结果观察组与对照组比较,应用rhG-CSF治疗后NAP的活性明显增高,两者比较有显著性差异(p<0.01)。结论 rhG-CSF能明显提高急性髓系白血病患者化疗后NAP的活性,从而提高机体抗感染能力。

调节性T细胞的变化对重型再生障碍性贫血临床转归的意义

目的了解调节性T细胞(Tregs)在再生障碍性贫血患者中的表达水平在疾病过程中的变化规律,探讨Tregs在再生障碍性贫血发病机制中的作用及其作为疾病预后和疗效判断指标的可能性。方法以流式细胞术方法检测21例重型再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞中Tregs水平在经免疫抑制剂治疗前后的变化,并与正常对照组相比较。结果重型再障患者Tregs数量较正常人明显减少,而治疗有效者Tregs水平与正常人无差异,无效者Tregs无明显变化。结论 Tregs可能对维持正常的造血至关重要,Tregs的减少同再障的发生密切相关,并可以作为监测再障疗效的指标。