茶树AFLP—银染技术体系与品种指纹图谱的建立

通过对影响茶树AFLP—银染技术体系的关键因素作对比研究,建立了一套优化的茶树AFLP分子标记体系.应用该体系研究不同茶树品种的AFLP指纹,结果同一引物对不同品种扩增及不同引物对同一品种扩增都呈现出十分丰富的多态性,图谱清晰,分辨率高.

茶树cDNA-AFLP银染技术体系的建立

为了挖掘安白茶白化期相关的差异基因,建立并优化了茶树叶片cDNA-AFLP扩增反应体系,进行cDNA-AFLP分析。在安吉白茶叶片cDNA-AFLP的试验中,分别对20μL预扩增和选择性扩增反应体系中的4种反应条件影响因子进行不同梯度优化的研究,包括引物、Mg2+、dNTP及TaqDNA聚合酶的用量。PCR预扩增20μL反应体系中,引物75ng/20μL,Mg2+2.0mM,dNTP0.2mM,TaqDNA聚合酶1U时预扩增效果较好;PCR选择性扩增20μL反应体系中,引物75ng/20μL,Mg2+2.5mM,dNTP0.2mM,TaqDNA聚合酶1.5U时选择性扩增效果较好。通过试验,获得较为理想的预扩增和选择性扩增体系。