复方黄黛片人含药血清对MV4-11细胞增殖和凋亡的影响

目的探索复方黄黛片人含药血清对FMS样酪氨酸激酶3内部重复突变(FLT3-ITD)急性髓系白血病MV4-11细胞增殖和凋亡的影响。方法收集口服复方黄黛片治疗的急性早幼粒细胞性白血病患者的含药血清和健康志愿者的健康血清,分别采用20%、40%、60%的血清浓度培养FLT3-ITD阳性的MV4-11和FLT3-ITD阴性的HL60细胞48 h后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果含药血清的血砷浓度(0.47±0.06)μmol/L,明显高于健康血清(未检出),差异有统计学意义(t=13.035,P<0.001)。MV4-11细胞的存活率随着含药血清浓度的增高而降低,各血清浓度间比较差异均有统计学意义(40%vs.20%:t=7.137,P=0.002;60%vs.20%:t=10.150,P<0.001;60%vs.40%:t=3.282,P=0.030);且20%、40%、60%含药血清浓度时均明显低于健康血清,差异均有统计学意义(t=6.476、10.450、11.110,P均<0.05)。HL60细胞的存活率随着含药血清浓度的增高而降低,各血清浓度间比较差异均有统计学意义(40%vs.20%:t=6.708,P=0.002;60%vs.20%:t=17.070,P<0.001;60%vs.40%:t=16.740,P<0.001);且40%、60%含药血清浓度时低于健康血清,差异均有统计学意义(t=4.378、37.160,P均<0.05),而20%血清浓度时差异无统计学意义(t=0.378,P=0.724)。不同浓度含药血清作用于MV4-11细胞和HL60细胞的凋亡率均随着含药血清浓度的增加而增加。结论复方黄黛片人含药血清在体外对于FLT3-ITD突变阳性的MV4-11和阴性的HL60细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,且MV4-11细胞具有更高的敏感性。

重型再生障碍性贫血模型小鼠骨髓间充质干细胞过度衰老的机制研究

目的探讨重型再生障碍性贫血（SAA）模型小鼠骨髓间充质干细胞（BM-MSC）过度衰老的机制。 方法选择BALB/c小鼠40只，随机分为正常组20只、SAA组20只。应用白消安灌胃联合IFN-γ腹腔注射诱导建立SAA小鼠模型；分离培养两组小鼠的BM-MSC。观察BM-MSC细胞形态和细胞骨架；CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖与细胞周期情况；比较衰老相关β-半乳糖苷酶（Senescence-associated β-Galactosidase, SA-β-gal）的染色阳性细胞比例；Western blot法检测mTOR蛋白的表达水平。 结果正常组小鼠的BM-MSC细胞呈纺锤状、边界清晰，应力纤维平行排列、整齐；而SAA小鼠的BM-MSC细胞体积增大，呈平铺、边界不清状，应力纤维紊乱模糊。CCK-8结果显示，SAA小鼠的BM-MSC的增殖速率较正常组缓慢，在第2天开始差异有统计学意义（P〈0.05）。SAA组小鼠BM-MSC的G0/G1期细胞比率[（77.461±1.567）%对（46.045±2.055）%，t=-34.384，P〈0.001]、SA-β-gal阳性细胞比例[（75±11）%对（28±8）%，t=15.454，P〈0.001]较正常组升高；SAA小鼠BM-MSC的mTOR表达水平高于正常小鼠。 结论SAA小鼠模型中BM-MSC是衰老的MSC，且mTOR通路激活可能是导致其衰老发生的机制。