通阳活血法治疗冠心病心绞痛36例的体会

通阳活血法治疗冠心病心绞痛３６例的体会欧阳克清（江西省泰和县中医院３４３７００）关键词心绞痛，中医药疗法心绞痛多由于高血脂、高血压、糖尿病或过度吸烟等因素，导致冠状动脉粥样硬化、管腔变窄、痉孪，使心肌发生急剧的、短暂的缺血、缺氧的临床综合征。属祖国医...

从橙皮中提取香精油的工艺条件研究

以橙皮为试验材料 ,比较不同提取方法对香精油的质量和出油率的影响。研究表明 ,冷磨萃取法优于索氏提取法和浸提萃取法 ;以出油率为基准 ,冷磨萃取法适宜的工艺条件为 :搅拌时间为 2 0min ,石油醚溶剂与冷磨液体积比为 2∶5 ,萃取次数为 1次 ;精制后的香精油得率为 1 92 % ,其中含柠烯86 36 %。

毒蕈胆碱M_1受体激动剂的高通量筛选模型

目的 建立毒蕈碱样胆碱M1 受体激动剂的高通量筛选模型 ,以此模型进行M1 受体激动剂筛选。方法 将M1 受体基因质粒 (M1 /pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/ 3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染HEK2 93 ,建立了一个稳定的M1 受体激动剂报告基因筛选细胞株。配体与细胞表面M1 受体结合后 ,激活相应的信号通路 ,调节报告基因的表达 ,通过测定荧光酶素报告基因表达水平的变化 ,评估配体激活M1 受体的生物活性。结果 通过对筛选条件 ,如细胞数目、荧光素酶表达时间、底物浓度的优化 ,建立了可靠的筛选方法 ,并对多种抗衰老中药水提物进行了筛选 ,找到 3种对M1 受体有活性的中药。结论 该系统能准确、稳定、有效地应用于M1

G-蛋白偶联受体的功能测定和高通量药物筛选

G 蛋白偶联受体家族是药物开发中最大的一类药物靶点 ,高通量药物筛选是开发药物早期阶段的最重要工具之一。根据G 蛋白偶联受体与配体结合及激发的信号通路 ,人们设计了各种可行的功能测试方法 ,用于G 蛋白偶联受体为药靶的高通量药物筛选 ,如 :微体积荧光数字图像测定技术 (Fluorometicmicrovolumeassaytechnology ,FMAT)、荧光偏振 (Fluoresencepolarization ,FP)、竞争性ELISA (Com petitiveenzyme linkedimmunosorbent)、闪烁邻近测定法(Scintillation proximityassay ,SPA)、载黑色素细胞测定法(Melanophoreassay)、报告基因测定法 (Reportergeneassay)和钙离子测定法等测定方法。在这些方法中 ,报告基因测定法和钙离子测定法占了主导地位。非放射性、无需底物和辅助剂的报告基因测定方法和荧光钙离子指示剂的钙离子测定方法可能是将来G

芦丁对单纯性肥胖大鼠血糖和脂代谢紊乱的调节作用

目的 探讨芦丁对单纯性肥胖大鼠血糖、脂代谢紊乱的调节作用。方法 34只Wistar大鼠随机分成对照组、模型组和芦丁组。模型组和芦丁组以高能量食物饲喂6周,诱发大鼠肥胖模型,再灌胃给药4周,分批禁食2 0～2 4h ,1 0 %水合氯醛麻醉,右颈静脉及左颈动脉插管,取血测空腹血糖、胰岛素和血脂生化指标,然后进行糖钳实验。结果 模型组空腹血糖、胰岛素、TCH、TG、LDL -C和FFA明显高于对照组(P <0 . 0 5 ) ,芦丁组显著低于模型组(P <0 . 0 5 ) ;糖钳实验显示,模型组葡萄糖灌注速率GIR显著低于对照组(P <0 .0 1 ) ,芦丁GIR显著高于模型组(P <0 . 0 5 )。结论 芦丁具有降低单纯性肥胖大鼠的血糖、调节血脂、改善胰岛素抵抗的作用。

剪切应力对毛细血管内皮细胞代谢的影响

建立的平行平板流动腔装置适用于研究血管内皮细胞代谢对剪切流场的响应。将培养的人胚肾小球血管单层内皮细胞置于剪应力分别为５×１０－５Ｎ／ｃｍ２，１×１０－４Ｎ／ｃｍ２和１．５×１０－４Ｎ／ｃｍ２的定常层流中剪切２５小时，样品中的内皮素分泌量用放射免疫法测定。结果表明，剪应力水平对内皮细胞内皮素的代谢活动有显著影响。与静态培养对照，低水平的剪应力（５×１０－５Ｎ／ｃｍ２、１×１０－４Ｎ／ｃｍ２）促进内皮素的分泌，而较高水平的剪应力（１．５×１０－４Ｎ／ｃｍ２）抑制内皮素的分泌；

内皮细胞代谢与剪切作用时间的相关性

应用平行平板流动腔装置研究毛细血管内皮细胞内皮素（ＥＴ）代谢与剪切作用时间的相关关系。将培养的人胚肾小球血管单层内皮细胞置于剪应力分别为０、５×１０－５、１×１０－４和１．５×１０－４Ｎ／ｃｍ２的定常层流中剪切作用２５小时，样品中的ＥＴ分泌量用放射免疫法测定。结果表明，剪切作用时间与内皮细胞ＥＴ的代谢活动有密切相关，ＥＴ分泌量高低不仅取决于剪切应力大小，而且还取决于剪切作用时间长短。ＥＴ分泌量随着剪切作用时间的增减而非线性地增减，在０Ｎ／ｃｍ２、５×１０－５Ｎ／ｃｍ２、１×１０－４Ｎ／ｃｍ２、１．５×１０－４Ｎ／ｃｍ２时ＥＴ累积分泌量最快速最关键的时段分别是流动剪切后７．８－１７．７ｈ、５．３－１６．１ｈ、６．１－１５．６ｈ、８．１－２２．３ｈ；产生最大分泌率时刻相应发生在流动剪切后１２．８ｈ、１０．７ｈ、１０．９ｈ、１５．２ｈ，相应的最大分泌率分别为４５．４１ｐｇ／ｃｍ２．ｈ、４９．１ｐｇ／ｃｍ２．ｈ、７２．５ｐｇ／ｃｍ２．ｈ、３３．５ｐｇ／ｃｍ２．ｈＥＴ累积分泌量和分泌速率随剪切作用时间变化的关系可用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ方程来描述。获得了反映ＥＴ分泌规律的大量特征方程和特征数，为了解体内发生于血管壁的病理生?

神经介素NMU2R受体激动剂的高通量筛选模型研究

目的 建立神经介素NeuromedinU 2Receptor(NMU2R)激动剂的高通量筛选模型 ,从中药中筛选NMU2R受体激动剂。方法 将人NMU2R受体基因质粒 (hNMU2R/pCDNA3 1)与报告基因质粒 (MRE/CRE/LUC)按 1∶5的比例共转染到HEK2 93细胞 ,通过G4 18筛选 ,建立稳定的hNMU2R受体激动剂筛选细胞株。利用CRE的激活剂Forskolin和NMU2R内源激动剂NeuromedinU探索和优化荧光素酶表达时间、每孔细胞数目、荧光素酶底物浓度等筛选条件 ,建立可靠的筛选方法 ,并对部分中药水提液进行筛选。结果 已建立了一个稳定的hNMU2R受体激动剂筛选细胞株和可靠的筛选方法 ,其Z′ 因子为 0 75 ,荧光素酶表达时间为 6～ 8h ,细胞密度为每孔 4× 10 4～ 8× 10 4个。结论 该系统能够有效地应用于NMU2R受体激动剂的高通量筛选 ,能从中药中筛选出NMU2R受体的激动剂。

胰升血糖素样肽鄄1及其受体与2型糖尿病的治疗

胰岛素对治疗2型糖尿病有一定效果,但长期使用会引起低血糖反应;双胍类药物降糖疗效显著,但会引起消化道不良反应.因此,寻找一种安全有效的药物是2型糖尿病治疗的当务之急.胰升血糖素样肽-1作为一种胰岛素分泌促进剂和胰岛素增敏剂越来越受人们的关注,将它用于治疗糖尿病不会产生低血糖,对1型和2型糖尿病都有疗效.讨论胰升血糖素样肽-1及其受体的最新研究状况.

关于血管内皮细胞膜张应力累加效应的实验研究

冯元桢等的理论分析表明 ,在一定条件下血管内皮细胞膜张应力会逆血流方向累加。此结果意义重大 ,但实验验证尚难。本文试图通过不同长度的内皮细胞单层的Invitro实验为此求得一种证据。人胚肾小球血管内皮细胞 (HGVEC)单层暴露在平面剪切流场中 (切应力水平为 0 .4 5N/m2 ) 2 4h ,两种不同长度 (10cm和 6cm)单层内皮细胞的内皮素 (ET 1)累积分泌量、平均分泌速率、最大分泌速率、最小分泌速率及分泌率变异系数以及血管紧张素II(ATII)的累积分泌量、平均分泌速率等均有显著差异。其中 ,在前述两种长度下 ,平均分泌率比值 ,ET 1为 2 .7∶1,ATII为 1.5∶1。而在 0 .6 5N/m2 切应力作用 10h条件下 ,相应的比值同为 1.5∶1。本试验结果表明在相同切应力条件下 ,单层内皮细胞长度与其蛋白质代谢有密切的相关 ,进而从一个侧面证明血管内皮细胞膜张应力存在累加效应。

智能化穴位温度检测仪的研制及实验研究

在经络穴位的生物物理属性中，由于皮肤温度比较灵敏，易于观察，又能及时反映该处血管的舒缩变化。作者利用铂电阻作为测温控头，用微机进行数据处理，并利用该系统进行人体皮肤温度的检测及分析。结果表明：皮肤温差点基本上是循经分布的。

某新型药茶保健的血液流变学机理

本文通过茶和一种新型药茶对血液粘弹性和红细胞变形性作用的对比研究，指出该新型药茶比单一茶能明显增加红细胞的可变形性．改善血液循环，从而强化了茶中各种保健成份在血液中的传质．

Neuromedin U及其受体的研究进展

NeuromedinU作为一种脑肠多肽 ,其外周生物活性包括刺激平滑肌、增加血压、增加血流、改变小肠离子传输、控制局部血流、调节肾上腺皮质素等功能 ,已发现neuromedinU在中枢神经系统的作用为减少食物摄取和体重。该文就neuromedinU及其受体的结构、组织分布和生理学功能等研究进行综述。

Ⅱ型糖尿病天然产物库的高通量制备

The experiment combine high throughput preparation technology with the new drug finding of Ⅱ diabetes mellitus, through making use of modern separation and purification technology prepared for the natural product library of Ⅱ diabetes mellitus. The library offered more and more comprehensive compound to drug screening, and made the drug screening of Ⅱ diabetes mellitus realize high throughput, also it broke a new path for the therapy of Ⅱ diabetes mellitus.

突变型人白细胞介素-2基因在巴斯德毕赤酵母中的表达

为了提高人重组白细胞介素 2的稳定性和活性以及减少毒副作用 ,有必要定向改造rhIL 2的分子结构 .用PCR法从白细胞介素 2 (IL 2 )cDNA全序列中扩增成熟的肽基因片段 ,并利用定点突变技术将人重组白细胞介素 2第 12 5位游离的半胱氨酸编码序列突变为丙氨酸序列 .编码 18位亮氨酸的序列突变为蛋氨酸序列 ;编码 19位亮氨酸的序列突变为丝氨酸序列 .突变型人白细胞介素 2 (MvIL 2 )基因与表达载体pPIC9K重组 ,酶切线性化后用Invitrogen转化毕赤酵母试剂盒导入酵母细胞进行整合 ,经筛选得到一高表达白介素 2的克隆 .SDS PAGE显示 ,表达量约占总量的4 5 7% .经Western印迹验证 ,重组人白介素 2有免疫活性 ;与野生型IL 2相比 ,所获得的突变型IL 2纯品的比活性为 4 0× 10 7IU mg蛋白 ,比天然型IL 2高 4～

黑色素皮质素受体激动剂的高通量筛选模型研究

为了建立黑色素皮质素受体 (MC4R)激动剂的高通量筛选方法 ,将人的MC4R基因质粒 (hMC4R/pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染到HEK2 93细胞 ,通过G4 1 8筛选 ,建立了稳定的MC4R激动剂筛选细胞株 .利用MC4R内源激动剂α MSH探索和优化了每孔接种细胞数目、激动剂孵育时间、溶剂DMSO终浓度、荧光素酶底物浓度等筛选条件 ,建立了可靠的筛选方法 .实验表明 :当细胞数目为 4× 1 0 4个 /孔 ,激动剂孵育时间为 8h ,每孔DMSO终浓度小于 1 %和α MSH终浓度为 1 μmol/L时 ,系统Z 因子接近 0 7。

大白鼠皮肤低电阻点的成因初探

用形态计量学方法和硝酸镧浸染法在光镜与电镜下对大白鼠皮肤高电阻点和低电阻点的表皮细胞结构进行了比较研究。发现低电阻点表皮细胞缝隙连接数目明显多于高阻点，其直径也较高阻点大，其它结构未见区别。

胆汁分泌与排出的调节

胆汁分泌和排泄的障碍通常是转运蛋白发生异常,其在肝脏的病理和生理过程中占有重要的地位.胆汁的分泌和排泄受很多因素的影响,如肝细胞的水合状态、作用底物、细胞因子、趋化因子、炎性因子、毒素、激素、胞内外调节物和胆汁中的各种成分.其中对转运蛋白的信号转导和基因转录的影响是现在研究的热点.本文对胆汁分泌和排泄的神经及体液调节进行了归纳.为肝脏疾病的发生、发展机制和临床治疗提供理论和实验依据.

胰升血糖素样肽-1受体激动剂高通量筛选细胞模型研究

为建立GLP-1受体激动剂的高通量筛选方法,将GLP-1受体质粒和报告基因质粒(3×CRE/3×MRE/SRE-LUC/pGL3)按照1∶5的比例共转染到CHO细胞中,建立GLP-1受体激动剂筛选细胞株。利用GLP-1内源激动剂探索和优化每孔细胞接种密度、荧光素酶表达时间、Bright-GloTM试剂用量、DMSO浓度等筛选条件,建立可靠的筛选方法。当细胞数目为4×104个/孔,激动剂孵育时间为8 h,Bright-GloTM试剂4倍稀释,每孔DMSO终质量分数小于1%时,系统Z′-因子为0.75。利用此模型对中药提取物库进行检测,发现有5个样品显示出活性。结果表明,该模型能够用于GLP-1受体激动剂的高通量筛选。

巴斯德毕赤酵母表达的突变型人白细胞介素-2的发酵条件与纯化研究

在以前的研究中,通过蛋白质工程技术获得了三突变体白细胞介素_2基因(编码12 5位半胱氨酸→丙氨酸;18位亮氨酸→蛋氨酸;19位亮氨酸→丝氨酸) ,并在毕赤酵母中加以表达。进一步优化表达条件,其最适诱导条件:80 %以上的通气,诱导2d ,初始pH6 0 ,甲醇终浓度为1 0 %。在上述条件下表达量占菌体总蛋白的30 %以上,大约2 0 0mg L。建立了一套从毕赤酵母表达上清中分离纯化分泌型表达蛋白IL_2的方法,经离心,超滤浓缩,强阳离子交换S柱和分子筛层析得到纯化的突变型和野生型IL_2 ;其得率为2 7% ,纯度达电泳纯并且HPLC检测只有一个峰。纯化的突变蛋白对CTLL_2细胞具有刺激性;与野生型IL_2相比,在各种温度条件下储存的突变蛋白保留有更高的活性;突变型IL_2的活力是野生型的4～5倍,具有更高的利用价值。