1株庐山野生桑黄菌的分离鉴定与培养特性研究

对采自江西省庐山国家级自然保护区的野生桑黄子实体进行组织分离、形态学鉴定和系统发育分析,证实分离的菌株为锦带花桑黄。利用单因素试验法对该菌株的培养特性进行研究,确定该菌株生长的最适pH为6.0,最适生长温度为27.5℃,最佳碳氮比为5∶1。经正交试验对固体培养基进行优化,得到菌株最适培养基为红糖20 g·L^(-1)、酵母浸膏2 g·L^(-1)、KH_(2)PO_(4)0.5 g·L^(-1)、琼脂20 g·L^(-1),菌丝生长速度为5.38 mm·d^(-1)。

两种外生菌根真菌的分离鉴定及其培养特性研究

为获取外生菌根真菌种质资源,了解其离体培养最适条件,本研究对采自江西省九江市庐山国家级自然保护区的两种外生菌根真菌子实体进行组织分离,结合子实体形态和ITS序列对两种外生菌根真菌进行鉴定,采用固体培养法研究温度、pH、碳源、氮源及碳氮比对两种外生菌根真菌生长的影响。结果表明,两种外生菌根真菌经鉴定分别为柳氏硬皮地星(Astraeus ryoocheoninii)和花脸香蘑(Lepista sordida)。在纯培养条件下,两株真菌的最适温度均为25℃,最适生长pH值为5-6,最适碳源均为葡萄糖,最适氮源均为铵盐,柳氏硬皮地星最适碳氮比为5∶1,花脸香蘑最适碳氮比为40∶1。本研究初步确定了这两种ECM真菌的最适培养条件,为其菌丝体扩繁和菌剂生产及开发其食药用价值和生态价值奠定了基础。

不同品种油茶可培养内生真菌多样性研究

为探究油茶栽培品种内生真菌群落组成及其多样性,以3个长林系列油茶栽培品种及野生小果油茶为研究对象,运用传统组织培养法分离内生真菌,采用形态学观察与分子系统发育分析相结合的方法鉴定菌株,通过对比分析研究油茶栽培品种与野生种内生真菌群落组成差异。研究结果显示,从720个叶片组织块和720个根段中共分离出内生真菌864株,隶属于6纲14目26科39属64个分类单元。从分离率来看,叶片的内生真菌分离率(87.64%)远高于根(32.36%)。从相对频率来看,不同油茶品种内生真菌优势属存在一定差异,长林3号内生真菌优势属为炭疽菌属(Colletotrichum)、间座壳属(Diaporthe),长林4号内生真菌优势属为炭疽菌属、葡萄座腔菌属(Botryosphaeria),长林53号内生真菌优势属为链格孢属(Alternaria)、间座壳属,野生油茶内生真菌优势属为间座壳属、链格孢属。

庐山野生锥栗根际解磷菌组成及解磷能力的研究

为探究锥栗外生菌根际可培养解磷细菌的组成及其对不同难溶性磷源的降解能力,揭示外生菌根对解磷细菌的调控作用。该文采用稀释涂布平板法和16S rRNA基因测序法分析庐山野生锥栗外生菌根际及其周边土壤解磷细菌的数量和组成特征。通过测定解磷细菌在平板上形成透明圈直径大小,进行半定量分析菌株对磷酸三钙、正磷酸铁、卵磷脂和植酸钙的降解能力。外生菌根际解磷细菌数量显著高于相应周边土壤。外生菌根际分离的解磷菌株隶属于伯克氏菌属和类伯克氏菌属,而周边土壤分离获得的菌株隶属于芽孢杆菌属、伯克氏菌属和类伯克氏菌属。不同分离源的解磷菌株对不同磷源总的降解能力没有显著差异。且所有菌株都不能利用正磷酸铁,但外生菌根际获得的细菌中有41.67%的菌株对磷酸三钙、卵磷脂和植酸钙均具有降解能力,明显高于周边土壤。锥栗外生菌根具有上调外生菌根际解磷细菌数量和富集具有多种磷源降解能力细菌的作用,这表明外生菌根具有选择多功能细菌促进土壤中营养元素吸收的潜能。

3株马尾松外生菌根真菌菌丝最适生长条件探究

为明确小笠原须腹菌、硬皮地星和彩色豆马勃的最适生长条件,研究温度、pH、碳源、氮源及碳氮比对3种外生菌根真菌生长的影响。结果表明3种ECM真菌的最适生长条件具有明显差异,小笠原须腹菌最适pH为4.0~5.0,最适温度为25~30℃,最适碳源为蔗糖、果糖、淀粉和甘露醇,最适氮源为铵态氮,最适碳氮比为40∶1;硬皮地星最适pH为5.0~7.0,最适温度为25℃,最适碳源为蔗糖,最适氮源为铵态氮,最适碳氮比为5∶1;彩色豆马勃最适pH为6.0,最适温度为30~35℃,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为铵态氮、硝态氮和蛋白胨,最适碳氮比为10∶1。

三株松科外生菌根真菌的菌种分离、鉴定及生物学特性研究

【目的】为外生菌根真菌的开发利用提供菌种资源和理论基础。【方法】采集松科植物根部外生菌根真菌子实体,通过分离获得LS07、LS062和LS065等3株纯培养菌株,依据形态学特征和ITS序列分析对分离菌株进行鉴定,同时采用单因素试验方法,研究不同培养条件和营养成分对菌丝生长的影响。【结果】LS07菌株经鉴定为琥珀乳牛肝菌(Suillus placidus),其菌丝生长最适单糖为果糖,最适双糖为麦芽糖,最适多糖为棉子糖和果胶,最适氮源为铵态氮,最适pH为5,最适生长温度为25℃;LS062菌株经鉴定为大孢硬皮马勃(Scleroderma bovista),其菌丝生长最适单糖为果糖,最适双糖为乳糖,最适多糖为棉子糖,最适氮源为铵态氮,最适pH为5,最适生长温度为30℃;LS065菌株经鉴定为东方豆马勃(Pisolithus orientalis)。其菌丝生长最适单糖为果糖,最适双糖为蔗糖、麦芽糖,最适多糖为淀粉,最适氮源为铵态氮,最适pH为6,最适生长温度为35℃。【结论】研究表明不同菌株最适生长温度和碳源具有显著差异,为外生菌根真菌分离和扩培提供了理论依据。

油茶根系内生真菌染色方法探究

【目的】为更好地观察油茶根系内生真菌的显微结构特征以及侵染情况,建立一种油茶根系内生真菌较好的染色方法。【方法】将健康油茶根段置于10%KOH溶液中90℃水浴1 h,10%碱性H2O2溶液中透明30 min,1%HCl溶液浸泡5 min,染色3 h,70%乙醇脱色1 h,随机选取根段制片观察并计算定殖率,根据观察效果及定殖率比较分析10种染色剂对油茶根系内生真菌的染色效果。【结果】10种染色剂中对油茶根系内生真菌的染色效果最佳为台盼蓝染色剂,染色后的油茶根内生真菌菌丝、泡囊、微菌核等结构均清晰可见;酸性品红、黑墨水、棉兰、水溶性苯胺蓝等染色效果次之;次甲基蓝、蓝墨水、红墨水、苏丹红Ⅳ和刚果红等染色效果最差。【结论】台盼蓝为最适用于油茶根系内生真菌结构染色的染色剂。

线上销售药用猪苓的品质评价

为评价线上平台所售不同产地7批猪苓药材品质,参照2020年版《中华人民共和国药典》猪苓项下有关要求、方法并结合分子鉴定,分析测定线上平台所售不同产地7批猪苓药材性状,检测水分(≤14.0%)、总灰分(≤12.0%)、酸不溶性灰分(≤5.0%)和麦角甾醇含量(≥0.070%)。结果表明,线上平台所售7批不同产地猪苓药材水分含量为11.1%~15.0%,总灰分含量为2.7%~7.1%,酸不溶性灰分含量为0.3%~1.8%,含麦角甾醇含量为0.2287%~0.3469%,除少部分样品水分含量超标外,其他指标测定结果均符合药典规定。

锥栗外生菌根际细菌对难溶性无机磷风化作用及其耦联碳酸盐形成研究

【目的】外生菌根真菌在菌根际塑造特异的细菌群落是从土壤中活化和获取不溶性矿质元素的一个重要途径。本研究旨在探究锥栗外生菌根际解磷细菌的组成及其解磷特性。【方法】通过溶磷圈法从锥栗菌根际分离解磷细菌,并运用16S rRNA基因测序进行菌株鉴定,采用液体发酵方式比较分析解磷菌对磷酸三钙和磷灰石的降解能力,利用扫描电镜和X射线衍射仪对风化降解产物微观形貌和晶体结构进行分析。【结果】分离获得5株高效解磷菌,经16S rRNA基因测序和比对分析,LSCh1、LSCh2和LSCh5菌株被鉴定为拉塔伯克霍尔德菌(Burkholderia lata),LSCh3和LSCh4被鉴定为副伯克霍尔德菌属(Paraburkholderia sp.)。解磷实验结果表明不同菌株对磷酸三钙的降解能力依次为LSCh3(556.94 mg/L)>LSCh2(206.91 mg/L)>LSCh1(170.83 mg/L)>LSCh5(55.16 mg/L)>LSCh4(14.21 mg/L),对磷灰石的降解能力依次为LSCh2(51.33 mg/L)>LSCh1(43.51 mg/L)>LSCh3(40.99 mg/L)>LSCh5(1.11 mg/L)>LSCh4(1.00 mg/L)。【结论】LSCh3菌株不仅对磷酸三钙和磷灰石都具有较好的降解能力,而且能够诱导碳酸盐的形成。该菌株是一株具有重要潜在应用价值的植物促生菌,可用于促进植物磷营养和改善土壤质量。

中国江西龙虎山崖顶植物根中深色有隔内生菌多样性

为探明丹霞地貌区崖顶植物深色有隔内生真菌(dark septate endophyte,DSE)多样性、群落组成以及生态分布规律。本文以江西龙虎山崖顶常见植物刺柏、马尾松、青冈栎、檵木、乌饭树、鸭跖草、苦槠、辣木树和香附子9种植物的根为研究对象,采用经典的组织分离方法分离DSE真菌,结合形态学特征和分子生物学数据研究丹霞地貌区崖顶常见植物DSE真菌多样性。结果表明:从9种植物根部990个组织块中,共分离纯化出404株菌株,经鉴定隶属于45个分类单元。其中,青霉属Penicillium、拟内孢霉属Endomycopsis、曲霉属Aspergillus、头囊霉属Ascocybe为优势属群,属种组成在不同植物中存在差异,且内生真菌属的数目与植物优势度极显著正相关(P<0.01)。9种植物深色有隔内生真菌(DSE)总分离率在0.51%–13.33%之间;各植物DSEShannon指数在0.0743-1.0400之间,与植物优势度极显著正相关(P<0.01),差异明显;Simpson指数较高(均值>0.7)且Pielou指数较低(均值<0.4)表明DSE真菌在不同植物分布不均匀;相似性指数普遍不高,在0.071–0.467之间。本研究初步揭示了丹霞地貌区崖顶深色有隔内生真菌的分布及多样性情况,为进一步探讨内生真菌在丹霞地貌等特殊生境的生态功能提供参考。

会“说话”的幼儿园主题环境

主题环境是幼儿园教育活动的重要资源。教师将主题内容融入环境当中,引导幼儿不断与环境互动,通过环境再现主题内容,以此来吸引幼儿自发地探索,让幼儿在探索、发现、认知、操作当中,获取经验,从而促进幼儿各方面能力水平的提高。近年来,抚州市保育院一直致力于开展＂幼儿园主题教育环境与幼儿互动＂的研究,引领教师钻研教材,围绕探究式主题活动,立足于主题、区域两类墙饰进行创设，力求做到主题墙饰会说话、主题区域情境化、玩具材料多样化。幼儿通过与环境互动，通过“会说话”的环境来描述自己一日生活，成为幼儿展示自我的舞台，激发幼儿的求知欲，促进幼儿语言、认知和情感的发展以及良好行为习惯的养成。

卷柏内生真菌多样性研究

为探究蕨类植物内生真菌的多样性,本研究采用可培养方法分离江西龙虎山和广东丹霞山的岩壁常见蕨类植物——卷柏的内生真菌,结合形态特征和ITS序列进行菌株鉴定、研究多样性。结果表明:从1080个组织块中,共分离出234株菌株,卷柏内生真菌的总定殖率为18.98%,总分离率为21.67%。根据分离频率,毛壳菌属Chaetomium(26.50%)、青霉属Penicillium(18.38%)、棒束孢属Isaria(11.97%)、曲霉属Aspergillus(9.42%)为优势属。不同居群地春季卷柏的内生真菌多样性存在差异,龙虎山的分离率为34.72%,而丹霞山仅为6.39%,其优势属也不尽相同。对龙虎山不同季节的卷柏内生真菌多样性研究表明,春季的分离率为34.72%,高于冬季的23.89%,春、冬两季之间的真菌类群相似性系数仅为0.39,差异显著。研究结果将有助于进一步揭示丹霞地貌地区蕨类植物内生真菌物种组成及其影响因素。