基于UPLC指纹图谱与多成分定量评价不同产地桑叶药材质量

[目的]建立桑叶超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,结合化学计量学与多成分含量测定综合评价不同产地桑叶药材质量。[方法]采用CORTECS UPLC C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相在350 nm波长下进行梯度洗脱;建立16批桑叶药材UPLC指纹图谱,并对指标成分进行含量测定;对指纹图谱进行相似度评价及主成分分析,利用偏最小二乘法-判别分析寻找不同产地桑叶药材的差异性成分。[结果]桑叶药材指纹图谱共标定出14个共有峰,通过比对标准对照品,指认出其中8个,分别为新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷和紫云英苷;16批药材相似度均大于0.962,主成分分析将16批桑叶药材分为三类,偏最小二乘法-判别分析筛选出5个差异性标志物,差异显著性排序为1号峰(新绿原酸)>4号峰(隐绿原酸)>3号峰(咖啡酸)>14号峰>11号峰。[结论]建立的综合评价方法稳定、可靠,可为桑叶药材的质量评价研究提供理论依据。

血必净注射液及其药代标示物对脓毒症大鼠炎性因子TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8和IL-10表达的影响

[目的]研究血必净注射液及其药代标示物对脓毒症大鼠炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-10(IL-10)表达的影响。[方法]30只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、血必净组、药代标示物组、左氧氟沙星组(阳性对照组),静脉注射给药后采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,并于给药后5 h于大鼠眼眦静脉取血,离心取上清液。将取得的上清液采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8和IL-10的含量。[结果]血必净组、左氧氟沙星组和药代标示物组在给药5 h后,脓毒症模型大鼠血清中炎性因子TNF-α、IL-1和IL-8有显著降低。[结论]血必净注射液以及其药代标示物能够显著抑制因炎症刺激造成的炎性因子的过度分泌。

UHPLC-MS/MS法同时测定三七中16个皂苷类成分在大鼠体内的含量及药代动力学研究

目的:建立UHPLC-MS/MS法同时测定三七中16个皂苷类成分(人参皂苷Rf、Rg_(1)、Rg_(2)、Re、Rd、Rb_(1)、Rb_(2)、Rb_(3)、Rc、Fa、Rk_(1)、Rg_(5)、Rg_(3)、F_(2)及三七皂苷R_(1)、Fc)在大鼠血浆中的含量,并探讨其药代动力学特征。方法:血浆样品经甲醇-乙腈(4∶1)沉淀蛋白处理后,采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI);以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测,利用DAS 3.0软件计算药动学参数。结果:16个皂苷类成分在相应的浓度范围内与峰面积的线性关系良好(r>0.9900);日内、日间精密度的RSD为0.88%~14.41%,准确度为89.60%~114.00%;提取回收率为84.67%~111.87%,基质效应为77.04%~117.64%。结论:该研究建立的UHPLC-MS/MS分析方法准确、灵敏,可用于三七中16个皂苷类成分在大鼠体内的含量测定及药代动力学研究。

三七不同部位指纹图谱的建立及化学模式识别研究

目的:建立三七根、茎、叶的UPLC指纹图谱,结合化学模式识别技术揭示产地对三七不同部位成分的影响。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;以0.1%磷酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,分别建立25批三七根、茎、叶UPLC指纹图谱,并进行化学模式识别研究。结果:25批三七根、茎、叶指纹图谱分别标定17、20、16个共有峰,并对其中10个共有峰进行指认。相似度评价结果显示三七根、茎整体相似度较好,而三七叶中有7批样品的相似度稍差。化学模式识别研究和质量波动分析结果表明产地对三七根中化学成分的影响较小,对三七茎和叶中的化学成分有一定影响。结论:该研究建立的三七根、茎、叶指纹图谱稳定可靠,结合化学模式识别技术可为三七药材的质量评价提供参考。

藜芦有效成分提取工艺优化

[目的]借助正交实验与统计分析软件(JMP)实验设计模型优化藜芦有效成分的提取工艺。[方法]采用单因素实验、正交实验优化乙醇体积分数、液料比、提取时间、提取次数,通过分析芥芬胺和藜芦胺的含量差异确定提取工艺。[结果]模型所得最佳工艺参数与正交实验结果相符,为乙醇体积分数70%,时间2 h,提取3次,液料比15∶1(mL/g)。在此工艺下,芥芬胺和藜芦胺含量分别为1.60、2.98 mg/g,相对标准偏差(RSD)分别为1.0%、1.1%。[结论]该提取工艺稳定,可用于藜芦中有效成分的提取。

不同产地半夏指纹图谱的建立及化学模式识别研究

[目的]建立半夏药材超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,结合化学模式识别筛选差异性标志成分。[方法]采用ACQUITY UPLC HSS T3柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为0.1%磷酸水-乙腈,梯度洗脱,流速为0.2 m L/min,进样体积为10μL,柱温为32°C,检测波长为260 nm。采用相似度评价和化学模式识别相结合的方法对其进行分析。[结果]在18批半夏UPLC指纹图谱中指认出15个共有峰,其中16批样品相似度均大于0.877,其余2批分别为0.606、0.778。聚类分析结果显示不同产地的半夏分为两大类,主成分分析和聚类分析结果一致,采用正交偏最小二乘-判别分析筛选出6个差异性标志成分,通过对照品指认出3个成分(胞苷、次黄嘌呤、鸟苷)。[结论]建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好,结合化学模式识别,可为半夏质量评价提供参考。

羌塘盆地拉雄错地区上二叠统热觉茶卡组烃源岩地球化学特征及油气潜力分析

羌塘盆地上二叠统热觉茶卡组烃源岩主要为一套深灰色—灰黑色薄层—极薄层泥岩,通过有机地球化学特征分析,结果表明:该套烃源岩的有机碳含量为0.31%~0.72%,并以差—中等烃源岩居多,有机质类型主要为II2型,有机质母质形成于具有一定盐度的还原环境,主要来源于海相浮游类和菌藻类等低等水生生物,并伴有一定量高等植物的输入,有机质热演化程度已达到高成熟阶段。羌塘盆地上二叠统热觉茶卡组烃源岩的发现进一步证实了古生界烃源岩具有良好的生烃潜力,为羌塘盆地油气资源评价提供了基础地质资料。

二苯乙烯苷及其β-环糊精包合物在大鼠体内药代动力学研究

[目的]研究二苯乙烯苷(THSG)单体及其β-环糊精包合物大鼠灌胃后药代动力学行为。[方法]SD大鼠分别灌胃THSG单体及其β-环糊精包合物,HPLC-UV测定血浆样品中THSG含量,采用DAS1.0软件计算主要药代动力学参数[。结果]测定方法准确可靠,符合生物样品测定要求。THSG单体及其β-环糊精包合物的Cmax分别为(0.24±0.09)、(1.16±0.80)mg/L;AUC分别为(11.50±3.97)、(32.24±7.77)μg/(L.min),经t检验两者差异有统计学意义(P<0.05)[。结论]β-环糊精的包合作用可通过促进THSG的吸收及减缓其消除,有效的提高THSG的体内生物利用度。

淫羊藿化学成分分析及其药代动力学研究进展

淫羊藿作为补肾阳中药,具有悠久的用药历史。通过回顾淫羊藿化学成分分析及其药代动力学研究,发现淫羊藿成分复杂多样(如黄酮类、生物碱类、酚酸类等),易受到品种、产地、部位、加工炮制等因素的影响,且淫羊藿各类成分的体内过程差异较大,疾病、组方配伍、炮制加工及中西药联用对其药代动力学参数均有不同程度的影响。文章归纳淫羊藿成分分析及体内过程的研究思路和方法,探讨了目前研究中存在的一些问题,以期为淫羊藿质量控制、新药开发与临床应用研究提供参考。

杠柳苷元在大鼠肝微粒体中代谢产物的UPLC-Q-TOF/MS法鉴定

为考察杠柳苷元经大鼠肝微粒体体外代谢的特点,对其代谢产物进行了定性研究。建立肝微粒体温孵体系,采用超高效液相色谱和四级杆飞行时间串联质谱(ultra performance liquid chromatography/quadrupole-time-of-flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF/MS)技术,结合保留时间、精确质量数和离子的碎片特征对孵育后的代谢产物进行结构鉴定。结果表明:杠柳苷元经肝微粒体温孵后,可以检测到除原型以外的4个I相代谢产物;杠柳苷元经大鼠肝微粒体温孵后,主要的代谢途径为脱水、脱氢和甲基化。本研究为其体内代谢的研究提供了基础。

非索非那定体内探针药物法考察脑心通胶囊对大鼠P-gp活性的影响

[目的]建立检测大鼠血浆中非索非那定的液相质谱联用(LC-MS/MS)方法,考察脑心通胶囊对大鼠P糖蛋白(P-gp)的影响。[方法]采用Waters XBridge^(TM) C_(18)(2.1 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源,多反应正离子模式监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 502.3→466.3(非索非那定),m/z 256.1→166.9(内标,苯海拉明)。[结果]非索非那定在1~250 ng/m L范围内线性关系良好,日内、日间精密度(RSD)均小于8.7%,方法回收率均大于83.0%。[结论]该方法灵敏、可靠,可用于快速检测大鼠血浆中的非索非那定。大鼠经连续灌胃给药脑心通胶囊后可对大鼠体内P-gp的活性产生抑制作用。

GC法检测72种中药饮片有机氯农药残留量

目的:建立检测多种中药饮片有机氯农药残留量的方法。方法:采用气相色谱法。色谱柱为Agilent HP-5弹性石英毛细管柱,检测器为^(63)Ni源电子捕获检测器,进样口温度为250℃,检测器温度为300℃,程序升温,载气为高纯氮,载气流速为1 ml/min,进样量为5μl,不分流进样。结果:α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT检测质量浓度线性范围均为0.01~0.20μg/ml(r分别为0.999 5、0.996 4、0.999 6、0.993 7、0.999 3、0.999 7、0.999 1、0.998 3);定量限分别为0.015、0.02、0.01、0.02、0.01、0.01、0.02、0.62μg/ml;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;加样回收率为71.2%~109.2%(RSD为4.2%~9.8%,n=9)。72种中药饮片有机氯农药残留总体检出率为66.7%,总体符合标准率为87.5%。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于多种中药饮片有机氯农药残留量的检测。

二苯乙烯苷β-环糊精包合物的制备及其稳定性研究

目的考察β-环糊精对二苯乙烯苷的稳定作用。方法用水溶液法制备二苯乙烯苷-β-环糊精包合物,采用热重-差示量热分析和紫外光谱法进行确认,采用高效液相色谱(HPLC)法对包合态和游离态的二苯乙烯苷在pH=1.2,4.9,6.8及光照条件下的稳定性进行了研究。结果二苯乙烯苷可与β-环糊精形成包合比为1∶1的包合物,包合态和游离态的二苯乙烯苷在pH=1.2的条件下均较稳定,而在pH=4.9、6.8及光照条件下,包合态的二苯乙烯苷的稳定性均明显提高。结论β-环糊精的包合作用可以提高二苯乙烯苷化学稳定性。

UPLC法测定不同产地淫羊藿中11种成分的含量

目的：建立UPLC法用于同时测定不同产地淫羊藿中绿原酸、隐绿原酸、木兰花碱、金丝桃苷、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷、箭霍苷A、箭霍苷B、宝霍苷I 11种成分的含量。方法：采用CORTECS○RUPLC○RC18色谱柱（2. 1 mm×100 mm,1. 6μm）,流动相为0. 1%甲酸水（A）-乙腈（B）;梯度洗脱,洗脱程序为：0～4 min,5%～20%B; 4～5 min,20%～25%B; 5～10 min,25%～25%B; 10～11 min,25%～40%B; 11～17 min,40%～48%B; 17～18 min,48%～5%B,流速0. 3 m L/min,检测波长270 nm,柱温40℃,对不同产地淫羊藿中11种成分进行含量测定。结果：上述11种成分线性关系良好,精密度、重复性,稳定性的RSD均低于5. 50%,加样回收率为92. 71%～107. 77%。含量测定结果表明,不同产地的淫羊藿中,各成分含量差别较大,但均以朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷含量较高（四川产地除外）。结论：本方法具有简单、快速、重复性好等特点,可用于淫羊藿的质量控制研究。

UPLC-Q-TOF-MS/MS法快速定性分析通脉养心丸中的化学成分

[目的]采用超高效液相色谱串联飞行时间质谱法定性分析通脉养心丸中的化学成分。[方法]分析采用ACQUITY UPLC■ BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温30℃;分别在正、负离子模式下进行数据采集,通过与标准品对比保留时间、相对分子质量,结合二级碎片裂解规律,以及相关文献核对的方法确定化学成分。[结果]在正负离子模式下共鉴定出了32个化合物,包括黄酮类、皂苷类、蒽醌类、木质素类、有机酸类等化合物。[结论]本方法可以快速全面的定性分析通脉养心丸中的化学成分,为通脉养心丸的质量控制和药效物质基础的阐明提供参考。

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中麻黄碱、伪麻黄碱浓度及药动学研究

[目的]建立同时检测大鼠血浆中麻黄碱、伪麻黄碱的高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS/MS）,并对大鼠口服三拗汤后的麻黄碱、伪麻黄碱进行药代动力学研究。[方法]血浆样品经碱化和乙酸乙酯液-液萃取,以盐酸苯丙醇胺为内标,乙腈-0.1%甲酸水（4∶96）为流动相,经Agilent Zorbax SB-C18柱（4.6 mm×150 mm,5μm）分离,采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测（MRM）模式进行正离子检测,定量分析的离子反应分别为：m/z 166.2→m/z 148.2（麻黄碱）,m/z 166.2→m/z 148.2（伪麻黄碱）和m/z 152.1→m/z 134.1（盐酸苯丙醇胺）。[结果]麻黄碱和伪麻黄碱血药浓度在20-10 000μg/L范围内线性关系良好,批内、批间精密度RSD均小于5.3%,高、中、低3种浓度平均方法回收率大于64.7%。[结论]该方法专属、快速、灵敏,可用于麻黄碱、伪麻黄碱的药代动力学研究。

LC-MS/MS测定不同产地桑叶中1-脱氧野尻霉素含量

目的：建立液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）方法测定不同产地桑叶中1-脱氧野尻霉素（DNJ）的含量。方法：采用Waters Atlantis Hilic Silica柱（2.1 mm×100 mm,3μm）,流动相：乙腈-0.4%醋酸水溶液（80∶20,v/v）,等度洗脱,流速为0.4 m L/min,柱温30℃。采用电喷雾离子源（ESI源）,多反应监测（MRM）模式,正离子检测,DNJ定量离子对为m/z 164.0→69.0。结果：DNJ在20~1000 ng（r=0.9997）范围内线性关系良好,平均回收率为91.7%。不同产地桑叶中DNJ的含量有较大差异,含量在0.05%~0.50%,四川产地的DNJ含量较高,达到0.50%,亳州产地含量较低,仅为0.05%。结论：该方法操作简单,分析快速,为桑叶药材中1-脱氧野尻霉素的质量控制提供了参考。

LC-MS法测定大鼠血浆中甘草次酸及其药动学研究

【目的】建立液相色谱-质谱联用（LC—MS）的方法测定大鼠口服三拗汤后甘草次酸的药代动力学。【方法】采用Agilent ZorbaxSB-C18（4．6mm×lS0mm，5μm）色谱柱，流动相为乙腈-水（含10mmol／L甲酸铵），90％乙腈等度洗脱，流速0．3mL／min，柱温25℃，进样量20μL。采用电喷雾离子源，SIM负离子检测模式，甘草次酸和熊果酸（内标）定量离子分别为m／z469．4和m／z455．4。大鼠单剂量灌胃给予三拗汤浓缩液后，经液一液萃取法对大鼠血浆样品进行预处理，利用LC—MS法测定大鼠体内甘草次酸的血药浓度，并采用DAS（ver．1.0）软件计算药代动力学参数。【结果】甘草次酸的线性范围为5—10000μg，L，最低定量限为5μg几，内源性物质不干扰甘草次酸及内标的测定，方法精密度、准确度、回收率和稳定性均符合生物样品的测定要求。【结论】本方法具有专属性强、准确度高、灵敏度好的特点，可用于甘草次酸的药代动力学研究。

三七总皂苷对杠柳毒苷代谢产物杠柳次苷药代动力学的影响

[目的]研究三七总皂苷对杠柳毒苷代谢产物杠柳次苷药代动力学的影响。[方法]将18只SD大鼠随机分为杠柳毒苷单独给药组、杠柳毒苷与低剂量三七总皂苷配伍组、杠柳毒苷与高剂量三七总皂苷配伍组3组,每组6只。各组大鼠连续灌胃给药7 d后,采集不同时间点的血浆样品,测定血浆中杠柳次苷的含量,并计算其药代动力学参数。[结果]三七总皂苷配伍杠柳毒苷后,杠柳毒苷代谢产物杠柳次苷在大鼠血浆中的主要药动学参数Cmax、Tmax、AUC0-t、AUC0-∞与杠柳毒苷单独给药相比具有统计学差异。[结论]三七总皂苷与杠柳毒苷配伍使用可使杠柳毒苷代谢产物杠柳次苷的药代动力学行为发生改变。

西藏措勤盆地它日错地区多尼组烃源岩生物标志物特征

运用质谱色谱技术,对采自西藏措勤盆地它日错地区多尼组烃源岩生物标志物的有机质生源构成、沉积环境和成熟度进行了分析。分析结果表明:西藏措勤盆地它日错地区多尼组烃源岩的碳数值分布在nC_(15)~nC_(33),以"前峰型"单峰为主。正构烷烃碳数相对较高,表明遭受了一定程度的微生物降解;样品中检测出了伽马蜡烷且Pr/Ph值约为0.80,反映了较咸水还原的沉积环境;三环萜烷/五环三萜值小于1,且规则甾烷以C_(27)略占优势,说明有机母质主要来源于水生低等藻类生物,部分有机质具有混合来源;成熟度参数OEP为0.99~1.61,平均1.16,Ts/(Tm+Ts)为0.47~0.67,C_(29)-β/(αα+ββ)值为0.32~0.54及C_(29)-20S/20(S+R)值为0.31~0.49,显示多尼组烃源岩有机质热演化程度已达到高成熟阶段。