人骨肉瘤细胞株中类肿瘤干细胞的分离培养及鉴定

目的:从人骨肉瘤株U2-OS中分离并鉴定类肿瘤干细胞。方法:用无血清培养法从骨肉瘤细胞株中分离出肿瘤细胞球,流式细胞术检测骨肉瘤细胞株中Stro-1的阳性表达率,MTT法检测其增殖能力,免疫磁珠分选Stro-1阳性细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究Stro-1阳性细胞中Stro-1 mRNA的表达,并将Stro-1阳性细胞和阴性细胞分别接种于NOD/SCID小鼠。结果:U2-OS中CD44的阳性百分率为5.67%,Stro-1阳性细胞形成的细胞球具有增殖和分化的能力,Stro-1阳性细胞中呈现Stro-1 mRNA的高表达,Stro-1阳性细胞能形成骨肉瘤。结论:骨肉瘤细胞株中存在类骨肉瘤干细胞,并具有自我更新和多向分化的能力。

关节镜下髌骨去神经化处理联合微骨折术治疗髌股关节炎

目的 :探讨关节镜下髌骨去神经化联合微骨折术治疗髌股关节炎的临床疗效。方法 :自2015年5月至2018年5月治疗60例膝关节退行性髌股关节炎患者,男28例,女32例;年龄24~56(40.5±3.35)岁。其中30例行单纯关节镜检查清理术(对照组),30例行关节镜下清理、髌骨周围去神经化联合软骨锥髌股关节面微骨折处理(治疗组)。术后采用VAS、Lysholm、Kujala评分评价治疗效果。结果:所有患者术后未出现切口感染、血管神经损伤、下肢深静脉血栓等并发症。60例患者均获随访,时间7~36个月,平均12.5个月。两组患者术后4周VAS评分均改善,而且治疗组改善明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者术后末次随访时行Lysholm、Kujala评分比较,治疗组改善明显优于对照组。结论:髌骨去神经化处理联合微骨折术治疗髌股关节炎能更好地缓解疼痛,改善膝关节功能。

人骨肉瘤细胞株U2-OS中分离并鉴定肿瘤干细胞

目的:采用无血清培养法从人骨肉瘤细胞株U2-OS中分离肿瘤干细胞,检测肿瘤干细胞特异性标志物Stro-1的表达。方法:实验于2006-02/2007-02在兰州大学第二医院骨科研究所完成。①实验材料:人骨肉瘤细胞株U2-OS由中国科学院细胞库提供;DMEM/F12(1∶1)培养基(Gibco公司);胎牛血清(杭州四季青公司);PCR引物由上海生物工程公司合成。②实验方法:取原代培养的骨肉瘤细胞经胰蛋白酶消化制备单细胞悬液,用含表皮生长因子20μg/L、碱性成纤维细胞生长因子20μg/L、L-谷氨酰胺2mmol/L、胰岛素4U/L、青霉素100U/mL和链霉素100U/mL,pH7.2～7.5的无血清DMEM/F12培养基重悬细胞,常规培养5～7d,待培养基中悬浮的肉瘤细胞球体积较大后,用无血清培养基重新吹打成单细胞悬液,按1∶2或1∶3比例传代。③实验评估:从上述骨肉瘤细胞株中分离出的肿瘤细胞球,用MTT法检测其增殖能力,免疫磁珠分选Stro-1阳性细胞,反转录-聚合酶链法检测Stro-1阳性细胞中Stro-1 mRNA的表达,免疫细胞化学染色的方法检测分化后成骨细胞特异性抗原的表达。结果:①肿瘤干细胞增殖活性:增殖潜伏期约为24h,传代后1～2d即可见肿瘤干细胞形成,以后体积逐渐增大。第7天吸光度值最高,与0d吸光度值比较差异有显著性意义(P<0.01)。②免疫磁珠法分选Stro-1阳性细胞:分选的Stro-1+细胞接种于无血清培养基后,24～48h即可形成和原代肿瘤干细胞球形态一样的干细胞球,而Stro-1-细胞却不能形成肿瘤细胞球。③骨肉瘤干细胞中Stro-1mRNA的表达:Stro-1+细胞和Stro-1-细胞mRNA扩增产物的吸光度值二者比较差异有显著性意义(P<0.05)。④肿瘤干细胞分化:分化2周的肿瘤干细胞骨形态蛋白及Ⅰ型胶原酶均呈阳性表达。结论:骨肉瘤细胞株中存在骨肉瘤干细胞,并具有自我更新和多向分化的能力。

Delbet Ⅱ型儿童股骨颈骨折不同内固定方式的有限元分析

背景:儿童DelbetⅡ型股骨颈骨折后股骨头坏死率较高,有限元法已广泛应用于研究成人股骨颈骨折内固定后的稳定性,但儿童股骨颈骨折的相关分析较少。目的:研究3种不同内固定方式治疗DelbetⅡ型儿童股骨颈骨折的生物力学性能。方法:选择1例8岁儿童健康志愿者为研究对象。CT扫描患儿股骨近端影像数据导入Mimics 17.0,在Geomagic 14.0,Cero 3.0,Hyper Works13.0中建立3种内固定方式治疗DelbetⅡ型儿童股骨颈骨折的有限元模型,分别为空心钉模型(CS模型)、空心钉联合克氏针模型(CS+K模型)、锁定钢板模型(LP模型),观察3种模型的内固定应力、骨骺应力及骨折断端相对位移。结果与结论:(1)CS+K模型骨折端和股骨头内的应力显著大于CS模型、LP模型(P <0.001);LP模型的股骨侧应力显著大于CS+K模型、CS模型(P<0.001);(2)CS模型的相对位移量显著大于CS+K模型和LP模型(P<0.001);(3)LP模型的骺板平均应力显著大于CS+K模型、CS模型(P<0.001);(4)结果表明,空心钉联合克氏针固定治疗DelbetⅡ型股骨颈骨折更有利于骨折的稳定,减少骨骺应力,有效降低股骨颈短缩和髋内翻的发生率。

手部掌指骨骨折闭合复位内固定的治疗

目的评价闭合复位内固定治疗掌、指骨骨折的疗效。方法对20例掌、指骨骨折患者采用闭合复位克氏针内固定治疗，术后通过伤口、骨折愈合情况及TAFS评分标准对惠指功能进行评价。结果术后23指功能优良，4指较差。所有患者均未出现针道感染，2例出现开放性伤口感染，4指出现延迟愈合。结论闭合复位内固定具有创伤小、骨折愈合好、手指功能恢复快、患者花费少等优点。可作为手部骨折治疗的首选。

尺骨节段截骨内固定治疗老年桡骨远端陈旧性骨折后畸形及并发症的临床研究

目的探讨尺骨节段截骨内固定治疗桡骨远端陈旧性骨折并下尺桡关节脱位的临床效果。方法对2017年1月-2019年12月收治的22例桡骨远端陈旧性骨折的老年患者,均采用尺骨节段截骨钢板内固定治疗,术后采用VAS、改良的Gartlandand Werley腕关节功能评分系统评价治疗效果。结果22例均获得随访,随访时间3~30个月,平均12.5个月。所有患者截骨全部愈合,无内固定失效、伤口感染及骨不连等并发症。治疗后患者VAS评分均较入院时明显下降(P<0.05),所有病例腕关节的掌屈、背伸、尺桡偏及前臂旋前、旋后功能均明显改善(P<0.05),末次随访按改良的Gartlandand Werley腕关节功能评价:优14例,良6例,可1例,差1例,优良率90.9%。结论尺骨节段性截骨有效减轻尺骨过长引起的尺侧撞击痛,维持前臂的旋转功能,是治疗陈旧性桡骨远端骨折引起下尺桡关节脱位一种有效的手术方法。

腰椎术后伤口早期感染的治疗体会

目的探讨腰椎术后伤口早期感染的预防措施及手术治疗方法。方法对7例腰椎术后伤口感染病例拆除伤口部分缝线、及时换药,3例未形成窦道患者肉芽组织生长后清创缝合,4例形成窦道患者术前准备后行伤口切开彻底清除坏死组织、横突间植骨块,伤口一期闭合。结果除1例患者术中清创不彻底导致再次清创外,其余伤口感染患者清创后均一期愈合,随访未见感染复发。结论对早期深部感染需及时处理伤口、使用敏感抗生素,彻底清创,创口可以一期愈合,并可以保留内固定。

环氧化酶-2与骨肉瘤

环氧化酶-2(COX-2)及其抑制荆是近年肿瘤防治研究的热点之一。目前研究表明COX-2通过多种途径参与骨肉瘤的发生、发展和转移,并对病人的预后产生积极影响。选择性COX-2抑制剂能有效地抑制骨肉瘤细胞的增殖、浸润和转移,并能缓解骨肿瘤引起的疼痛、减轻骨破坏,给骨肉瘤治疗带来了新希望。

COX-2mRNA、CD105mRNA在骨肉瘤中表达的临床意义

目的研究环氧合酶-2mRNA(COX-2mRNA)在骨肉瘤中的表达及其与CD105mRNA的相关性。方法应用原位杂交的方法检测人骨肉瘤中COX-2mRNA和CD105mRNA的表达,并计算CD105mRNA标记的微血管密度(MVD)。结果COX-2mRNA在骨肉瘤中表达阳性率为77.5%,COX-2mRNA的表达与外科分期和肿瘤的转移密切相关(P<0.05);外科分期的I期与Ⅱb期、Ⅲ期间的MVD值的差异有统计学意义(P<0.05),而I期与Ⅱa期、Ⅱa期与Ⅱb期之间的差异无统计学意义(P>0.05);转移组的骨肉瘤其MVD值高于未转移组,二者之间的差异有统计学意义(P<0.05);COX-2mRNA表达与MVD值呈正相关(P<0.05)。结论COX-2mRNA在骨肉瘤组织中呈现高表达,其高表达可能促进了骨肉瘤新生血管的生成。

几种天然材料对茶多酚和咖啡因的吸附与分离特性

用HPLC法测定表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin-3-gallate,EGGG）和咖啡因含量,分光光度法测定总茶多酚含量,研究了几种天然材料对茶提取物中茶多酚和咖啡因的吸附与分离特性。谷壳和丝瓜络对茶多酚的吸附率分别为65%和62%,稍低于最佳吸附大孔树脂DM130（73%）和最佳分离树脂聚酰胺树脂（81%）的吸附率;对咖啡因的吸附率分别为24%和18%,介于DM130（68%）和聚酰胺（15%）之间。红砖粉、矿石粉末和河沙对茶多酚和咖啡因的吸附率都很低,分别为38%,29%,3%和24%,15%,15%。用1BV水、20%乙醇、40%乙醇和3BV80%乙醇梯度洗脱,测定了它们对EGCG和咖啡因的柱层析分离效果。DM130不能将两者分离开,94%~96%的EGCG和咖啡因同时存在于40%和80%的乙醇相中。聚酰胺树脂能够很好地分离这两种成分,90%咖啡因在水和20%乙醇洗脱相中,而90%EGCG在80%乙醇相中。谷壳和丝瓜络对EGCG和咖啡因的分离效果介于DM130和聚酰胺之间。谷壳为吸附剂时,92%咖啡因在水,20%和40%乙醇相中,84%的EGCG在80%乙醇相中。丝瓜络吸附剂时,87%咖啡因在水,20%和40%乙醇相中,76%的EGCG在80%乙醇相中。调整和控制好洗脱条件和洗脱剂用量,可较好地分离EGCG和咖啡因。结果表明,谷壳和丝瓜络可用作EGCG和咖啡因的吸附分离材料,具有对环境和健康安全、廉价易得等特点。

胫骨平台及踝部骨折内外固定后低毒性感染伴窦道形成:口服利福平、环丙沙星加皮瓣移植修复的效果

背景:近年国内外对骨折内固定后低毒性感染的报道有较多的文献,但对术后慢性低毒性感染内固定取出是否是必须的报道不一,没有固定的疗效判断标准,导致治疗方法结论不确切。目的:观察口服利福平、环丙沙星加皮瓣转移对胫骨平台及踝部骨折内外固定后低毒性感染伴窦道形成的疗效。方法:收集2005年9月至2012年12月收治的胫骨平台及踝部骨折内外固定后低毒性感染患者56例,其中治疗组30例采用口服环丙沙星+利福平+皮瓣转移治疗,对照组26例采用常规静点抗生素+局部清创内固定取出治疗。两组均完成3-6个月的疗程,每1-3个月复查血沉、肝肾功及影像学指标评估疗效。结果与结论:随访6-24个月,治愈、好转患者无复发。治疗组24例治愈,4例好转,2例无效,总有效率为93%;对照组11例治愈,6例好转,无效9例,总有效率为65%。经χ2检验,治疗组疗效明显优于对照组(P<0.05)。提示口服利福平、环丙沙星加皮瓣转移对胫骨平台及踝部骨折内外固定后低毒性感染伴窦道形成有良好的修复效果。

前路Ⅰ期病灶清除加植骨融合内固定治疗腰骶段结核

目的:探讨经前路腹膜外途径Ⅰ期病灶清除、植骨融合、单钉棒内固定治疗腰骶段结核的临床效果。方法:2005年3月至2011年2月采用经前路腹膜外途径,彻底清除病灶,大块髂骨支撑植骨,单钉棒椎体侧前方内固定治疗腰骶段(L3-S1)结核18例,男13例,女5例;年龄24～61岁,平均38.5岁;病程3～14个月,平均5.5个月。病变节段:L3,42例,L4,55例,L42例,L5S16例,L4-S13例。术后常规抗结核治疗12～18个月,定期复查血沉及CT、X线片,监测抗结核治疗效果及植骨融合情况。结果:术中显露充分,病灶清除彻底,无大血管、神经、输尿管损伤等严重并发症发生。随访6～42个月,平均13个月。内固定无松动、断裂;植骨块无移位,植骨融合良好;血沉、C-反应蛋白正常,结核病变无复发。结论:经前路腹膜外途径行病灶清除、植骨融合、单钉棒内固定治疗腰骶段结核,能Ⅰ期完成病变的切除和腰骶椎的重建,在此区域单钉棒内固定是可行的。

胸腰椎爆裂骨折损伤机制及手术治疗

胸腰椎爆裂骨折常伴有脊髓神经损伤,主要由瞬间脊髓神经受到暴力及复合骨折块突入椎管引起脊髓压迫所致。随着影像学、生物力学及解剖学研究的进展,近年对胸腰椎爆裂骨折的损伤机制和形态学表现有了更深入的认识,为临床治疗提供了很好的理论依据,手术治疗得到长足发展。该文就胸腰椎爆裂骨折损伤机制及手术治疗研究近况作一综述。

简化无血清培养基分离U2-OS人骨肉瘤细胞系肿瘤干细胞

背景:已有实验应用成分复杂的无血清培养基从骨肉瘤组织中分离出干细胞样肿瘤细胞。目的:应用简化的无血清培养基在U2-OS人骨肉瘤细胞系中分离培养出骨肉瘤干细胞并对其作肿瘤干细胞的相关检验。设计、时间及地点:干细胞体外培养实验,于2006-02/2007-02在兰州大学第二医院骨科研究所完成。材料:U2-OS人骨肉瘤细胞系购自中科院上海生命科学研究院细胞库。无血清培养基为在DMEM/F12培养基中添加重组表皮生长因子(20μg/L)和重组成纤维生长因子(20μg/L),L-谷氨酰胺(2mmol/L),胰岛素(4U/L),青霉素G(1×l05U/L),链霉素(100mg/L)。方法:取在含血清培养基中贴壁生长的U2-OS细胞,接种于含有表皮生长因子和成纤维生长因子的简化无血清培养基中,形成悬浮生长的骨肉瘤细胞球后观察其增殖、分化能力。用免疫细胞化学染色法检测间充质干细胞标志CD44、CD105蛋白在骨肉瘤细胞球中的表达。反转录-聚合酶链反应法检测U2-OS细胞及其肿瘤干细胞中胚胎多能干细胞管家基因Oct3/4mRNA的表达。主要观察指标:①悬浮细胞球的形成。②肿瘤干细胞增殖活性。③肿瘤干细胞的侵袭能力。④CD44、CD105蛋白在骨肉瘤细胞球细胞中的表达。⑤肿瘤干细胞中Oct3/4mRNA的表达。结果:U2-OS人骨肉瘤细胞系中有极少数的细胞能在简化无血清培养基中增殖形成骨肉瘤细胞球,具有很强的增殖分化能力,其表面具有间充质干细胞的膜分子CD44、CD105,表达胚胎干细胞管家基因Oct3/4mRNA。结论:U2-OS细胞系中存在肿瘤干细胞,简化无血清培养基可用于分离培养骨肉瘤干细胞。

后路经伤椎置钉内固定治疗胸腰椎爆裂骨折脱位

目的探讨后路经伤椎椎弓根置钉治疗胸腰椎爆裂骨折脱位的临床疗效。方法对23例胸腰椎爆裂骨折脱位采用后路经伤椎及邻近椎椎弓根钉内固定、复位,椎管减压,关节突、横突间植骨融合,重建脊柱稳定性,观察术后伤椎复位情况。结果脱位完全纠正,伤椎骨折前缘高度恢复达85%～100%,术后脊柱后凸畸形即刻消失。术后随访6～32个月,平均13.6个月,所有患者伤椎高度无丢失,骨折及植骨融合良好,内固定无松动、断裂。结论后路经伤椎置钉内固定治疗胸腰椎骨折、脱位,能很好地恢复伤椎高度、矫正脱位及后凸畸形,增加固定椎的牢靠性,重建脊柱稳定性,避免了术后椎体高度丢失、内固定松动、断裂等并发症,是有效的治疗方法。

改良Stoppa联合Kocher-Langenbeck入路辅助3D打印技术治疗复杂髋臼骨折

目的:探讨通过改良Stoppa联合Kocher-Langenbeck(K-L)入路辅助3D打印技术治疗复杂髋臼骨折的临床疗效。方法:对2013年4月至2019年7月收治的70例复杂髋臼骨折患者手术方式进行回顾性分析。其中25例采用3D打印技术辅助手术(3D打印组),45例采用常规手术方式(常规手术组)。分别记录两组患者的手术时间、术中出血量、术中透视次数以及并发症、髋关节功能恢复情况等指标。结果:两组患者的手术时间、术中出血量、术中透视次数等各项指标比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。患者均获随访,时间(15.8±3.5)个月,患者均获骨性愈合。两组术后Matta复位评价结果比较差异无统计学意义(P>0.05);两组术后6个月Harris评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:采用3D打印技术辅助,利用改良Stoppa联合K-L入路治疗复杂髋臼骨折,可以帮助临床医生术前制定合理手术方案,避免术中不必要的操作及创伤,缩短手术时间,减少术中出血量,提高围术期的安全性且更便于术中骨折精准复位,有利于患者恢复。

乙酰肝素酶、CD44v6在骨肉瘤组织中的表达及其相关性研究

〗目的:探讨乙酰肝素酶(heparanase,HPA)、细胞黏附分子CD44v6在骨肉瘤组织中的表达及二者的相关性。方法:应用免疫组织化学染色的方法检测人骨肉瘤组织中HPA和CD44v6的表达。结果:HPA在骨肉瘤组织中表达阳性率为79.6%,CD44v6表达阳性率为55.1%,均显著高于骨软骨瘤中的20.0%和25.0%(P<0.05)。HPA表达与CD44v6表达呈显著正相关(r=0.663,P<0.001),两者表达与骨肉瘤临床分期、转移密切相关。结论:HPA和CD44v6在骨肉瘤组织中高表达可能促进肿瘤的黏附、侵袭和转移。

前路Z-plate钛板治疗胸腰椎陈旧性骨折

目的探讨前路减压、支撑植骨重建脊柱前中柱结构及Z-plate钛板内固定治疗胸腰椎陈旧性骨折的临床疗效。方法自2005年10月～2009年3月对17例胸腰椎陈旧性骨折的患者行前路减压、大块髂骨椎间支撑植骨融合及Z-plate钛板内固定治疗,影像学评价脊柱后凸畸形(cobb角)纠正、内固定稳定性及植骨愈合情况。结果随访3～26月,平均13.2月,后凸cobb角术前平均32.2°,术后平均12.8°。椎管减压彻底,内固定钛板无松动、移位及断裂,所有病例植骨均获骨性融合,脊柱后凸畸形获得良好矫正,无畸形矫正的丢失。结论前路减压支撑植骨融合钛板内固定,有利于畸形矫正和神经功能恢复,重建脊柱稳定性好,是治疗陈旧性胸腰椎骨折的有效方法 。

纳米氧化铈、铁酸铜的乳化燃烧合成及其光催化性能

采用金属硝酸盐、硝酸铵和油相在乳化剂作用下制备成油包水的乳状液,以燃烧的方式制备了纳米氧化铈(CeO_2)和铁酸铜(CuFe_2O_4),并成功将它们负载到氧化石墨烯(GO)上.实验结果显示:以燃烧法合成的CeO_2和CuFe_2O_4纳米粒子较为纯净,平均粒径分别约为29.1和13.5nm;二者分别负载到GO上后,团聚现象得到一定程度改善,光响应能力得到增强.在汞灯照射下,催化剂GO-CeO_2、GO-CuFe_2O_4对罗丹明B的2h光降解率分别可达92.3%、98.1%.这表明所合成样品GO-CeO_2、GO-CuFe_2O_4具有优异的光催化活性.

肿瘤干细胞与骨肉瘤相关研究进展

肿瘤研究中发现极少数有分化潜能,可无限增殖的亚细胞群具有干细胞特性,肿瘤的发生、生长、转移与之密切相关。肿瘤干细胞主要来源于成体干细胞,也可来源于祖细胞、分化细胞或骨髓细胞。白血病、乳腺癌、恶性脑瘤存在肿瘤干细胞已经明确,在前列腺癌、肺腺癌、肝癌、恶性黑色素瘤等多种肿瘤中也已初步分离出相应的肿瘤干细胞。骨肉瘤是常见的骨组织恶性肿瘤,肿瘤干细胞学说可更好地解释骨肉瘤恶性程度高、转移早、抗化疗等特性。应用无血清悬浮培养方法,干细胞样骨肉瘤细胞已初步得以分离、分析。该文就肿瘤于细胞及干细胞样骨肉瘤细胞的相关研究进展作一综述。