无创DNA产前检测在胎儿染色体非整倍体疾病筛查中的应用

目的探讨无创DNA产前检测技术在胎儿染色体非整倍体疾病产前筛查中的临床应用价值。方法回顾性分析2014年6月至2015年11月在广东省妇幼保健院医学遗传中心行无创DNA产前检测的5 946例孕妇的临床资料,并结合孕妇的血清学唐氏筛查、介入性产前诊断、妊娠结局随访等结果进行综合分析。结果 5 946例孕妇中,无创DNA产前检测提示62例异常,其中21-三体高风险17例,18-三体高风险10例,13-三体高风险3例,性染色体异常15例,其他染色体异常17例。经介入性产前诊断确诊21-三体综合征15例,18-三体综合征9例,13-三体综合征1例,性染色体异常10例,其他染色体异常1例。此外,5例无创DNA产前检测提示为三体高风险者,经穿刺确认结果为阴性,妊娠结局随访未见异常;2例无创DNA产前检测提示为阴性,而经穿刺确认结果为18-三体高风险者。该技术进行胎儿染色体非整倍体体筛查的灵敏度为92.59%,特异度为99.92%,假阳性率为0.08%,假阴性率为7.41%。结论无创DNA产前检测对胎儿染色体非整倍体疾病的检出率高,其在临床的推广应用对出生缺陷率的降低有重要意义。

无创产前基因检测技术在胎儿染色体非整倍体筛查中的应用研究

目的 探讨高通量测序平台的无创基因检测技术应用于产前诊断的可行性。方法 选择2012年4月到2013年5月在广东省妇幼保健院产前诊断中心就诊,孕龄12~32周的3711例单胎妊娠高危孕妇,记录临床指征、年龄、孕周等数据。采用高通量测序平台的无创产前基因检测技术对其外周血游离胎儿DNA进行分析。检测结果为高危的孕妇行羊膜腔穿刺或脐血穿刺术进行胎儿染色体核型分析。结果 3711例孕妇中游离胎儿DNA高通量基因测序技术检测出74例染色体高风险胎儿,羊水/脐血核型分析证实其中59例为染色体异常,分别为41例21-三体和8例18-三体,4例13-三体,5例性染色异常,1例其他常染色异常,1例21-三体和7例其他染色体异常证实为假阳性。结论 利用高通量测序平台的无创产前基因检测技术可快速、准确地检测出胎儿13、18、21染色体非整倍体异常,其敏感性、特异性与染色体核型分析技术具有较高的一致性。但是对于其他染色体异常准确性还有待技术完善来进一步提高,对于染色体微缺失、微重复的检测也日益受到众多专家学者的关注,这也是我们以后研究的方向之一。

无创基因检测在低龄与高龄孕妇中的临床应用价值比较

目的探讨无创基因检测在不同年龄段检测效能是否一致以及在高龄人群中的临床应用价值。方法回顾性分析了2017年1~12月在广东省妇幼保健院产前诊断中心接受无创产前筛查(non invasive prenatal testing,NIPT)筛查的10862例单胎孕妇,分为<35岁、35~39岁、≥40岁3组比较,对NIPT结果与染色体核型结果进行对比分析,计算并比较各年龄组的阳性预测值。结果共检出110例NIPT高风险孕妇,其中≥40岁组检出率高于<35岁和35~39岁组。有91例孕妇选择经产前诊断确认,其中60例NIPT结果与核型一致,31例不一致,无假阴性病例,各组筛查符合率无差别。3个年龄组对T21、T18、T13及性染色体的阳性预测值分别为<35岁93.75%、80.00%、25%、42.42%;35~39岁组90.00%、100.00%、100.00%、50.00%;≥40岁组为87.50%、100.00%、0.00%、75.00%。结论虽然高龄组染色体异常检出率高于低龄组,但是NIPT在高龄人群中的检测效能高,有一定的临床应用价值,对21和18-三体的筛查准确性高于13-三体和性染色体。

无创产前基因检测对血清学筛查临界风险孕妇的检测效能

目的探讨无创产前基因检测(noninvasive prenatal testing,NIPT)对血清学筛查临界风险孕妇的检测效能。方法通过选取广东省妇幼保健院2015年1月至2019年12月12342例血清学筛查临界风险单胎孕妇,采用高通量测序技术分析孕妇外周血胎儿游离DNA,结果提示高风险孕妇建议行羊水或脐血染色体核型分析或者染色体微阵列芯片分析,并对所有纳入研究的孕妇追踪随访母胎妊娠结局,未进行产前诊断的孕妇以随访结果为准,随访率100%。结果12342例血清学临界风险孕妇中,NIPT检测结果提示高风险74例,其中21-三体28例、18-三体3例、13-三体10例、性染色体异常22例、染色体缺失/重复11例,阳性率为0.60%(74/12342)。74例高风险孕妇通过进一步的结果验证,产前诊断阳性病例为21-三体20例、18-三体1例、13-三体4例、性染色体异常5例、染色体缺失/重复4例。21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征、性染色体异常和染色体缺失/重复阳性预测值(positive predictive value,PPV)分别为71.43%、33.33%、40.00%、22.73%和6.36%,NIPT低风险孕妇全部完成追踪随访,未发现21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征、性染色体异常和染色体缺失/重复漏诊病例。结论无创产前基因检测提高了21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征的临床检测效能,有效避免了血清学筛查临界风险的漏诊,不仅降低出生缺陷,还可以避免过度介入性产前诊断。

无创产前筛查检测母源性t(8;22)非平衡易位胎儿一例并文献复习

目的分析无创产前检测(NIPT)用于提示染色体非平衡易位的应用价值。方法经介入性产前诊断一例母源性t(8;22)非平衡易位胎儿,该例孕妇因NIPT结果提示8号染色体3472902-22994689区域存在长约19.52 Mb的片段重复,应用染色体微阵列分析(CMA)及染色体核型G显带分析胎儿羊水,同时对胎儿父母外周血行染色体核型G显带分析,并以“t(8;22)”为关键词在中国知识基础设施工程(CNKI)数据库、全国图书馆参考咨询联盟、PubMed及迈特思创外文医学信息资源检索平台对有详细源于亲代t(8;22)非平衡易位患者病历资料的相关文献进行检索。结果该例CMA显示胎儿在8p21.2-pter位置发生约23.2 Mb的重复,涉及184个基因;22q13.31-qter位置发生约5.9 Mb的缺失,涉及79个基因。胎儿羊水核型G显带分析结果为46,XN,der(22)t(8;22)(p21.2;q13.3)。母亲染色体核型为46,XX,t(8;22)(p21.2;q13.3)。父亲染色体核型结果正常,为46,XY,证实胎儿衍生22号染色体为母系遗传。经文献检索收集到2例国外患者发生源于亲代t(8;22)非平衡易位病例,且均表现有智力迟钝,说话不清,发育异常等临床症状。结论NIPT对胎儿非平衡易位染色体疾病筛查具有一定参考价值,需进一步介入性产前诊断及结合父母染色体核型分析,以指导遗传咨询及再生育需求。

无创产前基因检测在产前筛查异常指标中的应用

目的探讨无创产前基因检测（NIPT）在产前筛查异常指标中的应用价值。方法回顾性分析2014年11月至2016年8月在广东省妇幼保健院因产前筛查指标异常行NIPT检测的孕妇2 837例，分为单纯高龄组（预产期年龄≥35岁），单纯血清学筛查指标中位数倍数（MoM）异常组及单纯胎儿颈项透明层（NT）增厚（2.5～3.0 mm）组。NIPT高风险病例行羊水或脐血产前诊断分析，NIPT低风险病例于22～26周对胎儿结构行超声多普勒检查。随访全部病例并计算各产前筛查异常指标下NIPT对常见染色体非整倍体及性染色体非整倍体的检测效能。结果2 837例孕妇中，单纯高龄组共2 448例，其中NIPT高风险25例，1例拒绝产前诊断，产前诊断分析确诊17例；血清学筛查指标MoM值异常组共351例，NIPT提示性染色体异常3例，确诊2例；单纯NT增厚组共38例，NIPT提示21三体高风险1例，与产前诊断结果一致。高龄、血清学筛查指标MoM值异常及NT增厚（2.5～3.0 mm）3个指征下，NIPT对常见染色体非整倍体及性染色体非整倍体的检测效能如下：敏感度分别为17/17、2/2、1/1，特异度分别为99.7% （2 423/2 431）、99.7%（348/349）、100%（37/37），阳性预测值分别为68%（17/25）、2/3、1/1，阴性预测值分别为100%（2 423/2 423）、100%（348/348）、100%（38/38）。随访发现NIPT低风险孕妇中有8例异常，其中5例因胎儿超声结构异常引产，2例因孕妇产科并发症而流产，1例死产。结论对于高龄、血清学筛查指标MoM值异常及NT增厚（2.5～3.0 mm）的孕妇，NIPT对常见的染色体非整倍体筛查效能良好，对性染色体非整倍体的检出也有一定价值，有效地降低了漏诊和介入性产前诊断的比例；对于NIPT低风险的孕妇，常规产检和Ⅲ级超声多普勒排除胎儿发育异常也是必要的，以免漏诊异常胎儿。（中华检验医学杂志，2018, 41：509-513）

广东地区6668例孕妇无创DNA产前检测结果分析

目的分析无创DNA产前检测(NIPT)技术在临床应用的年龄及孕周范围,探讨该检测方法在广东地区不同年龄段孕妇胎儿染色体非整倍体疾病产前检查中的应用价值。方法回顾分析2014年6月16日-2016年3月31日因故需行无创DNA产前检测的孕妇临床资料6 668例,并将孕妇分别按照年龄和孕周各分为5组进行比较分析。结果 6 668例检测者年龄介于16~50岁,检测孕周10~37周。检测出21、18及13三体阳性结果共51例(0.77%),其中21-三体28例(0.42%),占三体阳性的54.90%,21-三体阳性发病率远远高于其他两种疾病。不同年龄组孕妇胎儿三体异常的发生率不同,其中孕妇年龄≥40岁组胎儿出现三体异常的比例最高(1.42%)。结论三体异常的发病率在不同年龄组孕妇胎儿染色体三体异常的发病率不同,尤其在高龄孕妇(≥40岁)中明显升高。因此,无创DNA产前检测对高龄孕妇胎儿染色体非整倍疾病的产前诊断具有重要的应用价值。

多重耐药铜绿假单胞菌毒力基因与耐药的相关性

目的了解多重耐药铜绿假单胞菌Ⅲ型分泌系统毒力基因exo U、exo S、exo T和exo Y的携带情况及耐药相关性。方法收集2家医院临床分离的铜绿假单胞菌多重耐药株50株、非多重耐药株50株,回顾性分析两组菌株对临床常用抗菌药物的耐药情况;采用PCR法检测毒力基因exo U、exo S、exo T和exo Y的携带情况及基因型别,数据进行χ2检验。结果 PCR结果显示多重耐药株中exo T基因阳性的占100%(50/50)、exo U基因阳性的占34%(17/50)、exo S基因阳性的占56%(28/50)、exo Y基因阳性的占90%(45/50);非多重耐药株中exo T、exo U、exo S、exo Y基因的阳性率分别是100%(50/50)、36%(18/50)、62%(31/50)和86%(43/50);铜绿假单胞菌中有57%(57/100)为exo U-/exo S+/exo T+/exo Y+型,有30%(30/100)为exo U+/exo S-/exo T+/exo Y+型,未检出exo U和exo S同时为阳性或阴性的菌株。结论 exo T和exo Y基因普遍存在于铜绿假单胞菌株中,多重耐药株和非多重耐药株的exo U、exo S、exo T及exo Y基因携带率无明显差异。

铜绿假单胞菌金属酶的检测及分析

目的了解耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的金属酶基因携带情况和基因型,同时探讨金属酶筛选的简便方法。方法对来自广州医科大学附属第一医院临床分离的50株耐碳青霉烯铜绿假单胞菌,采用双纸片增效法进行金属酶表型检测、采用PCR法进行金属酶bla_(VIM)和bla_(IMP)基因检测,并对基因进行序列分析。结果亚胺培南、亚胺培南+乙二胺四乙酸(EDTA)双纸片增效法筛选出11株(22.0%)金属酶表型阳性株,经PCR法确证其中9株产金属酶;碳青霉烯耐药株金属酶基因的携带率为18.0%(9/50),其中IMP型占88.9%(8/9),VIM型占11.1%(1/9)。结论耐碳青霉烯铜绿假单胞菌金属酶携带率高,以IMP型为主;亚胺培南和亚胺培南+EDTA双纸片增效法是金属酶表型筛选简便易行的方法。