原发性肾病综合征中HSP90与糖皮质激素抵抗关系的研究

目的:观察原发性肾病综合征(INS)患者外周血单个核细胞(PBMC)内热休克蛋白90(HSP90)的表达、分布及其与糖皮质激素受体(GR)之间的关系,以揭示HSP90在INS发病、糖皮质激素抵抗及治疗效应中的作用本质。方法:采用 RT-PCR和激光共聚焦免疫荧光技术,分别检测PBMC中HSP90、GR的mRNA表达水平及HSP90的亚细胞分布状况。结果: 发现INS患者与健康对照者PBMC中的GR表达无明显差异(P>0．05);HSP90的表达较健康对照组明显增高,并且激素抵抗组INS患者HSP90 mRNA表达显著高于激素敏感组INS患者(P<0．05)。INS患者的HSP90/GR比值明显高于健康对照组 (P<0．05)。HSP90亚细胞分布研究发现,健康对照组的HSP90主要分布在PBMC的胞浆中,核内含量极微;INS患者增加的 HSP90则明显趋向细胞核内分布(P<0．001)。结论:HSP90的异常表达及亚细胞分布变化可能是导致内源性、外源性糖皮质激素抵抗的重要机制,其一方面通过影响糖皮质激素对免疫系统的自身反馈调节,参与INS发病;另一方面则可能干预患者对外源性激素的治疗反应,影响临床疗效。

HSP 90在原发性肾病综合征发生和治疗中的意义

【目的】热休克蛋白90(HSP90)是糖皮质激素受体(GR)的伴侣蛋白,本研究探讨HSP90在原发性肾病综合征(INS)发生和糖皮质激素(GC)在治疗中的作用本质。【方法】以INS患者和GC敏感、抵抗的细胞株为研究对象,分析其HSP90、GR表达水平及HSP90的亚细胞分布;并采用HSP90特异性阻断剂研究HSP90对GC反应性的影响。【结果】与对照组比较,INS患者HSP90mRNA表达水平明显增高;而且INS患者中GC抵抗组HSP90mRNA表达显著高于GC敏感组(P<0.05)。深入研究发现对照组的HSP90主要分布在细胞浆中,核内仅有微量分布;INS患者的HSP90表达有所增加,并且GC抵抗组与敏感组比较,HSP90明显趋向细胞核内分布(P<0.001)。用HSP90特异性阻断剂后发现激素敏感细胞株的GC反应性也显著下降(P<0.01)。【结论】研究表明HSP90的异常表达及亚细胞分布变化可能是导致GC抵抗的重要机制,其一方面可能影响内源性GC对神经-内分泌-免疫网络的功能调节,进而影响机体免疫内环境的稳定,从而参与INS等免疫损伤性疾病的发病;另一方面则可能干预患者对外源性GC的治疗反应,影响临床疗效。

浆细胞CD45和CD31的表达与多发性骨髓瘤细胞分化程度的关系

目的:了解反映多发性骨髓瘤(MM)细胞生物学行为的免疫标记在骨髓不同阶段浆细胞中的表达情况,为临床调整治疗策略和判断疾病病程及预后提供依据。方法:用流式细胞术检测MM患者及对照组浆细胞表面相关分化抗原的表达情况,分析其在良、恶性浆细胞表达的差异,及其与原始浆细胞比例的相关性。结果:MM患者浆细胞CD45和CD31表达率低于对照组浆细胞;MM细胞CD45和CD31的表达率与原始浆细胞比例呈负相关;CD45表达与CD31表达呈现正相关。结论:浆细胞CD45和CD31的表达率与MM细胞的分化程度呈正相关,其表达可能与MM的疾病进展有一定关系。

肾脏疾病的诊断进展

本文综述了2009年1月至2012年1月,收录于PubMed数据库的肾脏疾病诊断方面的文献,解读了新出现的诊断标准、新型生物标志物,以及新型检查方法的特点及意义。

热休克蛋白90与类固醇激素受体功能的研究进展

热休克蛋白90(HSP90)是一类重要的应激蛋白,作为分子伴侣参与蛋白质的折叠、运输等过程。作为类固醇激素受体的伴侣蛋白,HSP90在一定程度上决定了其功能状态,因而极有必要对HSP90的异常合成、分布、功能及其与类固醇激素发挥生理效应和治疗作用之间的关系、调节机制作深入的探讨。现就目前的研究现状综述如下。

抑郁障碍患者下丘脑-垂体-肾上腺轴调节异常对辅助性T细胞17分化发育的影响

目的探讨抑郁障碍患者的下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamus-pituitary-adrenal,HPA)轴功能异常对辅助性T细胞17(Th17细胞)分化发育的影响。方法纳入包括单相抑郁和双相抑郁在内的首次发病未用过药的抑郁发作患者32例及正常对照25名,测定受试者的血浆促肾上腺皮质激素(adrenocorticotrophic hormone,ACTH)、血清皮质醇和细胞因子IL-17的浓度,采用逆转录-聚合酶链反应检测受试者外周血单个核细胞(peripher-al blood monouclear cells,PBMC)中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)和维甲酸相关核孤儿受体γt(retin-oid-related orphan receptor gammat,RORγt)mRNA的表达水平。结果抑郁障碍患者组和正常对照组的PBMC中GR mRNA的表达分别为25.14%和39.56%,患者组显著下降(Z=-2.76,P<0.01);患者组RORγt mRNA的表达、血清IL-17浓度分别为68.70%、83.83 ng/L,而对照组为24.74%、65.60 ng/L,患者组两个指标均显著升高(Z=-3.00,P<0.01;Z=-2.33,P<0.05)。患者组中GR mRNA与RORγt mRNA的表达、IL-17浓度均呈负相关(r=-0.70,P<0.01;r=-0.47,P<0.05);未见其余指标间存在相关(P>0.05)。结论 HPA轴负反馈调节异常对Th17细胞的分化发育及炎性诱导起重要作用。

PDCA循环在医学检验教学质量改进中的应用

目的探讨戴明环(PDCA循环)在检验医学专业教学管理中的运用,以提高检验医学专业教学质量,以及学生对检验医学专业教学的满意度,不断持续改进检验医学教学质量。方法在完善建立检验医学专业教学质量体系的基础上,在临床生化检验专业课程教学过程中,应用PDCA循环发现问题并解决问题。结果经过PDCA循环后,学生对医学检验专业教学的满意率提高到90%,检验医学专业教学质量得到明显提高。结论应用PDCA循环不断纠正在检验医学专业教学中发现的问题,以此保证教学质量,促进检验医学专业教学质量的持续改进。

头孢三嗪在输液中与10种注射剂配伍的稳定性

头孢三嗪广泛应用于临床,为增强疗效减少不良反应,临床上常用其钠盐溶于输液与其他注射剂配伍进行iv gtt治疗.我们模拟临床用药浓度,对头孢三嗪在5%GS中分别与维生素B6、维生素C、丁胺卡那霉素、氧哌嗪青霉素、酚横乙胺、10%KCl注射液、三氮唑核苷、氨茶碱、肌苷、ATP等10种注射剂配伍,观察外观、pH、紫外光谱及测定含量,为临床合理用药提供依据.1 仪器与试药1.1 仪器 7530G分光光度计(惠普上海分析仪器有限公司);FA1604S电子天平(上海天平仪器厂);DF-801型PH/mV计(登峰分析仪器厂).1.2 试药 头孢三嗪(recephin,豪夫迈-罗氏有限公司.批号B2065);维生素B6注射液(广东石岐制药厂,批号971221);维生素C注射液(广东石岐制药厂,批号971027);丁胺卡那霉素(浙江永宁制药厂,批号979019);氧哌嗪青霉素(山西博康药业有限公司,批号9703108);酚磺乙胺注射液(湖南制药厂,批号970806-3);10%KCl注射液(江苏方强制药厂,批号971001);

单、双相抑郁患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体表达研究

目的探讨单、双相抑郁障碍患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)mRNA的表达水平及其在亚细胞的分布的差异性。方法纳入符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版修订版(DSM-IV-TR)诊断标准的单相抑郁障碍(简称单相抑郁)患者35例、双相抑郁障碍(简称双相抑郁)患者23例和正常对照30名,检测受试者外周血单个核细胞(peripheral blood monouclearcell,PBMC)中GRαmRNA表达水平,共聚焦显微镜下观察GRα在PBMC中的亚细胞分布,测定血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和血清皮质醇的浓度。结果与对照组比较,单、双相抑郁患者组GRαmRNA表达均下降(P<0.05),且与HAMD总分均呈负相关(r=-0.62,P<0.05;r=-0.79,P<0.05)。随着病情的加重,单、双相抑郁的轻中度、重度亚组的GRαmRNA表达递减(P<0.05)。单、双相抑郁患者组PBMC上GRα表达均显著减少,且主要分布在细胞浆内,提示存在核分布异常;随着抑郁程度的加重,核内分布呈下降趋势(P<0.05);但单、双相抑郁患者组间无明显差异(P>0.05)。单、双相抑郁组血浆ACTH和血清皮质醇浓度与GRαmRNA的表达均无关(P>0.05)。结论提示GR在单、双相抑郁障碍的发病机制中均可能起重要作用,且GRαmRNA可能仅是抑郁状态指标,无法鉴别单、双相抑郁障碍。

多发性骨髓瘤患者骨髓CD19阳性细胞数值与疗效的相关性

本研究分析多发性骨髓瘤(MM)骨髓中CD19(+)细胞与骨髓瘤细胞数目及疗效的关系,探讨MM骨髓CD19(+)细胞变化特点。采用流式细胞术检测63例初诊MM患者骨髓中CD19(+)细胞、CD38(++)CD45(-)细胞、CD38(++)CD45(-)CD56(+)细胞的比值,分析不同分期、不同分型上述细胞比值的差异,以及它们之间的相互关系;分析43例初治时骨髓中CD19(+)细胞、CD38(++)CD45(-)细胞、CD38(++)CD45(-)CD56(+)细胞的比值变化与经过VADM、VD方案治疗4个疗程后疗效的关系。结果表明,63例初治患者骨髓中CD19(+)细胞比值Ⅱ期高于Ⅲ期,CD38(++)CD45(-)CD56(+)细胞比值Ⅲ期高于Ⅱ期;IgA组CD19(+)细胞比值明显高于IgD组且有高于其他组的趋势,IgA组CD38(++)CD45(-)、CD38(++)CD45(-)CD56(+)明显低于其它组;63例初治患者骨髓中CD19(+)细胞与CD38(++)CD45(-)、CD38(++)CD45(-)CD56(+)细胞的比值均呈负相关关系(分别为r=-0.3304,p=0.0052;r=-0.2414,p=0.0441)。分析43例患者(总治疗组)及VD方案治疗组(VD组)中的有效组CD19(+)细胞比值均分别高于无效组,VD组中有效组CD38(++)CD45(-)比值明显低于无效组,CD38(++)CD45(-)CD56(+)有低于无效组的趋势;总治疗组中有效组CD38(++)CD45(-)、CD38(++)CD45(-)CD56(+)均有低于无效组的趋势。结论:MM患者骨髓中CD19阳性细胞的比值与病情、分期有关,对于判断MM预后可能有一定价值。

pax2基因在肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的探讨pax2基因在大鼠慢性肾小管间质纤维化过程中的表达及其对肾小管上皮细胞转分化的可能作用。方法大鼠5/6肾切除造模,分别于术后2、4、6、8、10、12周取左肾皮质,采用逆转录(RT)-PCR及免疫组织化学的方法检测模型组和正常对照组的pax2和-αSMA的表达。结果病变组织见系膜细胞和基质增生,间质炎症细胞浸润,基底膜变厚。5/6肾切除模型组大鼠在术后第2周出现pax2mRNA的强表达,第4周达高峰,与正常对照组比较P<0.05,此后下降至痕量表达;α-SMA mRNA也在术后第2周表达逐渐增强,第8周达高峰,与正常对照组比较P<0.05,此后逐渐下降。免疫组织化学染色显示,5/6肾切除模型组pax2蛋白的表达、肾小管上皮细胞中α-SMA的表达与pax2mRNA、α-SMA mRNA的表达趋势相同。结论在大鼠慢性肾间质纤维化的过程中,受损的肾小管上皮细胞可向肌成纤维细胞转分化,肾小管发育胚胎基因pax2在此过程中的一过性表达可能起到重要的作用。

评估骨髓、外周血红细胞和粒细胞CD55、CD59检测在PNH诊断中的应用

目的评估骨髓红细胞、粒细胞CD55、CD59检测对阵发性睡眠性血红蛋白尿（paroxys—realnoturnal hemoglobinura，PNH）的诊断价值。方法收集107例PNH及其他-系至三系血细胞减少患者骨髓及外周血标本，采用流式细胞仪检测其红细胞、粒细胞CD55、CD59表达缺失情况。通过受试者工作特征（receiverOperatingcharacteristic，ROC）曲线评价各指标对PNH的诊断效能，并采用线性内插法计算其诊断PNH的诊断点。结果除PNH外，骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血、白血病及各类贫血患者的骨髓、外周血CD55-、CD59-红细胞、粒细胞比例，大多数均在5％以下。各疾病组间各指标比例差异均有统计学意义（P均〈0．05）。PNH患者各指标比例均较其他疾病患者高，且差异均有统计学意义（P均〈0．05）。造血干细胞疾病组与非造血干细胞疾病组的骨髓CD55-粒细胞比例差异无统计学意义（P〉0．05）。骨髓CD55-、CD59-红细胞、粒细胞比例诊断PNH的ROC曲线下面积均达0．700以上。各指标对PNH的诊断点分别为骨髓CD55红细胞4．81％，骨髓CD59-红细胞4．25％，骨髓CD55-粒细胞49．43％，骨髓CD59粒细胞4．63％，外周血CD55-红细胞3．99％，外周血CD59红细胞3．25％，外周血CD55-粒细胞4．17％，外周血CD59-粒细胞4．71％。结论骨髓红细胞、粒细胞CD55、CD59的诊断价值优于外周血，可以作为诊断PNH的辅助手段。

肝癌患者肝移植前外周血免疫表型分析

【目的】探讨肝癌患者肝移植前外周血免疫细胞表型的特征。【方法】通过多色流式细胞术对6例准备接受肝移植的肝癌患者及6例健康对照组外周血中T细胞、B细胞、单核细胞亚群、树突状细胞(DC)及NK细胞进行免疫表型分析。【结果】与健康对照组比较,肝癌肝移植受者组患者外周血CD4^+PD-1^+T细胞、调节T细胞(CD4^+CD25^+CD39^+)、B细胞、浆母细胞(CD27^(high)CD38^(high)IgD^-IgM^-)、经典型单核细胞(CD14^(high)CD16^-)及未成熟NK细胞(CD3^-CD56^(high))均升高,差异具有统计学意义(P<0.05);边缘区B细胞(CD27^+IgD^+)、非类型转换B细胞(CD27^+CD38^(dim)IgM^+)、中间型单核细胞(CD14^(high)CD16^+)及NK细胞(CD3^-CD56^+)比例降低,差异具有统计学意义(P<0.05);其余细胞比例未见明显差异。【结论】等待肝移植的肝癌患者外周血免疫细胞的表型与健康人有差异,对监测患者移植后的免疫状态及指导免疫抑制剂的使用有重要作用。

病态造血形态学特征与血液系统疾病相关性研究进展

以临床关于骨髓增生异常综合征(MDS)诊断的困惑为出发点,对各种病态造血的形态学特征进行了系统的整理,并将其针对不同血液系统疾病的诊断价值和预后评估作用作了全面的总结,以期为临床上凭借病态造血形态学诊断、分析和评估疾病预后提供参考.

肾小管上皮细胞炎性损伤中的转分化——获得组织干细胞潜能的研究

目的研究肾脏纤维化过程中转分化的肾小管上皮细胞获得的组织干细胞潜能。方法体外建立局部肾素-血管紧张素(AngⅡ)系统炎性环境下肾小管上皮细胞(NRK-52E)转分化的细胞模型,观察其胚胎肾发育基因Pax2和组织干细胞表面标志CD133分子的表达和变化情况。结果局部高浓度AngⅡ可刺激NRK-52E细胞表达Pax2和CD133分子,其作用呈剂量和时间依赖关系。结论炎性损伤导致肾小管上皮细胞转分化后可获得组织干细胞潜能。

不同方式灭活口咽拭子标本对2019新型冠状病毒实时荧光定量PCR检测结果的影响

目的:探讨不同灭活处理对2019新型冠状病毒核酸检测的影响。方法:回顾性分析中山大学附属第一医院2020年1月两例冠状病毒实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)核酸检测阳性患者的咽拭子标本。56℃30 min和75%乙醇分别处理1∶2,1∶4,1∶8,1∶16,1∶32比例稀释的咽拭子洗脱液,比较未灭活处理与灭活处理后样本的qPCR结果,并进行相关性及Bland-Altman分析。结果:未灭活处理与56℃30 min和75%的乙醇灭活处理后样本循环阈值(Ct)的相关系数均在0.99以上,P<0.001。未灭活与56℃30 min和75%的乙醇灭活Ct值差异均在1以下。结果相关性明显并具有良好的一致性。结论:使用56℃30 min和75%乙醇处理咽拭子标本,对后续2019新型冠状病毒核酸qPCR检测均无明显的影响。呼吁全国同行共同关注和参与2019新型冠状病毒的灭活后检测验证,推动2019新型冠状病毒的灭活检测,保护实验室检测人员的安全。

急性早幼粒细胞白血病分化综合征临床特征及对预后的影响研究

目的探讨急性早幼粒细胞白血病(APL)分化综合征(DS)的临床特征和影响预后的因素。方法收集中山大学附属第一医院2003—2010年收治的97例APL患者,采用维甲酸或维甲酸联合三氧化二砷(ATO)双诱导治疗,初诊者诱导分化治疗后WBC≥5×109/L联合化疗,完全缓解后采用ATO联合常规化疗巩固治疗方案。结果27例(27.83%)并发DS,出现DS中位时间为诱导分化治疗第6(2～24)天,其中24例(88.89%)发生在第1、2周。27例DS均给予地塞米松治疗,其中12例暂时停用诱导分化剂患者DS症状均缓解,15例继续使用者2例(7.41%)病情恶化死亡。中位随访37个月,DS组与未并发DS组患者无病生存(LFS)差异无统计学意义(P=0.269)。分析与DS发生的相关因素表明DS更多见于初诊WBC>10×109/L患者(χ2=4.994)。结论初诊WBC>10×109/L患者易并发DS,DS主要发生在诱导分化治疗前2周,DS对长期预后无影响。