献血者HIV RNA窗口期标本的追踪和随访

目的对处于HIV RNA窗口期的献血者做追踪、随访和验证。方法分别使用第3、4代酶联免疫试验(ELISA)方法(试剂)、免疫印迹试验(WB),以及核酸检测技术(NAT)定性和定量等方法,对在血液筛查中检出的1例献血者HIV窗口期不同时间(根据献血者的配合度间隔4-8 d)的血液标本做追踪和随访检测。采用ELISA方法以双试剂检测抗-HIV;同时采用全自动NAT单检分析系统,对该例血液标本做了HBV、HCV、HIV 3项NAT联检和鉴别试验。结果该例献血者标本首次检测:ELISA抗-HIV非反应性,NAT定性试验反应性;随后NAT定量试验和抗-HIV确认试验(WB)也同为阴性。采用双试剂ELISA和WB确认方法对献血者追踪、随访检测4次,至3周后确认为血清学抗-HIV转阳,获得到了1个完整的血清学转化结果。结论首次追踪、随访检测得以确认1例重庆地区病毒载量较高的HIV RNA窗口期献血者;NAT检测有利于阻截该HIV RNA窗口期献血者的血液流向临床。

重庆地区献血人群戊型肝炎病毒的血清学筛查初析

目的了解大重庆地区（包括重庆主城区及14个主要区县）献血人群戊型肝炎病毒（HEV）的血清学筛查情况。方法对2017年2—3月大重庆地区的10 008份献血者血液标本完成了常规的血清学HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP和ALT、ABO／Rh（D）血型初筛后进行ELISA抗-HEV IgM、IgG及抗原检测,并对检测结果进行统计分析。结果本次筛查显示大重庆地区10 008例标本,HEV IgM反应阳性167例（1.67%）;HEV IgG反应阳性4 923例（49.19%）;HEV抗原反应阳性2例（0.20%）。其中HEV IgG反应性率远高于全国其他地区;献血者在男女比例、职业、婚姻状况和受教育程度上均无统计学差异（P〉0.05）,但在年龄和地区上有统计学差异（P〈0.05）。结论大重庆地区献血者中HEV病毒血清学IgM、IgG的反应率较高,有必要进行后续的HEV RNA核酸检测及序列分析,并扩大重庆地区特别是某些HEV反应性率较高区县的筛查数量,为建立适合大重庆地区的区域化血液筛查策略提供数据支撑。

临床用血季节性特征分析及未来用血趋势预测

目的分析本地区2011—2016年临床用血情况,了解红细胞、血浆、冷沉淀和血小板的季节性用血特征,通过建立模型对未来用血趋势进行预测。方法采用回顾性研究方法,收集2011—2016年本地区12家具有代表性的医院临床用血资料,分析季节性特征,并利用指数平滑法模型预测2017年1—6月份的临床血液需求量。结果各个血液成分在4个季度的临床用血量均较平稳,差异没有统计学意义。采用的指数平滑法模型很好地预测了临床血液需求量,2017年1—6月份的预测值与实际值基本一致,实际值在预测值95%的置信区间内,相对误差在10%以内。结论临床各成分用血趋势可予以科学预测,应在不断收集数据的基础上及时采用科学方法进行预测,根据预测结果安排好采供血计划,从而满足临床用血需求。

血浆凝血因子Ⅷ含量检测实验室间比对分析探讨

目的以血浆凝血因子Ⅷ含量检测的实验室间比对为例,探讨通过实验室间比对验证实验室检测能力的可行性。方法同一份标本分为两份,将其中一份标本和标准品送至比对实验室检测,另一份留本实验室检测。比对实验室Ⅷ因子标准品各浓度点与其相应的检测百分比活性值建立曲线回归方程,从而实现浓度与百分活性的换算。对检测结果采用CLIA′88推荐的允许误差进行比对。结果比对实验室血浆凝血因子Ⅷ标准品曲线回归方程的相关系数为0.999 7,线性较好;本实验室与比对实验室血浆凝血因子Ⅷ的检测结果其重复性均小于10%,且本实验室的检测结果落在靶值±15%以内。结论本实验室对血浆凝血因子Ⅷ含量检测结果准确、可靠;实验室间比对是验证实验室检测能力的一种有效的途径。

质量体系文件管理信息系统的应用体会

随着“一法两规”和相关规程标准的颁布实施，质量管理已经成为血站管理工作中的核心部分，而质量体系文件的编写、审批、发布、实施、监控、持续改进是血站质量管理体系的一个重要的环节。目前，大多数血站的质量体系文件的管理还是使用人工管理的手段，存在着成本较高、管理复杂、修改发行时间相对较长等缺点。随着计算机使用的普及，希望寻求一种质量体系管理软件，它可通过明确的流程和权限控制，以及对历史操作的自动化记录，达到既可提高零散文件管理的效率，又能有效的实施、反馈并进行持续改进。

类抗-M致ABO血型正反定型不符及新生儿溶血病1例病例分析

临床ABO血型鉴定工作中,红细胞意外抗体的存在常常导致正反定型不符。常见的干扰ABO血型反定型的意外抗体包括同种抗体、自身抗体、药物抗体等[1]。除此之外,临床上尚存在一种特殊的＂类同种抗体＂[2],它能导致ABO血型正反定型不符,同时也困扰抗体鉴定结果。

罕见B(A)亚型新生儿溶血病及血型鉴定

目的对罕见B（A）亚型新生儿溶血病进行血清学分析,并探讨该类血型的鉴定策略。方法对1例新生儿溶血病标本应用血型血清学方法进行新生儿溶血病相关检测,对发现的B（A）亚型应用血型血清学、家系调查、分子生物学等方法进行鉴定。结果本例为罕见B（A）亚型新生儿溶血病,并仅与抗原性相对较弱的A抗原相关。家系调查发现3例B（A）亚型,基因分型及序列测定证实为B（A）07型。结论罕见B（A）亚型新生儿溶血病具有重要临床意义,其血型鉴定过程需要采用多种方法。

罕见血型A102/B(A)02的分子遗传学研究

目的研究A102/B(A)02的分子遗传学特点。方法 2016年6月-2016年12月用血清学方法检测先证者和其父母的ABO血型,采用聚合酶链反应SSP基因分型技术和SBT测序分型技术分别扩增先证者和其父母ABO基因的第6、7外显子序列,PCR产物直接测序分析,杂合子结果进行克隆测序分析。结果先证者红细胞上B抗原减弱,表现为AB3,直接测序发现第7外显子nt467C/T杂合和nt700C/T杂合,克隆测序和家系分析确认先证者血型为A102/B(A)02,与A101参比序列相比,A102在nt467碱基突变C>T,导致156位脯氨酸(CCG)变成亮氨酸(CTG),B(A)02的序列与参比序列B101相比,nt700发生碱基突变C>G,导致234位脯氨酸(CCC)变成丙氨酸(GCC)。结论a-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因位于7外显子的467位C>T突变是产生A102等位基因的原因,a-1,3半乳糖基转移酶基因位于第7外显子700位C>T突变是产生B(A)02等位基因的原因。

维持性血液透析患者Fg、vWF、D-D、hs-CRP水平与心血管疾病的关系探讨

目的探讨维持性血液透析（MHD）患者纤维蛋白原（Fg）、胁二聚体（D-D）、血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）对其心脑血管疾病预测价值。方法维持性血液透析患者49例，健康对照组30例。血液透析患者分心血管疾病（CVD）组17例和非心血管疾病组32例，检测血Fg、D-D、vWF、hs-CRP。结果心血管疾病组患者的年龄明显高于无心血管疾病组（P〈O．01）；CVD患者Fg、D-D、vWF、hs-CRP增高，与健康对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．05），合并CVD的MHD患者hs-CRP较无CVD的MHD患者明显增高（P〈0．05），且A组与B组比较，Fg、D-D、vWF亦有显著差异（P〈0．05）。结论Fg、D-D、vWF、hs-CRP是血管内皮损伤和微血栓形成及炎症反应的敏感性标志，这些分子标志物的检测对于早期诊断MHD的心血管并发症具有重要的临床意义。

中医药在细胞凋亡中的作用以及对输血治疗的影响

中医药经过长期的实践形成了治疗慢性血液肿瘤的中医理论,其作用机制复杂,而诱导肿瘤细胞凋亡是其重要机制之一。随着实验及临床研究的进一步丰富,有关中医药诱导血液肿瘤细胞凋亡的研究已达到分子水平。本文对中医药治疗慢性血液肿瘤干预细胞凋亡的研究以及对输血治疗的影响作一简要综述。

血站实验室设计和优化措施

血站实验室在设计上既有医学检验实验室的共性,也有血站血液检测的特殊性。该文通过对实验室模块、通道、围护结构、区域分配等实验室设计的基本概念的介绍,建议实验室设计的流程分为5个步骤,并从实验室的空调、通风和净化系统,给排水系统,电气系统,信息控制系统,安全防护系统等5个方面阐述了实验室系统的设计和优化措施,力求有效综合血站实验室设计工作的科学理论、技术和实践经验,为制订血站实验室的设计、建设标准提供参考依据。

脂肪血制备悬浮红细胞的质量研究

目的研究脂肪血制备的悬浮红细胞的质量变化。方法按常规制备滤除白细胞悬浮红细胞的方法处理轻、中、重度脂肪血及正常血,检测其过滤前后红细胞渗透脆性,观察红细胞在储存期K+、Na+浓度、pH值、游离血红蛋白浓度的变化。结果中、重度组红细胞渗透脆性在过滤后明显增高,轻度组、正常组无明显变化。储存期中、重度组红细胞K+浓度、游离血红蛋白浓度明显高于轻度组和正常组(P<0.05)。Na+浓度、pH值各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于轻度脂肪血可采用弃其血浆,利用红细胞,而对于中、重度脂肪血应该选择报废。

建立梯度模型探讨溶血对TMA核酸检测的影响

目的通过建立溶血程度和病毒浓度的梯度模型,研究标本溶血对基于转录介导扩增(TMA)核酸检测(NAT)结果的影响。方法采用超声波破坏红细胞制造溶血标本,验证游离血红蛋白(Hb)浓度并建立溶血梯度模型;按照多因素实验设计中的析因设计方式,在不同溶血程度的标本模型中加入不同浓度的检测目标病毒。溶血程度根据血浆Hb浓度分为5个梯度,依次为0g/L、5g/L、10g/L、20g/L、40g/L。HIV、HCV、HBV浓度分为2个水平,低水平组分别为:20IU/ml、10IU/ml、5IU/ml;高水平组分别为:60IU/ml、20IU/ml、15IU/ml。采用基于TMA技术的全自动系统进行NAT。对检测数据进行收集、整理和统计学分析。结果本研究所建立的每个Hb梯度内各标本管的Hb浓度之间比较差异无统计学意义(P>α)。核酸检测分3个批次进行测试,每个批次80例样本,共计240例。其中225个测试标本呈反应性,15个对照标本呈非反应性。结论在标本血浆Hb浓度≤40g/L时,溶血对基于TMA技术的NAT结果无显著性影响。

不同起始血液制备洗涤红细胞的质量比较

目的探讨分别采用悬浮红细胞和去白悬浮红细胞作为起始血液制备洗涤红细胞的质量差异。方法分别采用采血后7d以内的悬浮红细胞和去白悬浮红细胞各30例,设备采用相同程序,使用大容量低温离心机和全自动全血成分血分离机进行离心、分离制备洗涤红细胞,记录洗涤前后红细胞容量计算容量差,检测洗涤红细胞血红蛋白含量、上清蛋白质含量、储存期末溶血率及进行无菌试验。结果制备前后血液损耗量悬浮红细胞组为(17.2±4.3)mL,去白悬浮红细胞组为(12.9±3.5)mL,二者比较差异有统计学意义(P<0.05);采用悬浮红细胞制备的洗涤红细胞的血红蛋白含量、上清蛋白质含量、储存期末溶血率与采用去白悬浮红细胞制备的洗涤红细胞相比,差异均无统计学意义(P>0.05);所有入组血液细菌培养均无细菌生长。结论采用悬浮红细胞和去白悬浮红细胞制备洗涤的红细胞,二者质量指标检测无明显差异,均可作为洗涤红细胞起始血液。

献血者抗核抗体及抗可提取性核抗原抗体谱的检测

目的探讨抗核抗体(ANA)及抗可提取性核抗原(ENA)抗体谱在健康献血者中检测的临床意义。方法应用间接免疫荧光法检测ANA,同时采用免疫印迹技术检测抗ENA抗体,采用血液分析仪进行白细胞计数和分类。结果93例健康献血者中ANA阳性14例(15.1%),其中45～55岁阳性者11例(39.3%),随着年龄增高,ANA的阳性检出率逐渐增高(χ2=94.01,P<0.05);健康献血者中,不同性别ANA阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。与ANA阴性组比较,ANA阳性献血者白细胞、中性粒细胞绝对值和中性粒细胞相对数差异均有统计学意义(P<0.05)。结论健康人可能存在生理性自身免疫应答,但不一定能激活自身免疫系统,引起自身免疫损伤而导致自身免疫性疾病。

血液透析患者血液标志物检验的临床价值

目的:探讨维持性血液透析(MHD)患者标志物对血管疾病预测价值。方法:维持性血液透析患者49例,心血管疾病非维持性血液透析组23例(C组),正常对照30例。血液透析患者分心血管疾病组17例(A组)和非心血管疾病组32例(B组),检测血TG、TC、HDL-C、LDL-C、Fg、D-D、vWF、CRP。结果:心血管疾病组患者的年龄明显高于无心血管疾病组(P<0.01);A组患者TG、TC、HDL-C、LDL-C、Fg、D-D、vWF、CRP增高,与正常对照组及B组、C组相比差异具有显著统计学意义(P<0.05)。多元Logistic逐步回归分析证实:Fg、D-D、vWF、CRP是心血管疾病的致病危险因素。结论:MHD患者发生心血管并发症与Fg、D-D、vWF、CRP有一定的关系。

隐匿性HBV感染无偿献血人群KIR基因多态性的特征分析

目的探讨无偿献血人群中隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)献血者的KIR基因多态性及其特征分析。方法筛选2016年6月-2019年6月重庆市血液中心无偿献血人群中OBI献血者105例,采集外周血样提取DNA并作KIR基因分型;通过与国际等位基因网站公布的KIR基因型数据库对照分析,判断KIR基因型ID及单体型,计算基因表型频率(某种基因出现例数/总例数)、基因型频率(某中基因型出现例数/总例数)和基因频率(F)=√1-基因表型频率)。计数资料组间比较采用χ^2检验。结果105例OBI献血者均含有的KIR基因有2DL4、3DL2、3DL3和假基因3DP1;F>70%的KIR基因有2DL1、2DL3、3DL1、2DS4和假基因2DP1,其中KIR 2DS4第5外显子存在缺失的F为26.32%。F<30%的基因有2DL2、2DL5、2DS1、2DS2、2DS3、2DS5、3DS1。OBI献血人群分别与重庆汉族、河北汉族、江苏汉族和拉萨藏族比较,KIR 2DL3基因频率均降低(χ^2分别为9.598、12.236、13.719、10.974,P值均<0.05);OBI献血人群2DL2、2DL5、2DS2、2DS3与乌市维族比较差异均有统计学意义(χ2值分别为16.215、6.981、19.498、11.819,P值均<0.05);OBI献血人群2DL2、2DS1、2DS2、2DS3、2DS4与高加索人比较差异均有统计学意义(χ^2分别为22.477、3.877、34.937、6.909、4.271,P值均<0.05);OBI献血人群与重庆汉族相比,KIR 2DS4*del频率升高(χ^2=12.911,P<0.05)。OBI献血人群与长期慢性HBV感染组相比,2DS2、2DS3频率降低(χ^2分别为13.005、8.289,P值均<0.05),但2DS4、3DL1频率升高(χ^2分别10.032、3.865,P值均<0.05);OBI献血人群与强直性脊柱炎组相比,2DL3、2DS3基因频率降低(χ^2分别为7.851、16.504,P值均<0.05);OBI献血人群与男男同性恋HIV-AIDS组相比,2DS4、3DL1基因频率升高(χ^2分别为15.491、4.475,P<0.05);OBI献血人群与散发性急性戊型肝炎组相比,2DL1、2DL2、2DL3、2DL4、2DL5、2DS4、3DL2、3DL3、2DP1差异均有统计学意义(χ2分别为4.448、30.934、17.942、15.638、4.227、13.802、32.667、35.653、36.566,P值均<0.05)。共发现21种KIR基因型,其中基因型AA1(49.52%)最为常见,其次为BX2(18.1%)。结论OBI献血人群的KIR基因多态性具有自身特征,KIR 2DL3是OBI的潜在保护基因,KIR 2DS4*del则是OBI的潜在易感基因。

混合滤白浓缩血小板质量研究

目的通过改进混合血小板制备工艺,并用血小板专用滤白滤器对混合血小板进行白细胞过滤后,评估两个厂家制备的混合滤白浓缩血小板的质量。方法从400mL新鲜全血中分离白膜,在(22±2)℃保存约16h,6袋相同血型白膜汇集并分离出混合血小板,采用对照组和实验组两个厂家的血小板滤器过滤,检测过滤前后样品中血小板和白细胞计数、pH值、低渗休克、血小板最大聚集率和CD62p阳性表达率。结果过滤前两组混合浓缩血小板质量均符合国标要求,血小板计数、pH值、白细胞计数、CD62P阳性率、最大聚集率差异均无统计学意义(P>0.05);但过滤后产品实验组和对照组的pH值、最大聚集率和血小板回收率分别为(6.53±0.60)vs(7.00±0.06)、(5.5±3.8)%vs(77.4±14.7)%、(86.8±4.3)%vs(90.6±2.7)%,差异有统计学意义(P<0.05);而两组残余白细胞计数、CD62p阳性表达率和PCR分别为(3.00±4.00)×106/袋vs(2.00±3.00)×106/袋、(2.40±0.90)%vs(2.00±0.80)%、(7.30±5.90)%vs(5.60±3.70)%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用该制备方法经两组厂家血小板滤器过滤后,制备的混合滤白浓缩血小板均能满足现行国标要求,但实验组滤器对血小板pH和聚集功能有影响。