肝纤维化大鼠阴虚证表征的观察及一贯煎的干预作用

目的检测肝纤维化大鼠的阴虚证表征,观察滋补肝肾中药一贯煎对阴虚证表征的影响。方法将48只雄性Sprague-Dawlay大鼠随机分为4组,正常对照组、模型组、阳性对照组、一贯煎组,每组12只。除正常对照组外,均建立CCl4致肝纤维化大鼠模型,在CCl4停止注射后3 d,一贯煎组每只动物给予相应浓度的一贯煎浓缩液2 m L/200 g灌胃,1次/d。阳性对照组给予秋水仙碱灌胃,0.25 mg/kg,1次/d。正常对照组和模型组按相同方法灌服等量生理盐水。4周后,检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等肝功能指标;通过HE染色评价肝脏炎症活动度(G)和纤维化程度(S);检测大鼠体重、舌面干湿度、舌面温度、舌微循环血流速度、饮水、大小便等阴虚证表征。结果 1一贯煎在改善肝功能、减轻炎症、抗肝纤维化方面作用较好:一贯煎组ALT[(41.66±3.72)U]较模型组[(61.00±0.00)U]降低,差异有统计学意义(P<0.05);一贯煎组AST[(146.03±46.41)U]较模型组[(218.90±12.56)U]降低,差异有统计学意义(P<0.05);一贯煎组炎症活动度[(1.00±0.00)]较模型组[(3.00±0.00)]降低,差异有统计学意义(P<0.05);一贯煎组纤维化程度[(1.00±0.00)]较模型组[(2.00±0.00)]降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2肝纤维化大鼠具有阴虚证的表征,一贯煎能够改善阴虚证的症状。体重:模型组的体重[(380.66±37.29)g]较正常对照组[(507.00±17.69)g]减少(P<0.05);一贯煎组体重[(473.66±13.86)g]较模型组增高(P<0.05)。舌面干湿度:模型组的舌面干湿度[(0.000 36±0.000 28)g]较正常对照组[(0.007 32±0.001 26)g]减少(P<0.05);一贯煎组舌面干湿度[(0.012 83±0.005 85)g]较模型组增高(P<0.05)。舌面温度:模型组的舌温度[(34.48±1.24)℃]较正常对照组[(30.63±0.80)℃]增高(P<0.05);一贯煎组舌温度[(31.40±2.10)℃]较模型组降低(P<0.05)。舌血流速度:模型组的舌血流速度[(69.78±21.44)AU]较正常对照组[(31.43±1.58)AU]增高(P<0.05);一贯煎组舌血流速度[(40.50±3.89)AU]较模型组降低(P<0.05)。饮水:模型组饮水量[(37.52±10.46)m L]较正常对照组[(59.65±6.05)m L]显著减少(P<0.05);一贯煎组饮水量[(53.69±8.74)m L]较模型组显著增多(P<0.05)。大便:模型组大便[(1.00±0.00)分]较正常对照组[(2.00±0.00)分]分值减少(P<0.05);一贯煎组大便[(2.00±0.00)分]较模型组分值增多(P<0.05)。小便:模型组小便[(2.00±0.00)分]较正常对照组[(1.00±0.00)分]分值增高(P<0.05);一贯煎组小便[(1.33±0.57)分]较模型组分值减少(P<0.05)。结论肝纤维化大鼠具有阴虚证的特点,滋补肝肾中药一贯煎不仅能改善肝纤维化大鼠的病理,还能改善阴虚证的症状。该研究为肝纤维化大鼠阴虚证的诊断和药理机制的研究提供了新的思路。

中药动物药的炮制现状与对策分析

动物药是中药重要组成部分,多炮制使用,故炮制是否得当将直接影响其临床疗效。然而,相关研究基础薄弱,质量控制缺乏专属性,而且由于动物药多含蛋白质、多肽等遇高温易降解的物质,其高温炮制的合理性也有待论证。本文就动物药炮制现状及近期研究进行了总结与分析,提出以差异蛋白质组学及生物检定为核心技术的研究方法,为相关现代研究提供参考。

双向电泳分析水蛭酒炙前后差异蛋白表达

目的采用双向电泳分析水蛭(Hirudo)酒炙前后差异蛋白表达。方法分别采用饱和硫酸铵沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、直接裂解液法提取生水蛭和酒炙水蛭蛋白,十二烷基硫酸钠-丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对这3种方法进行筛选,建立双向电泳体系。分析水蛭酒炙前后蛋白表达谱,寻找相关差异蛋白。结果直接裂解液法所得条带数量最多,分布连贯清晰。水蛭酒炙前后蛋白含有量有显著性差异(P<0.01),共发现19个差异蛋白点,其中下调蛋白8个,上调蛋白11个。结论双向电泳所得差异蛋白可作为蛋白标志物以规范水蛭炮制工艺,并确保其稳定性。

黄芪薄层鉴别方法的改进

目的:改进黄芪的薄层鉴别方法。方法:以黄芪甲苷、芒柄花素、芒柄花苷和黄芪对照药材为对照,对黄芪药材进行了薄层鉴别条件的研究,改进了原标准的供试品前处理方法和展开系统。结果:薄层色谱斑点清晰,黄芪甲苷、芒柄花素和芒柄花苷的分离度好,Rf值适当。结论:所建立的黄芪薄层鉴别方法可以同时鉴别黄芪中的黄芪甲苷、芒柄花素和芒柄花苷,操作简单、耐用性佳,可替代原标准用于黄芪的鉴别。

桂枝的薄层鉴别及含量测定

目的对《中华人民共和国药典》(2020年版)中桂枝的薄层鉴别和含量测定方法进行改进。方法以桂皮醛、肉桂酸、桂枝对照药材为对照品,对桂枝药材进行了薄层鉴别和含量测定条件的研究;并对不同产地的桂枝药材进行薄层鉴别和含量测定。结果薄层色谱斑点清晰,分离度好,易于检出,重现性佳。含量测定方法分离效率高,重复性好。结论所建立的桂枝薄层鉴别和含量测定方法简单、专属性强,可同时检测桂枝中的桂皮醛、肉桂酸,可为药典的修订提供参考。

阴虚证表征的免疫性肝损伤小鼠特征及一贯煎的干预作用

目的:检测免疫性肝损伤小鼠的阴虚证表征,观察一贯煎对阴虚证表征的影响。方法:将80只雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、一贯煎组,每组20只。除正常对照组外,均建立免疫性肝损伤小鼠模型,在造模同时,一贯煎组小鼠予一贯煎浓缩液灌胃,0.4 m L/20g,1次/d,连续8周。阳性对照组给予联苯双酯灌胃,0.2 g/kg,1次/d,连续8周。正常对照组和模型组按相同方法灌服等量生理盐水。8周后,检测各组小鼠血清ALT、AST等肝功能指标;通过HE染色评价肝脏炎症活动度(G)和纤维化程度(S);检测小鼠体质量、舌面干湿度、舌温、舌和肝脏微循环血流速度、食物和饮水、大小便等阴虚证表征。结果:(1)一贯煎在改善肝功能、减轻炎症、抗肝纤维化方面作用较好(P<0.05)。(2)免疫性肝损伤小鼠具有阴虚证的表征,一贯煎能够改善阴虚证的症状(P<0.05)。结论:免疫性肝损伤小鼠具有阴虚证的特点;一贯煎能改善肝损伤小鼠的病理及阴虚证的症状。

黄芪饮片质量评价和分级标准探讨

目的:通过分析黄芪饮片外观指标与内在成分关系,得出黄芪饮片质量评价和制订其等级标准的参考依据。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱,流动相为乙腈-水(32∶68),蒸发光散射检测器检测,氮气流速为2.7 L·min^-1;漂移管温度为105℃;增益为1,测定黄芪甲苷成分含量。采用Waters XBridge C18色谱柱,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液(梯度洗脱),二极管阵列检测器检测,检测波长为260 nm,测定4种黄酮类成分含量。利用SPSS分析软件对饮片外观指标和各有效成分内在指标进行数理统计分析。结果:黄芪饮片外观指标与黄芪甲苷含量呈显著的负相关,即黄芪饮片直径和质量越大,黄芪甲苷含量越小;与毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷和芒柄花素4种黄酮类成分含量不呈相关性,但各黄酮类成分之间呈显著的、不同的正负相关性。结论:本实验结果为评价黄芪饮片质量和制订其等级标准提供参考。

苓桂术甘汤的现代临床应用与分析

目的了解苓桂术甘汤现代临床应用概况和优势病种,为经典名方苓桂术甘汤复方制剂开发和临床应用提供参考,也为其他经典名方现代临床应用分析分享思路。方法检索1979年1月1日至2020年2月11日中国知网、维普网、万方数据等数据库相关文献,并用Excel 2010对主治病症、病例数、药味组成、组方特点、药味剂量、用法用量、有效率和不良反应等关键信息整理、统计,从数据角度阐明苓桂术甘汤临床概况和优势病种,并对优势病种分析。结果符合要求的现代临床文献共计543篇,发现苓桂术甘汤在现代临床应用方面呈现主治病症较多、病例数多集中50~99例、药味组成以加味为主、总有效率超90%、药品不良反应少等特点;心力衰竭为苓桂术甘汤现代临床优势病种之一,心力衰竭治疗方表现药味组成仍然基于原方,药味剂量多样,以茯苓(30、15、20 g),桂枝(10、15、6 g),白术(15、10、20 g),甘草(6、10、3 g)常见;服用方法为水煎煮,每日1剂,分2~3次服,每次100~200 mL;组方规律以加减益气、活血、利水药味进行配伍。结论本文通过对苓桂术甘汤现代临床应用概况和优势病种进行分析,可以为其研制提供临床资料,指导其产业化的临床应用。

基于网络药理学的水蛭活血化瘀的作用机制研究

采用网络药理学方法分析水蛭活血化瘀的作用机制。基于文献检索构建水蛭化学成分数据库,采用Pharm Mapper服务器反向药效团匹配方法预测成分可能的作用靶标,并根据Drug Bank数据库中FDA批准的抗血栓和抗凝血靶标,筛选水蛭活血化瘀的作用靶标,通过对靶标的KEGG通路富集分析,并用Bio Grid数据库分析蛋白质间的相互作用,构建抗凝血、抗血栓相关的水蛭活性成分-作用靶点-代谢通路网络图,探讨水蛭活血化瘀的作用机制。该研究共收集水蛭化学成分49个,包括氨基酸、多肽、脂肪酸酯、生物碱、苷类、甾体等化合物,预测成分作用靶标共376个,筛选与活血化瘀作用相关的关键靶点5个,包括纤维蛋白原、纤溶酶原、凝血酶原、尿激酶型纤溶酶原激活剂及凝血因子X,其潜在调控通路包括补体和凝血级联反应、血小板活化、血管内皮生长因子信号转导及灶性黏附等通路,体现了水蛭多成分、多靶点、多途径作用的特点,为水蛭活血化瘀作用机制的阐明提供了科学依据,并为中药的机制研究提供参考思路。

动物类中药质量控制的生物评价研究

动物类中药是中药中极具特色的一部分,其药性峻猛,药效成分不明确。现行动物类中药的质量控制和评价方法无法有效地控制其有效性及安全性,严重制约了动物类中药的发展。生物评价不拘泥于个别成分的作用,以生物效应直接关联药效和安全性。随着生物技术的发展,生物芯片、高内涵分析等新技术的涌现,从相关靶点、通路或关键生化因子入手,拓展了生物评价方法的领域。生物评价具有药效相关、整体可控等优势,符合中医药质量控制的特点,将成为动物类中药质量标准化的重要发展方向之一。

基于SDS-PAGE技术的不同水蛭炮制品中水溶性蛋白的差异性研究

目的考察不同水蛭炮制品中水溶性蛋白的差异性。方法制备水蛭样品;采用考马斯亮蓝法测定水溶性蛋白质含量;SDS-PAGE法比较各样品中的蛋白的种类和丰度差异性;以生物检定技术为基础,检查水蛭及其炮制品的抗凝血酶活性。结果所用水蛭及其炮制品的抗凝血酶活性有明显差异;SDS-PAGE结果表明水蛭及其炮制品的蛋白种类、含量皆有明显差异。结论不同炮制方法中,动物药水蛭水溶性蛋白的含量差异明显,传统的高温炮制方法使水蛭中蛋白质发生了降解,其高温炮制的科学内涵有待深入的研究。

白术薄层鉴别方法的改进

目的改进白术的薄层鉴别方法。方法以白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ为对照品,对白术药材进行薄层鉴别条件的研究;并对不同产地的白术药材进行了薄层鉴别。结果薄层色谱斑点清晰,分离度好,能有效鉴别白术及其伪品;不同产地白术的成分的种类基本一致,但成分的量存在一定差异。结论所建立的白术薄层鉴别方法简单、专属性强、耐用性佳,可以同时鉴别白术中的白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ,可替代现有标准用于白术的鉴别。