色谱技术在肝素结构分析中的研究进展

肝素(heparin,Hp)是目前临床应用最为广泛的抗凝剂,是由重复二糖单元组成的多硫酸化酸性直链多糖。低分子量肝素(LMWHs)是以肝素为原料,经过化学或酶降解获得的相对分子质量相对较小的肝素衍生物,相对肝素,它们的出血副作用和免疫原性更小,皮下注射时生物利用度更高。肝素及低分子量肝素具有一系列结构特点,如相对分子质量偏大且有一定分布,多种糖残基同时存在,硫酸酯位置和数量呈现多样化,以及不同工艺产生的特殊残基的种类和含量不一等。该类药物结构的复杂性对分析方法提出了巨大的挑战,也限制了其质量控制提升、工艺优化、临床用药安全和新适应证拓展等。该文以色谱分析方法为中心,从结构分析的不同角度,包括单糖、二糖、寡糖、多糖的识别、组成分析和不同层次,系统地梳理和阐述近年来肝素类药物在色谱分析方法上的进展,并对这些方法的应用范畴、创新性、局限性等进行总结。该文将为肝素类药物的结构分析、质量控制提供较系统的方法学参考,为更多新方法开发提供思路,为更深入地研究肝素类药物结构、拓展其应用提供有力支撑。

基于Zeta电位表征血小板因子4/依诺肝素钠复合物的方法学研究

目的建立Zeta电位法研究血小板因子4/依诺肝素钠(PF4/Eno)复合物表面电荷的方法,以比较和评价肝素类样品潜在的免疫原性。方法考察不同孵育时间、不同PF4/Eno摩尔比例对PF4/Eno复合物表面电荷的影响,并对方法的精密度和专属性进行分析验证。结果孵育时间在10~30 min时PF4/Eno复合物较为稳定;PF4/Eno复合物的PHR_(ζ=0)值约为12,PF4/Hp复合物的PHR_(ζ=0)值约为48,差异有统计学意义(P<0.001),表明方法具有较好的专属性;日内精密度RSD<8.0%,日间精密度RSD为8.2%,表明方法精密度良好。结论建立的方法可以用于比较和评价肝素类样品潜在的免疫原性,并为依诺肝素钠仿制药的免疫原性一致性评价提供理论和方法上的参考。