β-榄香烯通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导A549细胞发生保护性自噬研究

目的初步探讨β-榄香烯能否通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路来诱导A549细胞发生自噬。方法采用MTT法检测β-榄香烯对A549细胞的增殖抑制率,荧光显微镜下观察吖啶橙染色后的细胞自噬现象,应用Western blot检测β-榄香烯处理后的LC3-Ⅱ、PI3K、AKT、mTOR蛋白变化。结果β-榄香烯可明显抑制A549细胞增殖,且抑制效果随浓度的增加而增强,β-榄香烯对A549细胞的IC50值为72.45μg·mL^(-1)。吖啶橙染色结果显示,低浓度(10μg·mL^(-1),50μg·mL^(-1))β-榄香烯处理A549细胞后形态无异常,用100μg·mL^(-1)、200μg·mL^(-1)、500μg·mL^(-1)浓度的β-榄香烯处理A549细胞时,细胞质逐渐出现空泡化,酸性囊泡增多,而细胞核逐渐浓缩。随着β-榄香烯浓度的增加,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ蛋白表达逐渐增高,而PI3K、AKT和mTOR蛋白表达逐渐降低,具有剂量依赖性。结论β-榄香烯能够通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路促进A549细胞自噬,且具有剂量依赖性。