血管紧张素转化酶基因多态性与Ⅱ型糖尿病肾病的关系

目的:探讨血管紧张素转化酶(ACE)基因插入/缺失多态性及活性与Ⅱ型糖尿病肾病的关系。方法:应用聚合酶联反应方法检测157例Ⅱ型糖尿病患者和50例健康对照的ACE基因型,同时检测血浆ACE水平。结果:糖尿病肾病组的DD基因型频率及D等位基因频率都高于对照组的相应频率,差异有统计学意义(P<0.05)。DD基因型ACE水平高于II基因型。结论:ACE基因的DD基因型与血浆ACE活性有关,ACE基因缺失多态性可能为Ⅱ型糖尿病肾病的遗传因素。

单纯性肥胖与合并2型糖尿病患者血脂水平的变化

目的 :研究单纯性肥胖、肥胖合并2型糖尿病患者血浆脂蛋白(a)[Lp(a)]等血脂水平的差异及变化规律。方法:检测和比较单纯性肥胖者、肥胖合并2型糖尿病者及健康对照共160例血脂指标。测定项目包括Lp(a)、载脂蛋白A(apoA -Ⅰ )、载脂蛋白B(apoB)、甘油三脂 (TG)、胆固醇 (TC)、高密度脂蛋白 (HDL -C)、低密度脂蛋白(LDL -C)和极低密度脂蛋白 (VLDL -C)。结果:单纯性肥胖组和肥胖合并2型糖尿病组的血浆Lp(a)、TC、TG、LDL -C、VLDL -C、apoB均比健康对照组高 ,差别有统计学意义(P<0.01) ,而HDL -C、HDL -C2、apoA的水平低于健康对照 ,差别也有显著性(P<0.01) ;HDL -C3 无统计学意义 (P>0.05)。结论:单纯性肥胖者和肥胖合并2型糖尿病的血脂代谢异常 。

pEGFP-C2-人类p100蛋白SN和TD片段质粒构建

目的:分别构建含有人类p100蛋白SN片段和TD片段基因的真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C2-p100-SN和pEGFP-C2-p100-TD。方法:利用EcoRI和BamHI限制性内切酶对已构建好的质粒PSG5-p100-SN和PSG5-p100-TD进行双酶切以获得目的片段p100-SN和p100-TD基因片段,回收纯化后连接到质粒pEGFP-C2上。结果:通过对重组质粒进行菌落PCR鉴定以及酶切鉴定均能从PCR产物和酶切产物中观察到p100-SN和p100-TD片段。结论:成功构建了可以在真核细胞内表达绿色荧光蛋白和目的蛋白的融合蛋白的重组质粒pEGFP-C2-p100-SN和pEGFP-C2-p100-TD,可为有关人类p100蛋白功能及作用机制研究奠定基础。

血清胱抑素C检测对肾小球损伤疾病早期诊断的意义

肾小球滤过率（GFR）是监测肾脏功能的重要指标,目前临床上通常将血尿素（Urea）、血肌酐（Scr）和β2-微球蛋白等作为评估GFR的内源性指标,此法虽然简单易行,但易受到许多肾外因素的影响。笔者检测了不同类型、

血管紧张素转化酶基因多态性与妊娠高血压综合征的关系

目的 :探讨血管紧张素转化酶 (ACE)基因插入(I)/缺失 (D)多态性与妊娠高血压综合征 (妊高征 )的关系。方法 :应用聚合酶链反应 (PCR)方法检测41例妊高征患者和50例正常妊娠者的ACE基因型 ,同时检测血浆ACE水平。结果 :妊高征组的DD基因型频率及D等位基因频率分别为39 %和61 % ,均高于对照组的相应频率18 %和38 % ,差别有统计学意义 (P<0.05)。DD基因型的ACE活性显著高于其他2种基因型。结论 :ACE基因缺失多态性可能为妊高征发病的重要遗传因素 ,ACE活性受到基因的调控。

定量C-反应蛋白测定的临床意义

目的 :探讨C -反应蛋白 (CRP)在各种炎症的急性期或组织损伤时浓度的变化。方法 :使用OrionDiag nostica公司的QuikreadCRP定量分析仪对234例各种炎症及50例正常人的血清进行测定。结果 :在炎症的急性期CRP的浓度明显高于正常对照组 (P<0.05)。结论:CRP测定可用于各种炎症患者支持诊断。

严重急性呼吸综合征LDH与HBDH水平的异常改变

目的 :研究严重急性呼吸综合征的患者乳酸脱氢酶与α -羟丁酸脱氢酶的改变特点,结合其他临床指征,探讨其水平与肺损伤的关系。方法 :收集2003年5月～7月住院的35名SARS患者和62名健康人的抗凝血,进行乳酸脱氢酶与α-羟丁酸脱氢酶测定,并与肺心病及急性白血病患者的乳酸脱氢酶与α -羟丁酸脱氢酶的改变进行比较;依据诊断标准将35例SARS病人分为重症组和普通组,其化验结果进行比较。结果 :与正常人相比,SARS组的乳酸脱氢酶(297.31±85.12)和α -羟丁酸脱氢酶(291.09±74.08)均显著增高 ,差别有统计学意义;与正常人相比,肺心病和急性白血病患者乳酸脱氢酶与α -羟丁酸脱氢酶均显著增高;重症SARS组明显高于普通SARS组差别有统计学意义。结论 :SARS患者的LDH和HBDH显著增高 ,其水平可能与肺组织的急性损伤活动程度相关;对于重症SARS的诊断有重要的临床意义;

天津市部分高校高知人群血脂水平的分析

目的 :了解天津市部分高级知识分子的血脂状况并为进一步的防治工作提供依据。方法 :测定380名相关人员的血甘油三酯 (TG)和血总胆固醇 (TC)水平 ,并与正常参考标准进行比较分析。结果 :(1)该市部分高级知识分子的血脂水平(TG:1.80±1.12mmol/L,TC:5.46±0.94mmol/L)高于血脂异常防治对策小组推荐的正常参考标准(TG<1.7mmol/L,TC<5.2mmol/L)。(2)只有28.7%(109人)两项指标都在合适水平;TG和TC超过正常参考标准的人员分别达总体的42.6%和60.8 %。结论:该市部分高级知识分子的血脂水平令人堪忧。

pEGFP-CI-G3BP转染Hela细胞及其在细胞中的表达

目的:了解G3BP蛋白在细胞中的表达及定位。方法:利用脂质体lipofectamine2000将提取的质粒pEGFP-CI-G3BP转染进入Hela细胞,培养24h后荧光倒置显微镜观察绿色荧光的表达情况及其在细胞中的定位。结果:pEGFP-CI-G3BP质粒被成功转入Hela细胞内,转染后绿色荧光可高效表达,分布在细胞胞浆中。结论:脂质体法是一种高效的转染pEGFP-CI-G3BP的方法,表达的G3BP蛋白定位于细胞的胞浆部分。

新型转录共激活因子人类p100蛋白的抗体制备

目的:制备抗p100蛋白的特异性抗体。方法:利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)融合蛋白的方法纯化人类p100蛋白Tudor片段作为抗原,经免疫动物获得多克隆抗血清,并利用Westernblot的方法检测抗体的特异性。结果:获得的抗p100蛋白抗体,经体内和体外试验验证的确可与其相应抗原特异性结合。结论:制备的抗p100蛋白的抗体通过与其抗原即人类p100蛋白在体内和体外试验中的特异性结合,为进一步探讨生理条件下p100蛋白在细胞内信号传导通路的作用提供了可靠工具。

天津海河医院SARS患者的临床检验结果分析

目的 :分析严重急性呼吸综合征患者血液学指标的改变特点,为临床诊治提供实验依据。方法 :对2003年5～8月35名SARS患者的外周血血细胞,生化等指标进行检测,同时对患者的各项指标进行发病早期,中期和恢复期的动态观察;对16例疑似患者外周血血细胞,生化等指标进行检测与SARS患者发病早期的化验结果进行比较。结果 :发病早期,35例SARS患者白细胞在正常范围内的为54.3%,低于4.0×109/L为40 %;淋巴细胞绝对值低于1.0×109/L为78.0%,正常范围的为22.8 %;RBCHGBPLAT均正常。在发病早期心肌酶指标 ,谷草转氨酶(AST)乳酸脱氢酶(LDH)浕 -羟丁酸脱氢酶(HBDH)肌酸激酶(CK)显著增高,与疑似患者相比,差别有统计学意义。结论 :SARS患者的发病早期LYM,白细胞的显著降低;发病早期的ASTCK、LDH和HBDH显著增高,对SARS患者和疑似患者的确诊,有重要的临床意义。

人Prp8蛋白基因片段的克隆

目的:构建人Prp8基因全长真核表达质粒。方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,两步法合成cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人Prp8基因的四段序列,首先克隆至pTZ57R/T载体,再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1(+)-Prp8重组质粒。结果:RT-PCR法获得Prp8基因的4段序列,长度分别为2025、1090、1966、1963bp,分别与pTZ57R/T载体连接后,选择合适的酶切位点再连接成全长序列,然后将全长序列和pcDNA3.1(+)真核表达载体连接、转化、酶切鉴定及序列分析后,证实pcDNA3.1(+)-Prp8重组质粒构建成功。结论:成功克隆了人Prp8的编码基因,并构建了表达载体pcDNA3.1(+)-Prp8。

豆科5种植物的过氧化物酶同工酶的分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了豆科植物５种，１变型２４份材料的过氧化物酶同工酶，共出现９种酶谱．实验表明同季节的种内酶谱差异较小，甚至无变化，反映出种内过氧化物酶同工酶酶谱具有一定的稳定性．并依据酶谱的属间距离。

基因转录与pre-mRNA剪接的偶联蛋白

真核基因的表达是一个复杂的过程,包括转录、pre-mRNA剪接、翻译等步骤。其中转录和pre-mRNA的剪接是基因表达中的两个重要环节,它们都要通过复杂的蛋白复合物来执行功能。目前研究发现这两个过程并不是绝对独立的,而是偶联在一起同时进行的。多种蛋白的偶联作用将二者联系在一起。RNA聚合酶Ⅱ、SKIP、SMN以及新近发现的人类P100蛋白不仅参与基因转录调节,同时它们在剪接加工中也具有相应的作用。

脑卒中患者血管紧张素转化酶基因插入/缺失多态性分析

目的探讨血管紧张素转化酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与脑卒中的关系。方法用聚合酶链反应(PCR)方法观察比较131名脑卒中患者及与其年龄相匹配的健康人50名的ACE基因I/D多态性。在实验中插入特异引物进行二次PCR扩增,以避免纯合子DD基因型的误判。结果健康组对照、脑梗死组和脑出血组的基因型分布有差别(χ2=13.87,P=0.008),脑梗死组和脑出血组的DD基因型频率高于健康对照组的相应频率(χ2=9.21,P=0.002;χ2=8.76,P=0.003)。健康对照组、脑梗死组和脑出血组的D等位基因频率有差别(χ2=14.23,P=0.005),脑梗死组和脑出血组的D等位基因频率高于健康对照组的相应频率(χ2=11.17,P=0.001;χ2=10.87,P=0.001)。结论ACE基因具有I/D多态性,脑卒中与DD基因型和D等位基因有一定相关性,是可能引发脑卒中的危险遗传因素。