PLA2R1相关膜性肾病患者血浆差异表达多肽的鉴定

目的探讨M型磷脂酶A2受体(PLA2R1)相关膜性肾病患者血浆多肽谱的变化。方法选取28例确诊为原发性膜性肾病(PMN)且抗PLA2R1抗体阳性的患者(PMN组)和28名健康体检者(正常对照组)。采用纳升级高效液相色谱串联质谱(nano-HPLC-MS/MS)检测所有研究对象血浆多肽,筛选出PMN患者与正常对照者的差异表达多肽。对差异表达多肽进行生物信息学分析。采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)对差异表达多肽进行验证。采用Spearman相关分析评估PMN患者血浆C4b与抗PLA2R1-IgG抗体的相关性。结果采用nano-HPLC-MS/MS检出903条多肽,有31条在PMN组和正常对照组之间呈差异表达,其中表达下调15条、表达上调16条;有8条来源于C4b。京都基因与基因组数据库(KEGG)通路分析结果显示,差异表达多肽的前体蛋白涉及的通路主要为补体和凝血级联。LC-MS/MS验证结果显示,PMN组血浆C4b水平显著低于正常对照组(P<0.001)。Spearman相关分析结果显示,PMN患者C4b与抗PLA2R1-IgG抗体无相关性(r=0.03,P=0.877)。结论C4b或可作为PLA2R1相关膜性肾病患者潜在的生物标志物。

1例COVID-19患者的实验室指标变化及意义

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是单链正义RNA病毒,属于β类冠状病毒,与严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合症冠状病毒(MERS-CoV)同种属^([1-2])。现有的研究结果显示,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的传染性和病死率都非常高,围绕该病毒的诊断和治疗亟待突破。尤其是对病毒感染免疫的研究将在实验室诊断和疫苗的研发中发挥至关重要的作用。本文就上海首例COVID-19患者整个诊治过程中的实验室指标变化进行报道,为COVID-19的诊断治疗提供信息。

血浆氧化三甲胺水平与妊娠糖尿病的相关性

目的探讨血浆氧化三甲胺(TMAO)水平与妊娠糖尿病(GDM)的相关性。方法选取孕24~28周时接受口服糖耐量实验(OGTT)检查的单胎妊娠孕妇272例,其中GDM患者178例(GDM组)、正常孕妇94例(正常妊娠组)。记录所有孕妇的一般资料,同时检测孕早期(孕周≤13周)血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白(apo)A1、apo B100、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、空腹血糖(FBG)以及孕中期和孕晚期的血浆TMAO水平。采用多因素Logistic回归分析评估GDM发生的危险因素。结果GDM组孕早期血清TG、FBG水平均高于正常妊娠组(P<0.05);而GDM组孕早期血清ALT、TC、HDL-C、LDL-C、apo A1、apo B100水平与正常妊娠组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。GDM组孕中期血浆TMAO水平显著高于正常妊娠组(P<0.05)。GDM组孕中期与孕晚期血浆TMAO水平差异无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,孕早期FBG、TG及孕中期TMAO水平升高是GDM发病的独立危险因素[比值比(OR)值分别为3.883、2.146、1.514,95%可信区间(CI)分别为1.805~8.353、1.245~3.702、1.079~2.125]。结论孕中期孕妇血浆TMAO水平与GDM的发病风险有关。

重组人隐花色素蛋白Ⅰ的表达纯化及其在制备放疗保护剂中的应用

放疗是治疗肿瘤的最常用手段之一,为寻找能够保护肿瘤组织周边正常细胞的放疗保护剂,通过原核表达质粒的构建,利用大肠杆菌BL21(DE3)诱导并成功表达出人隐花色素蛋白Ⅰ(h CRY1)。采用包涵体溶解、梯度透析复性、镍柱亲和纯化以及超滤浓缩的蛋白纯化工艺,1 L菌液可收获10-15 mg纯度超过95%的h CRY1。在Ha Ca T细胞中通过细胞DNA损伤修复中所产生的H2A.X foci荧光强度的定量检测,验证了纯化所得的h CRY1具有射线损伤防护功能;通过对经过h CRY1以及对照蛋白处理后的细胞凋亡情况的检测排除了h CRY1的毒副作用对H2A.X foci荧光强度的影响。这些为进一步研究h CRY1提供了便利条件,也为将h CRY1开发成为新的放疗保护剂提供了理论基础。<正>1中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室,北京1001012安徽大学生命科学学院,安徽合肥2306013中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室,广东广州5100604四川省肿瘤医院·研究所肿瘤内科,四川成都6140005广州达博生物制品有限公司广东省肿瘤靶向治疗新药研发企业重点实验室。

天花粉蛋白通过影响Foxp3的泛素化水平增强CD4^(+)Treg的体外诱导的初步研究

为研究中药天花粉蛋白(trichosanthin,Tk)能否在体外条件下促进CD4^(+)Treg定向诱导分化及其效率,并初步探讨Tk的负向免疫调节作用与Foxp3分子泛素化水平调控的可能机制,建立经典Treg诱导体系,即分离小鼠脾脏淋巴细胞并加入抗CD3和抗CD28抗体以及IL-2、TGF-β,共同诱导Treg。接着,向培养体系中加入Tk(1.5μg/mL)连续培养3 d,FACS检测发现加入Tk后Treg百分比显著上升(P<0.05);Treg特异性转录因子叉状头转录因子3(forkhead box protein 3,Foxp3)的蛋白表达水平显著上升(P<0.05);Real-Time PCR检测显示其mRNA水平降低显著(P<0.05)。进一步的研究建立过表达Foxp3的HEK293T细胞系,Western blotting检测结果显示,Tk可延长Foxp3蛋白的半衰期(P<0.05),并降低其泛素化水平。以上结果提示,Tk具有负向免疫调节作用,并能提高Treg的百分比及抑制Foxp3蛋白的泛素化,起到稳定Foxp3分子的作用。