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hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体促进Hep-3B细胞凋亡
1
作者
武寅龙
杨敏
《成都医学院学报》
CAS
2017年第3期247-253,共7页
目的考察hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体蛋白是否具有促进Hep-3B肿瘤细胞凋亡的作用。方法利用pEGFP-N1质粒构建5种包含hSmarca2-b转录变体的5′调控序列、全长开放阅读框的部分cDNA序列以及能进一步编码产生hBRM-b-EGFP融合蛋...
目的考察hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体蛋白是否具有促进Hep-3B肿瘤细胞凋亡的作用。方法利用pEGFP-N1质粒构建5种包含hSmarca2-b转录变体的5′调控序列、全长开放阅读框的部分cDNA序列以及能进一步编码产生hBRM-b-EGFP融合蛋白的过表达载体;脂质体转染过表达载体分别进入hSmarca2-b表达缺失的Hep-3B肝癌细胞,通过RT-PCR和Western Blot分别验证其mRNA的转录及hBRM-bEGFP融合蛋白的表达,并通过荧光成像进一步验证融合蛋白的产生;流式检测转染hBRM-b-EGFP过表达载体后的Hep-3B细胞,考察相对于空载体组凋亡情况的改变。结果 RT-PCR显示,Hep-3B细胞转染后hSmarca2-b变体表达水平从无到较高,Western Blot检测到符合理论大小的融合蛋白,荧光成像时可见转染细胞发出的绿色荧光,证明过表达载体构建成功;相对于空载体组,其中4种变体的过表达均使凋亡细胞比例增加近100%,单侧t检验显示差异有统计学意义(P<0.05)。结论 hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体蛋白具有促进Hep-3B肝癌细胞凋亡的作用。
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关键词
hSmarca2-b
hBRM-b异构体
可变剪接
溴区结构域
AT-hook模体
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题名
hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体促进Hep-3B细胞凋亡
1
作者
武寅龙
杨敏
机构
成都医学院基础医学院
成都医学院检验医学院
出处
《成都医学院学报》
CAS
2017年第3期247-253,共7页
基金
四川省教育厅重点项目(No:10ZA134)
发育与再生四川省重点实验室研究基金(No:SYS10-008)
文摘
目的考察hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体蛋白是否具有促进Hep-3B肿瘤细胞凋亡的作用。方法利用pEGFP-N1质粒构建5种包含hSmarca2-b转录变体的5′调控序列、全长开放阅读框的部分cDNA序列以及能进一步编码产生hBRM-b-EGFP融合蛋白的过表达载体;脂质体转染过表达载体分别进入hSmarca2-b表达缺失的Hep-3B肝癌细胞,通过RT-PCR和Western Blot分别验证其mRNA的转录及hBRM-bEGFP融合蛋白的表达,并通过荧光成像进一步验证融合蛋白的产生;流式检测转染hBRM-b-EGFP过表达载体后的Hep-3B细胞,考察相对于空载体组凋亡情况的改变。结果 RT-PCR显示,Hep-3B细胞转染后hSmarca2-b变体表达水平从无到较高,Western Blot检测到符合理论大小的融合蛋白,荧光成像时可见转染细胞发出的绿色荧光,证明过表达载体构建成功;相对于空载体组,其中4种变体的过表达均使凋亡细胞比例增加近100%,单侧t检验显示差异有统计学意义(P<0.05)。结论 hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体蛋白具有促进Hep-3B肝癌细胞凋亡的作用。
关键词
hSmarca2-b
hBRM-b异构体
可变剪接
溴区结构域
AT-hook模体
Keywords
hSmarca2-b
hBRM-b isoform
Alternative splicing
Bromodomain
AT-Hook motif
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
hSmarca2-b转录变体编码的hBRM-b异构体促进Hep-3B细胞凋亡
武寅龙
杨敏
《成都医学院学报》
CAS
2017
0
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