四甲基偶氮唑蓝法测定植酸酮对HeLa细胞的作用

目的:分析植酸酮妇科清洗装置(商品名:美福康)Ⅱ型1号及2号对体外培养的HeLa细胞生长的抑制作用,为后期实验提供实验依据。方法:体外培养HeLa细胞,分为实验组和对照组,实验组从8个浓度水平上给药,分别经过24,48,72 h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对HeLa细胞增殖的影响。结果:与对照组相比,经2种型号的药物作用后的HeLa细胞存活率降低,凋亡增加,作用呈时间-剂量依赖关系。结论:植酸酮妇科清洗装置Ⅱ型1号及2号均能有效抑制宫颈癌HeLa细胞的生长。

事业单位人力资源管理现状与对策

无论是对事业还是对事业单位而言,人力资源都发挥着至关重要的作用,是发展过程中关键的环节。作为事业单位,不但要承担肩负的社会职责,还要积极促进社会经济发展进步。有些事业单位由于人力资源管理工作存在很多问题,导致工作进程严重受到影响,所以作为相关的管理人员要对其进行深入探究,采取科学有效的对策,不断促进人力资源管理工作得到优化。

真核表达质粒pIRES-ST3GAL Ⅰ的构建及其在大肠杆菌中的初步表达

构建β半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶I(ST3GALI)基因的真核表达载体p IRES-ST3GALI,并诱导使其在大肠杆菌中高效表达。以p GEM-ST3GALI质粒为模板,采用PCR技术特异性扩增ST3GAL I基因,通过酶切和连接,构建真核表达载体p IRESST3GALI。经PCR、双酶切和测序鉴定正确后,转化筛选阳性重组大肠杆菌(DH5α),用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,并用12%SDS-PAGE鉴定。结果表明,重组质粒p IRES-ST3GAL I中的ST3GAL I序列与原鸡的ST3GAL I氨基酸序列同源性98.8%,与猪的同源性达53.5%,与人的同源性达52.6%。β半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶I在大肠杆菌中实现了良好的表达。本试验已成功构建了含有β半乳糖苷α-2,3-唾液酸转移酶I(ST3GAL I)的真核表达载体p IRES-ST3GAL I,为其转染传代细胞建立重组传代细胞系奠定了基础。

适应H_9亚型禽流感病毒增殖的重组R-MDCK细胞系的建立

克隆鸡ST3GalⅠ基因并将其插入真核表达质粒p IRES中,构建重组质粒p IRES-ST3GalⅠ,鉴定正确的真核表达载体转染MDCK细胞,用G418抗性筛选稳定表达的重组细胞R-MDCK。PCR及RT-PCR鉴定表达阳性的单克隆细胞株。将不同H_9亚型禽流感病毒毒株按相同滴度接种R-MDCK细胞和空白MDCK细胞,通过HA试验和TCID_(50)试验,检测不同H_9亚型禽流感病毒毒株在R-MDCK细胞上的增殖效果。结果发现,所有H_9亚型禽流感病毒毒株在RMDCK细胞HA和TCID_(50)结果均显著高于空白MDCK细胞。ST3GalⅠ基因在第12代R-MDCK细胞中仍能稳定表达,R-MDCK细胞可显著提升H_9亚型低致病性禽流感病毒培养的滴度,可以替代鸡胚用于H_9亚型低致病性禽流感病毒的生产。

重组人源化单克隆抗体rhumAb1分子大小变异体的研究

利用分子排阻高效液相色谱（SEC-HPLC）、非还原毛细管电泳（CE-SDS）并结合液质联用（LC-MS）、抗体依赖细胞介导的细胞毒活性检测（ADCC）等技术对重组人源化单克隆抗体（rhumAb1）在高温（40℃）条件下产生的分子大小变异体进行研究。本研究鉴定了rhumAb1在SEC-HPLC分析中的4个分子大小变异体（SEC-1-SEC-4）和非还原CE-SDS中的7个主要变异体（NR-1-NR-7）的组成和结构。发现主要的低分子量变异体（片段）是由于重链的铰链区断裂所致,断裂位于铰链的Ser221-Cys-Asp-Lys-Thr-His-Thr-Cys228区域,其中C222-D223和H226-T227为主要断裂位点。ADCC活性检测表明,rhumAb1分子大小变异体（二聚体和片段）显著降低了产品的活性。该研究为rhumAb1产品的质量标准和相应的质控策略的制定奠定了基础,也为其他抗体药物的质量控制提供了参考。

事业单位人力资源管理中的绩效管理策略

对事业单位而言,人力资源管理具有至关重要的作用,同时绩效考核和管理也对事业单位目标的实现具有直接的影响,其能够有效激发员工的工作热情。 运用绩效管理促使事业单位更好地适应当前社会发展趋势,并不断改革创新,对事业单位的人力资源管理工作而言发挥着至关重要的作用。 文章主要针对事业单位人力资源管理工作中绩效管理进行分析,及时发现问题,并采取针对性的解决策略,最大化地发挥绩效管理具有的重要价值。