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Big-BALB/c小鼠亚系选育前后的抗体制备效率比较研究
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作者 王丹 张晓璐 +10 位作者 王妍 傅博 王文栋 刘京 张甦寅 武怡荷 吴德国 杜小燕 战大伟 章秀林 李长龙 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第6期612-618,共7页
目的比较利用BALB/c和Big-BALB/c(简称B-BALB/c)两种亚系小鼠制备鼠痘及鼠肝炎单克隆抗体的效率,为今后通过杂交瘤进行体内诱导单克隆抗体制备时实验动物的选择提供参考。方法从常规繁育的BALB/c小鼠群体中选择4周龄体重超过正常动物5%... 目的比较利用BALB/c和Big-BALB/c(简称B-BALB/c)两种亚系小鼠制备鼠痘及鼠肝炎单克隆抗体的效率,为今后通过杂交瘤进行体内诱导单克隆抗体制备时实验动物的选择提供参考。方法从常规繁育的BALB/c小鼠群体中选择4周龄体重超过正常动物5%(后期选种标准为超过10%)的个体进行选种并单独繁育,经10代选育制备B-BALB/c小鼠亚系。选择10~11周龄、雌雄各半的BALB/c小鼠和B-BALB/c小鼠各40只,分别接种用液体石蜡预处理后的鼠痘单克隆抗体杂交瘤细胞株G23或鼠肝炎单克隆抗体杂交瘤细胞株Y15,然后通过体内诱生法获取含单克隆抗体的小鼠腹水,利用间接ELISA法检验抗体效价,按照品系、性别和接种杂交瘤类型对小鼠进行分组,分析腹水产量、抗体效价和抗体产量以评估两种亚系小鼠的抗体制备效率。结果经10代选育后获得的10周龄雄性和雌性B-BALB/c小鼠体重分别比同周龄BALB/c小鼠增加了22.3%和12.8%。抗体制备过程中,B-BALB/c小鼠的耐受力比BALB/c小鼠更好,能够适应二次腹水采集;与BALB/c小鼠相比,B-BALB/c小鼠腹水产量和抗体效价均显著提高,尤以杂交瘤细胞株G23接种组更明显(均P<0.0001)。接种杂交瘤细胞株G23或Y15后,B-BALB/c小鼠的平均抗体产量(14.99×10^(4)U和33.22×10^(4)U)高于BALB/c小鼠(5.33×10^(4)U和19.31×10^(4)U)(均P<0.01)。接种杂交瘤细胞株G23后,B-BALB/c小鼠的平均单位体重的抗体产量(0.55×10^(4)U/g)高于BALB/c小鼠(0.23×10^(4)U/g)(P<0.0001)。接种杂交瘤细胞株Y15后,雌性B-BALB/c和BALB/c小鼠的单位体重抗体产量高于同亚系的雄性B-BALB/c小鼠(均P<0.01)。结论B-BALB/c小鼠在单克隆抗体体内诱导制备中可作为BALB/c小鼠的替代选择,能够达到减少实验动物使用数量、降低人力成本并提高抗体制备效率的目的。 展开更多
关键词 单克隆抗体 制备效率 杂交瘤 BALB/C小鼠 Big-BALB/c小鼠
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复方中药治疗鸡大肠杆菌病效果、机理及药物安全性初探 被引量:10
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作者 武怡荷 杨继业 +5 位作者 陈书明 张希春 陈亚伟 王军艳 赵苏苏 吕冰 《山西农业科学》 2021年第3期357-360,365,共5页
为研究复方中药对鸡大肠杆菌病的疗效、药效机理及安全性,首先用0.25、0.5、1.0 g/mL复方中药药液以及0.2 mg/mL氟苯尼考药液对从大肠杆菌病鸡中分离的菌株进行体外抑菌试验。再将830羽大肠杆菌病鸡随机分为5组:对照组(30羽鸡)不予治疗... 为研究复方中药对鸡大肠杆菌病的疗效、药效机理及安全性,首先用0.25、0.5、1.0 g/mL复方中药药液以及0.2 mg/mL氟苯尼考药液对从大肠杆菌病鸡中分离的菌株进行体外抑菌试验。再将830羽大肠杆菌病鸡随机分为5组:对照组(30羽鸡)不予治疗,其余4组(每组200羽鸡)分别用上述剂量复方中药以及氟苯尼考进行饮水治疗观察其疗效并测定各组鸡红细胞免疫,通过急性毒性试验及小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,研究该药的安全性。结果表明,0.5、1.0 g/mL复方中药体外抑菌效果强于0.25 g/mL复方中药,弱于氟苯尼考组;0.5、1.0 g/mL复方中药组明显增加病鸡治愈率(68%、69%),且高于氟苯尼考组(62%);0.5、1.0 g/mL复方中药组鸡红细胞C3bR花环率分别为14.1%±0.7%、14.5%±0.8%,显著高于氟苯尼考组;用该复方中药对小白鼠经口给药,LD50>5000 mg/kg,5000 mg/kg复方中药量对小鼠骨髓嗜多染红细胞无致微核作用。0.5 g/mL复方中药对鸡大肠杆菌病疗效最佳,可能的机理是其起抑菌作用的同时增强了鸡红细胞免疫功能;而且该复方中药安全无毒。 展开更多
关键词 复方中药 鸡大肠杆菌病 红细胞免疫 LD50 微核
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氨基酸纸层析展层溶剂初探 被引量:3
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作者 杨继业 高佳 +6 位作者 陈书明 刘慈 张林 姬翔宇 王宁 卫阳 武怡荷 《山西农业科学》 2019年第7期1163-1166,共4页
纸层析法分离鉴定氨基酸试验所用展层溶剂是可以重复使用的,但随着使用次数的增加,展层溶剂中有机溶剂不断挥发,氨基酸的分离效果会越来越差。为了节约试剂、节省试验成本,并改善试验效果,在100mL重复使用5次的展层溶剂中分别续加0,6,1... 纸层析法分离鉴定氨基酸试验所用展层溶剂是可以重复使用的,但随着使用次数的增加,展层溶剂中有机溶剂不断挥发,氨基酸的分离效果会越来越差。为了节约试剂、节省试验成本,并改善试验效果,在100mL重复使用5次的展层溶剂中分别续加0,6,12mL正丁醇与80%甲酸(体积比5∶1)混合液,混匀,然后与新配制的展层溶剂进行氨基酸纸层析对比试验,观察试验结果,并测定各氨基酸的比移值(Rf)。结果显示,在100mL重复使用5次的展层溶剂中加入12mL正丁醇与80%甲酸混合液,其试验结果与用新配制展层溶剂所得试验结果一致。这一结果表明,重复使用多次的层析溶剂可以不废弃,只需添加一定量正丁醇与80%甲酸混合液即可继续使用。这不仅节约了试验成本,而且减少了试验废液的排放,既经济又环保。 展开更多
关键词 氨基酸 纸层析 层析溶剂 Rf值
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洋参玉桔齐煎茶饮治疗肺肾阴虚慢性咽炎疗效观察
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作者 胡会玲 武怡荷 +1 位作者 顾宸晟 张希春 《山西中医》 2021年第2期11-12,15,共3页
目的:观察洋参玉桔齐煎茶饮治疗高校教师肺肾阴虚型慢性咽炎的效果。方法:选择肺肾阴虚型慢性咽炎患者80例,按照随机对照的临床试验原则分成两组各40例,治疗组予洋参玉桔齐煎茶饮,对照组予慢严舒柠咽炎片,两组均治疗14天。结果:治疗组... 目的:观察洋参玉桔齐煎茶饮治疗高校教师肺肾阴虚型慢性咽炎的效果。方法:选择肺肾阴虚型慢性咽炎患者80例,按照随机对照的临床试验原则分成两组各40例,治疗组予洋参玉桔齐煎茶饮,对照组予慢严舒柠咽炎片,两组均治疗14天。结果:治疗组总有效率为92.5%,对照组总有效率为72.5%,洋参玉桔齐煎茶饮组总有效率优于慢严舒柠咽炎片。结论:洋参玉桔齐煎茶饮治疗肺肾阴虚型慢性咽炎疗效较好。 展开更多
关键词 慢性咽炎 肺肾阴虚 洋参玉桔齐煎茶饮 中医药疗法
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四株儿茶酚类铁载体高产菌株产消化酶活性及其益生特性 被引量:1
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作者 武怡荷 胡会玲 +1 位作者 陈书明 张希春 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1807-1816,共10页
【背景】儿茶酚类铁载体对胃肠道菌群的生长代谢具有重要作用,研究儿茶酚类铁载体高产菌株的消化酶活性,挖掘其潜在益生特性具有重要意义。【目的】分析4株分离自健康成人粪样的儿茶酚类铁载体高产菌的产酶特性,通过分析菌株耐酸耐胆盐... 【背景】儿茶酚类铁载体对胃肠道菌群的生长代谢具有重要作用,研究儿茶酚类铁载体高产菌株的消化酶活性,挖掘其潜在益生特性具有重要意义。【目的】分析4株分离自健康成人粪样的儿茶酚类铁载体高产菌的产酶特性,通过分析菌株耐酸耐胆盐能力、粘附定殖能力、抗生素耐受性和急性毒性研究其益生特性。【方法】测定4株菌的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、植酸酶、乳糖酶和β-葡萄糖苷酶的酶活性。4株菌经人工模拟胃、肠液连续培养后分别计算其活菌数;分析4株菌的自凝集率、黏蛋白粘附率和表面疏水率;对小鼠连续7 d灌胃不同剂量的4株高产菌,观察并记录小鼠的一般体征,计算小鼠脏器指数,进行阳性细菌移位试验。【结果】在试验所测的7种消化酶中,E.coli Gut 07、E.coli Gut 12无蛋白酶和脂肪酶活性,B.cereus Gut 16无乳糖酶活性,E.coli Gut 20无蛋白酶活性,其余均具有。4株菌经人工模拟胃液培养6h后存活率均大于60%,转移到人工模拟肠液培养24 h后活菌数均大于初始菌落数;该4株菌具备在胃肠道中粘附定殖的能力,对大多数抗生素敏感,在浓度低于4.5×1011CFU/m L、灌胃剂量为20m L/kg-bw时对小鼠无急性毒性,无阳性菌株移位现象。【结论】4株儿茶酚类铁载体高产菌株可作为潜在益生菌进行进一步的安全性和功能性研究。 展开更多
关键词 儿茶酚类铁载体 胃肠道 消化酶 益生特性 安全性
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鸡源产β-葡萄糖苷酶混合菌群发酵黄芩茎叶的制备及其对肉鸡消化和免疫功能的影响 被引量:7
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作者 胡会玲 武怡荷 +1 位作者 陈书明 张希春 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第12期107-113,共7页
为了提高黄芩茎叶资源化利用程度并明确其对肉鸡消化和免疫功能的促进作用,试验采用麸皮压力法结合体外胃肠模拟筛选鸡源高产β-葡萄糖苷酶混合菌群,以纤维素降解率为指标确定黄芩茎叶最佳发酵条件。再将体重相近的14日龄黄羽肉仔鸡90只... 为了提高黄芩茎叶资源化利用程度并明确其对肉鸡消化和免疫功能的促进作用,试验采用麸皮压力法结合体外胃肠模拟筛选鸡源高产β-葡萄糖苷酶混合菌群,以纤维素降解率为指标确定黄芩茎叶最佳发酵条件。再将体重相近的14日龄黄羽肉仔鸡90只,随机分为3组,分别为空白对照组、未发酵饲料添加剂组和发酵型饲料添加剂组,每组3个重复,每个重复10只,预试期1周,正试期6周,空白对照组饲喂基础日粮,未发酵饲料添加剂组在基础日粮中添加8%未发酵的黄芩茎叶饲料添加剂,发酵型饲料添加剂组在基础日粮中添加8%发酵型黄芩茎叶饲料添加剂,计算试验肉鸡平均日增重、平均日采食量和料重比,采用内源指示剂法测定40~42日龄、62~64日龄肉鸡对干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的表观消化率,测定64日龄脾脏、胸腺和法氏囊指数和血清中IgM、IgG、IgA含量。结果表明:β-葡萄糖苷酶混合菌最佳培养条件为用4%麸皮含量的培养基、培养48 h。黄芩茎叶最佳发酵条件为25%混合菌接种量、30℃发酵15 d,其野黄芩苷的质量分数为0.56%。与空白对照组相比,添加未发酵黄芩茎叶饲料添加剂组粗蛋白和62~64日龄粗灰分表观消化率显著提高(P<0.05),血清中IgG含量显著提高(P<0.05);添加发酵型黄芩茎叶饲料添加剂组平均日增重显著增加,料重比显著降低,干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的表观消化率均有显著提高(P<0.05),脾脏、胸腺和法氏囊指数与血清中IgG、IgA和IgM含量均显著提高(P<0.05)。与添加未发酵的饲料添加剂组相比,添加发酵型黄芩茎叶饲料添加剂组肉鸡21~42日龄料重比显著降低2.77%(P<0.05),43~64日龄平均日增重显著增加11.20%(P<0.05),料重比显著降低10.06%(P<0.05);干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的表观消化率,脾脏、胸腺、法氏囊指数及血清IgG、IgA和IgM含量均显著升高(P<0.05)。说明黄芩茎叶经鸡源产β-葡萄糖苷酶菌群发酵后能够提高黄羽肉鸡表观消化率并增强机体免疫功能。 展开更多
关键词 鸡粪菌 Β-葡萄糖苷酶 发酵 黄芩茎叶 消化性能 免疫功能
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