黄芩苷酯化物缓解H_(2)O_(2)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化应激反应的研究

试验旨在探讨黄芩苷酯化物(BE)对H_(2)O_(2)诱导的IPEC-J2细胞氧化应激的缓解作用及其分子机制。采用CCK-8法检测细胞活性筛选出黄芩苷酯化物的适用浓度;采用ELISA法检测细胞中活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量;采用qPCR法检测细胞中HO-1和NQO-1 mRNA的表达量;采用WB法检测胞浆Nrf2蛋白、胞核Nrf2蛋白和HO-1的蛋白表达水平;免疫荧光法检测Nrf2蛋白入核情况。结果显示,BE的适用浓度为10、20、40 mmol/L;与对照组相比,H_(2)O_(2)组中ROS、MDA含量显著升高(P<0.05);SOD、CAT活性显著下降(P<0.05);胞浆Nrf2蛋白与胞核Nrf2蛋白表达量显著升高(P<0.05);HO-1 mRNA的表达量显著升高(P<0.05);NQO-1 mRNA(P<0.05)表达量显著降低。与H_(2)O_(2)组相比,中、高剂量BE显著降低ROS、MDA含量(P<0.05);低、中、高剂量BE显著提高SOD、CAT活性(P<0.05);中剂量BE显著升高胞浆Nrf2蛋白的表达(P<0.05);低、中、高剂量BE显著升高胞核Nrf2蛋白的表达(P<0.05);中、高剂量BE显著升高HO-1 mRNA的表达量(P<0.05),低、中、高剂量均可显著升高HO-1蛋白表达;低、中、高剂量BE显著升高NQO-1 mRNA表达量(P<0.05)。研究表明,BE可以通过激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用。

八种植物提取物对MODE-K细胞抗氧化能力的影响

该试验旨在评价基于脂多糖(LPS)诱导MODE-K细胞氧化应激模型评价8种植物提取物的抗氧化能力。采用CCK8法检测细胞存活率筛选建模条件。用ELISA法检测细胞炎性因子白介素6(IL-6)、活性氧(ROS)水平、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)和还原型辅酶Ⅰ(NADH)的表达量,用qPCR法检测细胞中HO-1 mRNA的表达量。结果显示:与对照组相比,40μg/mL的LPS处理细胞1 h后极显著降低细胞活率(P<0.01);显著提高IL-6、ROS、LDH、MDA表达量(P<0.05),极显著提高HO-1 mRNA的表达(P<0.01),显著降低SOD(P<0.01)与NADH活性(P<0.05);与模型组相比,紫苏籽与虎杖提取物组的MDA表达量均显著降低(P<0.05),NADH与HO-1 mRNA表达量均显著升高(P<0.05),其余6种提取物并未表现出显著差异。综上,8种植物提取物中,紫苏籽与虎杖提取物(20μg/mL)使MODE-K细胞抗氧化作用提升,且紫苏籽效果优于虎杖。