基于高通量测序研究黄芩-连翘配伍对LPS诱导的急性肺炎小鼠肠道菌群的影响

研究黄芩-连翘配伍对LPS诱导的急性肺炎小鼠肠道菌群的影响,采用加热回流法制备不同比例的黄芩-连翘配伍组合物。选取健康昆明小鼠72只,随机分为6组(正常对照组、模型组、地塞米松阳性药物组、3个黄芩-连翘不同比例配伍组),每组12只,连续灌服相应药物7 d,正常对照组和模型组给予等量生理盐水;第8天,除正常对照组外,其余组小鼠均采用LPS(10 mg/mL)滴鼻法建立小鼠急性肺炎模型。造模6 h后,采取每组小鼠盲肠内容物及结肠组织,开展结肠病例组织学观察,高通量测序检测小鼠肠道菌群结构及分布情况。结果显示,与正常对照组相比,模型组小鼠结肠黏膜上皮变性、坏死、脱落,绒毛排列不整齐,腺体有一定的脱落,纹状缘不清晰,完整性遭到破坏;黄芩-连翘配伍组(1∶1,2∶3,1∶2)小鼠的黏膜上皮结构较完整,结肠绒毛排列较整齐,纹状缘较清晰,损伤较少;Beta多样性分析结果显示,模型组小鼠肠道菌群分开较明显;黄芩-连翘配伍组(2∶3,1∶1,1∶2)和阳性药物组介于正常对照组和模型组之间,各组小鼠肠道菌群在属水平上分析样本的分离程度及群落结构和组成有显著性差异;利用LEfSe组间群落差异性分析发现,模型组毛螺菌属、双歧杆菌、黄杆菌等菌属相对丰度增加;与模型组比较,阳性药物组β-变形菌、大肠埃希氏菌等菌属相对丰度减少,乳酸杆菌、杆菌等菌属相对丰度增加;黄芩-连翘配合物显著增加杆菌、放线菌、嗜黏菌、疣微菌、δ-蛋白杆菌、脱硫弧菌等菌属的丰度;显著降低拟杆菌属、艾森伯格氏菌属、黄杆菌等菌属的丰度。功能预测结果显示,模型组主要影响D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢、NOD样受体信号通路;与模型组比较,黄芩-连翘配合物(1∶1,2∶3,1∶2)主要影响脂肪酸生物合成这条通路。黄芩-连翘配伍(1∶1,2∶3,1∶2)可能通过调节肠道菌群结构与丰度,对急性肺炎有一定的预防作用。

鹳榆止泻颗粒剂的成型工艺优化与质量标准研究

优化鹳榆止泻颗粒剂的制备工艺并建立其质量标准,以辅料配比、润湿剂浓度、干燥温度为考察因素,颗粒成型率、吸湿率、水分、休止角为评价指标,用单因素结合正交试验优化鹳榆止泻颗粒剂的制备工艺。采用薄层色谱分析法、高效液相色谱法(HPLC)对鹳榆止泻颗粒剂中槲皮素、没食子酸、苦参碱、甘草酸分别开展定性和定量鉴别研究,建立其质量标准。结果表明,没食子酸、槲皮素、苦参碱和甘草酸检测质量浓度的线性范围分别为1.325~21.200μg/mL、11.875~190.000μg/mL、7.813~125.000μg/mL、16.250~260.000μg/mL,精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD均<3.0%(n=6),平均回收率为101.39%、101.94%、101.92%、101.72%,RSD均<3.0%(n=9)。说明优化的鹳榆止泻颗粒剂成型工艺稳定可行,建立的鹳榆止泻颗粒剂的薄层鉴别及含量测定方法可用于鹳榆止泻颗粒剂的质量控制。

砂生槐子生物碱对LPS诱导的小鼠急性肺炎的保护作用研究

探究砂生槐子生物碱对LPS诱导的小鼠急性肺炎的保护作用。将48只SPF雄性昆明小鼠随机分为对照组(Control组)、脂多糖组(LPS组)、地塞米松组(DXMS组,0.8 mg/kg)、砂生槐子生物碱低剂量组(SSHD组,0.34 mg/kg)、砂生槐子生物碱中剂量组(SSHZ组,0.68 mg/kg)、砂生槐子生物碱高剂量组(SSHG组,1.36 mg/kg),每组8只,给药7 d后,通过滴鼻LPS(5 mg/kg)建立小鼠急性肺炎模型。结果表明,SSHD组、SSHZ组、SSHG组小鼠WBC、LYM、GRA显著降低(P<0.05),HGB、RBC、PLT显著升高(P<0.05);SSHD组、SSHZ组小鼠脾系数显著降低(P<0.05),SSHD组、SSHZ组、SSHG组小鼠肺系数、胸腺系数显著降低(P<0.05);SSHD组、SSHZ组、SSHG组小鼠血清中TNF-α、IL-6含量显著降低(P<0.05),CRP、IL-1β含量降低;SSHD组、SSHZ组与SSHG组小鼠肺组织中丙二醛(MDA)显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)显著升高(P<0.05);各给药组小鼠肺脏的病理损伤均有不同程度改善,其中SSHG组保护效果最好,SSHD组保护效果次之;另外,SSHD组、SSHZ组与SSHG组小鼠肺组织SFTPC染色升高,NF-κB P65与TLR4染色降低。说明砂生槐子生物碱对LPS诱导的小鼠急性肺炎具有较好的保护作用。

黄芩-连翘配伍对脂多糖诱导小鼠急性肺炎模型的保护作用

目的研究黄芩-连翘不同比例配伍对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠急性肺炎模型的保护作用差异。方法首先采用加热回流法制备不同配伍比例黄芩-连翘组合物。选取健康KM小鼠144只,随机分为12组(正常对照组、模型组、地塞米松阳性药物组、9个黄芩-连翘不同比例配伍组),每组12只,连续灌服相应药物7 d,正常对照组和模型组给予等量生理盐水;第8天,除正常对照组外,其余组小鼠均采用LPS(10 mg/mL)滴鼻法建立小鼠急性肺炎模型。造模6 h后迅速采样。通过小鼠临床体征、日均体重增长量、采食量、脏器指数、小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6含量、血常规、肺组织形态学观察及肺损伤病理组织学评分,评估黄芩-连翘不同比例配伍组对小鼠急性肺炎模型的保护作用差异。结果建模后各组小鼠存活率为100%。正常对照组小鼠临床体征正常,呼吸音正常,反应灵敏;模型组小鼠反应迟钝,蜷缩扎堆,听诊发现肺部有啰音。不同给药组较模型组相比,整体情况较好,尤其黄芩-连翘配伍组(1∶1,2∶3,1∶2)活动较多,反应较灵敏。小鼠日均体重增长量、日均采食量、肾指数、肝指数、脾指数和胸腺指数差异不显著(P>0.05);与正常对照组比,模型组肺指数、血清中TNF-α、IL1β和IL-6含量、血常规指标、肺组织损伤病理组织学评分显著升高(P<0.01或P<0.05),小鼠肺出现大量炎性细胞浸润,肺泡壁明显增厚、SFTPC蛋白在肺组织肺泡与肺泡间隔区域表达量显著增加,大量阳性细胞表达SFTPC蛋白;与模型组相比,黄芩-连翘配伍组(3∶1,3∶2,2∶1,1∶3,3∶0,0∶3)的心指数、黄芩-连翘配伍组(1∶2)的肺指数、黄芩-连翘配伍组(1∶1,2∶3,1∶2)小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量、黄芩-连翘配伍组(1∶1,2∶3,1∶2)血常规指标含量、黄芩-连翘配伍组(3∶2,1∶1,2∶3,1∶2)肺组织损伤评分显著降低(P<0.01或P<0.05),4个黄芩-连翘配伍组(3∶2,1∶1,2∶3,1∶2)小鼠肺病理现象明显减轻,SFTPC蛋白在肺组织肺泡与肺泡间隔区域表达量显著减少,阳性细胞的表达量较少。结论黄芩-连翘配伍(1∶1,2∶3,1∶2)对LPS诱导的急性肺炎具有明显保护作用。