全血中性粒细胞分离方法对fMLP诱导极性化的影响

目的比较Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法两种常用的中性粒细胞分离方法 ,为中性粒细胞极性化研究提供有效手段。方法取健康成年人外周血,采用Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法分离中性粒细胞,分别检测分离后的中性粒细胞的极性、纯度、存活率,比较二者对极性信号分子F-actin的聚合和胞内Ca2+的影响。结果二者在极性率、纯度、存活率方面并不存在显著性差异,但Dextran沉降法在fMLP诱导细胞极性3min内对F-actin的聚合产生抑制作用,同时可使胞内Ca2+升高的Ca2+峰降低约25%。结论对PMNs极性功能研究时,两种分离方法都可以选择。Percoll非连续密度梯度离心法更有优势,但在需要纯化大量PMNs时,Dextran沉降法也是一种好的选择。

对分课堂在预防医学课程教学中的应用

在目前大数据技术的不断发展的背景下,现代化的教学理念出现了一定的变化,对分课堂是一种适应时代发展的新型课程指导方式在医学课程中产生的效果极为良好,而将其应用于预防医学课程的教学中,能够帮助相关学生了解预防医学的重点内容,使教育工作更为顺利的进行。

嗜中性粒细胞在均匀浓度fMLP诱导极性化过程中伪足长度的变化

采用重复密度梯度离心的方法分离中性粒细胞,并对其在10～100 nmol/L fMLP不同浓度趋化诱导下产生极性化的极性化率和伪足长度变化趋势进行分析。结果表明在加入fMLP的短时间内,细胞都表现出极性化率明显上升的趋势,以100 nmol/L为最快,但在3～4 min内都会达到90%以上的极性化水平。同时,细胞伪足长度明显受到不同fMLP浓度刺激的影响,表现为伸展和回缩相的交替,从而组成一个振荡周期。组成振荡周期的伸展相和回缩相及振荡频率都明显受到不同fMLP浓度刺激的影响,依据伪足变化率本文提出了细胞极性活跃程度的分类。由于伪足的变化与F-actin的聚合密切相关,而F-actin的聚合又受到极性信号分子的调节,因此对伪足变化的分析有助于了解中性粒细胞极性信号传导通路的调节机制。