两性离子材料在生物化工领域的应用

两性离子材料是一类具有相同数量阳离子和阴离子官能团、整体呈电中性的材料。两性离子聚合物能够通过与水分子之间形成超强水化层抵抗蛋白质等污染物的表面吸附,因此具有突出的抗污特性。此外,两性离子材料还具有黏附性、抗冻性、药物增溶性、离子选择性等性能,已广泛应用于生物医药、工业生产等领域。本文首先总结了两性离子材料的抗污特性,介绍其在抗蛋白、抗细菌、抗病毒吸附方面的应用,接着以医用传感器、药物递送和分离膜为生物化工领域的代表方向,介绍两性离子材料的抗污及其他应用,最后讨论了发展两性离子材料存在的问题与挑战,展望了两性离子材料作为一类新型功能化材料的应用前景。

新型猪胃蛋白酶原突变体真核表达体系构建

[目的]构建4种新型猪胃蛋白酶原突变体真核表达体系。[方法]以含有猪胃蛋白酶原基因的环状质粒pPICZαA-PGA为模板,对猪胃蛋白酶活性关键氨基酸Asp32和Asp215相关的S35、G76、T216和T218 4个位点定点突变;突变质粒鉴定后电转化至毕赤酵母X-33;qPCR鉴定高mRNA表达转化子;以甲醇诱导表达4 d后SDS-PAGE及酶活测定检测目的蛋白。[结果]成功构建4种新型猪胃蛋白酶原突变体mPG-S35A、mPG-G76A、mPG-T216A和mPG-T 218A;阳性克隆率超过90%;SDS-PAGE检测到清晰的目的蛋白条带,分子量约为48 k Da,4种突变体的酶活分别是11.3 U/mL、22.6 U/mL、16.9 U/mL、13.7 U/mL。[结论]SDS-PAGE检测到4种分子量48 k Da的突变猪胃蛋白酶原清晰条带,四者酶活在11.3~22.6 U/mL之间,成功构建4种新型猪胃蛋白酶原突变体在毕赤酵母以外分泌表达的体系。