Streptomyces yanglingensis KM-1-2遗传转化体系的建立及km790的过表达

杨凌链霉菌(Streptomyces yanglingensis)KM-1-2是从银杏种子中分离到的一株新菌,为对其次级代谢产物基因簇进行研究,需建立该菌株的遗传转化体系。通过接合转移的方法成功建立杨凌链霉菌KM-1-2的遗传转化体系,并确定最佳接合转移条件:以2CMY为接合转移培养基,孢子于50℃热激10 min,抗生素覆盖时间介于18~19 h,其中萘啶酮酸质量浓度为25 mg/L,安普霉素为3 mg/L,接合转移效率达1.052×10^-5。同时,利用该转化体系,过表达KM-1-2基因组中的1个SARP转录调控因子km790。与野生型链霉菌KM-1-2相比,过表达菌株Skm790生长速率加快,产孢时间提前,对部分病原真菌的拮抗性增强,而且代谢产物图谱发生明显变化。

压实黏土变角剪切试验及其尺寸效应

滑带土的抗剪强度指标对于边坡稳定性分析具有重要作用,相比于直剪试验,变角剪切试验能更好的模拟滑带土的受力状态。利用岩土体变角剪切试验仪,对不同尺寸试样进行变角剪切试验,介绍了变角剪切试验研究压实黏土剪切参数的方法,结合Weibull统计尺寸效应理论研究压实黏土尺寸效应。结果表明:变角剪切试验结果符合幂函数型Mohr准则;与直剪试验测得的剪切参数相比,变角剪切试验得出的内摩擦角与直剪试验相近,黏聚力较直剪试验大;压实黏土的尺寸效应基本符合Weibull尺寸效应理论,经过修正的Weibull尺寸效应式能更好地描述压实黏土剪切强度的尺寸效应。

砾质滑带土剪切特性试验研究

砾质滑带土在三峡库区内的滑坡中广泛存在,其剪切特性对滑坡的稳定起着控制作用。采用人工重塑土样模拟三峡库区某典型滑坡中的砾质滑带土,进行直剪试验,探讨了砾石含量、砾石级配、砾石种类等因素对砾质滑带土剪切强度参数及剪切强度的影响,并根据正交试验理论,采用极差分析法,获得了各影响因素对砾质滑带土剪切强度参数的敏感性大小排序。对于内摩擦角,各因素影响大小排序为:砾石含量>砾石级配>砾石种类;对于黏聚力,各因素影响大小排序为:砾石级配>砾石含量>砾石种类。

基于真空联合水平电渗法的水力冲挖淤泥脱水量计算方法

以阜阳市城区水系水力冲挖淤泥为研究对象,通过模型试验采集了疏浚淤泥在真空、水平电渗、真空联合水平电渗这3种作用下的脱水量,分析这3种作用下淤泥脱水量间关系,提出基于真空联合水平电渗法的水力冲挖淤泥脱水量计算方法。结果表明:真空作用下,淤泥的脱水过程可分为主要排出液态水的快速脱水阶段和主要排出气态水的稳定促排阶段,液态水和气态水的质量比约为3∶5;水平电渗作用下,水力冲挖淤泥的脱水速率与电流强度呈线性关系,淤泥的电导率与含水量呈线性、指数或二次函数关系,其中基于线性关系拟合得到的电渗脱水量与实测值吻合最好;基于真空联合水平电渗脱水法的水力冲挖淤泥脱水量可通过叠加真空和水平电渗作用下脱水量进行综合计算。

基于PFC2D的基坑排桩支护机理探讨

研究土拱效应有助于进一步揭示基坑排桩支护的机理。采用离散元PFC2D软件,分析基坑排桩支护时土体内部力学变化,重点探讨土拱发展各阶段的力学特性,同时对桩间距、颗粒黏结强度和颗粒摩擦系数等对支挡效应的影响进行探讨。结果表明:在支护过程中,土拱所能承载的荷载呈现先增大后减小最后趋于稳定的变化历程;土拱效应呈现"发育-形成-破坏(残余)"的变化过程,土拱的形状大致呈马鞍形;颗粒间的黏结力和摩擦系数与排桩支挡效果呈正相关;桩间距与排桩支挡效果呈负相关。

水力冲挖淤泥框架真空法脱水试验研究

水力冲挖是时下一种常用的城市河道疏浚方式,但产生的淤泥含水量高、体积大、泥水分离困难。提出框架真空预压法,通过试验研究,探究其脱水效果及其影响因素。框架真空预压脱水技术可有效解决传统真空预压的诸多问题,具有良好的淤泥脱水效果。淤泥排水速率由最大值急剧减小,排水量迅速增加,最终排水速率较低,排水量趋于稳定。框架结构内滤管间距越小,试验槽的初始排水速率越大,排水量越大;当试验模型尺寸增大时,脱水效果有所提高。淤泥的体积缩减明显,滤管间距越小,体积缩减幅度越大;随着模型尺寸的增大,淤泥体积缩减幅度亦逐渐增大。框架结构内滤管间距越小,淤泥的十字板剪切强度越大;随着模型尺寸的增大,淤泥的十字板剪切强度逐渐减小。淤泥的含水率变化规律与十字板剪切强度的规律相反。

一起亚硝酸钠食物中毒的调查分析

1中毒始末 2001年8月25日12时许,延吉市某单位8人到九龙钓鱼池饭店共进午餐,主菜是烤全羊肉、羊汤.进食约10分钟,1人自觉不适,头痛、头晕、恶心、皮肤青紫及呼吸困难,到13时30分陆续又有6人出现中毒症状.14时10分至15时全部到延边医院就诊,临床诊断为亚硝酸中毒,经吸氧、对症治疗后脱险,晚上12时用空运来的特效药亚甲兰治疗后痊愈出院.8月25日16时延边卫生防疫站接到延边医院的食物中毒报告,立即到医院调查询问,并赶赴食物中毒现场,进行现场检查、采样及询问调查,并对现场进行控制.迅速查明中毒食物和中毒原因,制止了中毒的蔓延扩大.

水力冲挖淤泥水平电渗联合堆载预压法脱水试验研究

城市水环境治理工程中会产生大量疏浚淤泥,淤泥含水量高、体量大,直接堆场弃置将浪费城市宝贵的土地资源。设计水平电渗法处理水力冲挖淤泥的模型试验,采用水平电渗联合堆载预压的方法对水力冲挖淤泥进行脱水处理,验证了电渗法用于淤泥脱水处理的可行性,论证了水平电渗法的优势。试验表明,上部施加荷载可以限制淤泥的裂缝宽度,上部荷载越大,淤泥裂缝的宽度越小,淤泥的沉降越大;上部荷载越大,淤泥的排水量越大且处理后的含水率更低;上部施加荷载可以延迟电流的衰减,延后有效电势的降低,有利于淤泥排水固结;电渗末期能耗高、排水少,在实际应用中应该在此阶段前停止电渗。

淡紫灰链霉菌gCLA4坏死诱导蛋白基因的克隆表达及功能

【背景】淡紫灰链霉菌(Streptomyceslavendulae)gCLA4是从黄瓜中分离到的一株放线菌,研究表明该菌对多种植物病原菌均有很好的拮抗作用,具有潜在的生防价值。【目的】深入研究Streptomyces lavendulae gCLA4中坏死诱导蛋白(necrosis-inducing protein)4955的功能,明确其提高植物抗性的作用机制。【方法】对坏死诱导蛋白4955基因进行克隆,于Escherichia coli BL21(DE3)中表达,并以烟草为材料检测该蛋白的活性和稳定性;使用Protparam、PredictProtein、NCBI CDD、SWISS-MODEL分析蛋白的基本性质和三维结构;检测该蛋白对烟草防御反应相关酶活(CAT、SOD、POD、PAL)和防御相关基因(NPR1、PR1-b、PAL、LOX、PR1-a)表达量的影响。【结果】蛋白4955的耐受温度达40℃,耐受pH 6.0-10.0。该蛋白分子量为24491.12 Da,由225个氨基酸组成,其等电点为5.96,经氨基酸序列比对含保守NPP1结构域。蛋白4955处理烟草2 d时,烟草CAT、SOD、PAL酶活增加,POD酶活无显著变化。该蛋白处理烟草第1、3、5天时,基因PR1-b、LOX表达量提高;在第4天时,基因PAL的表达量提高。【结论】Streptomyces lavendulae gCLA4中的坏死诱导蛋白4955确实能诱导烟草中的植物防御反应。