IL-17调控溃疡性结肠炎分子机制的生物信息学分析

目的利用生物信息学方法分析溃疡性结肠炎(UC)的枢纽基因和关键通路。方法通过基因表达数据库(GEO)下载UC表达谱芯片GSE134025。利用R语言的Limma包筛选UC组与正常组肠黏膜细胞差异表达基因,对这些基因进行GO和KEGG分析;利用STRING数据库构建蛋白互作网络(PPI)并将结果导入Cytoscape筛选出核心基因;利用KEGG mapper绘制核心基因所在的信号通路图。结果筛选出190个差异表达基因,其中147个上调,43个下调。GO分析结果表明,差异表达基因主要涉及炎症反应、细胞增殖的正调控等生物学过程,主要富集于细胞膜、质膜等细胞成分,具有肝素结合、生长因子等分子功能。KEGG分析显示差异基因主要富集于趋化因子信号通路,细胞因子受体相互作用等相关信号通路。从PPI网络中筛选出10个枢纽基因:白细胞介素6(IL-6)、CXC趋化因子配体8(CXCL8)、CXCL10、CXCL1、CXCL9、膜联素A1(ANXA1)、IL-1β、CC趋化因子配体20(CCL20)、CXCL2、CXCL11,其中多个基因位于IL-17调控的信号通路下游。结论发现了10个与UC发病风险相关的枢纽基因,IL-17可能通过这些核心基因调控UC的发生发展。

胶原性胃炎文献回顾

胶原性胃炎(CG)是一种罕见的疾病,其特征是上皮下厚于10μm的胶原条带沉积和固有层内炎性单核细胞浸润。胶原性结肠炎和胶原性口炎具有与胶原性胃炎相似的组织学特征,并且被认为是同一疾病实体的一部分。然而,虽然胶原性结肠炎在胃肠病学领域变得更加常见,在老年患者中表现为慢性腹泻的临床症状,但胶原性胃炎是罕见的。尚未从随机对照试验中发现安全有效的治疗方法。因此,更好地了解疾病和报告更多病例将有助于建立诊断标准和制定治疗策略。在这里,我们回顾临床特征、内镜、组织学发现、治疗和临床结局的病例报告和迄今为止发表的病例系列,并提供一个关于疾病的最新信息的总结。这些信息将有助于提高对胶原性胃炎的认识,以便医生能够识别和正确诊断疾病,并将有助于为未来的临床试验制定标准的治疗策略。

胆固醇酯酶高产菌株的筛选及动力学性质研究

通过平板初筛和摇瓶复筛,得到一株胆固醇酯酶的高产菌株,研究了pH值、温度、底物浓度、一些有机和无机试剂对胆固醇酯酶酶促反应速度的影响。研究发现,胆固醇酯酶有较好的酸碱稳定性,pH值为5.0￣8.0;最适pH值和最适温度分别为pH7.0和40℃,该酶的动力学研究表明,对胆固醇亚油酸酯和胆固醇油酸酯都表现为典型的米氏规律,Km值分别为2.2×10-5mol/L3.1×10-5mol/L,同时研究了一些金属离子和有机化合物对酶活性的影响,发现Mg2+、EDTA对胆固醇酯酶有激活作用。

大马勃水溶性多糖的结构研究

采用热水浸提,乙醇沉淀的方法得到大马勃粗多糖,经Sevag法脱蛋白,DEAE-sepharose fast flow离子交换层析及sephacryl S-300HR凝胶过滤法得大马勃多糖(CGPⅠ-1)。气相色谱研究表明,其单糖组成为:Gal,Glc,Man等四种单糖,其中Gal,Glc,Man,摩尔比为3.92∶11.28∶1.22。经部分酸水解,红外光谱及核磁共振光谱,高碘酸氧化,Smith降解等分析,CGPⅠ-1的主链由Man和Glc构成,存在β型和α型两种糖苷键构型,支链或主链的末端残基由β-Gal(1→4),β-Glc(1→6),α-Glc(1→4)构成,其分子中存在酰胺结构。原子力显微镜观察发现CGPⅠ-1呈分支的线性分子,在水溶液中容易互相缠绕形成强大的网络结构。

药用真菌马勃多糖中单糖组成GC-MS分析

目的:研究马勃多糖的单糖组成及其物质的量之比。方法:马勃多糖经三氟醋酸水解,糖腈乙酰酯衍生化后,利用GC-MS法分析单糖组成,相对校正因子法测定单糖的物质的量之比。结果:马勃的三种多糖CGPⅠ-1、CGP-Ⅱ和CGP-Ⅲ均含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖,各单糖对应物质的量之比分别为1.22∶11.28∶3.92,1.74∶26.45∶0.36,1.06∶9.90∶3.29。此外,CGP-Ⅲ还含有一种未知单糖,由于无相应标糖无法确定其成分。结论:马勃的三种多糖均由多种单糖构成。Rtx-5silms柱可用于马勃多糖的单糖组成分析。

Salinivibrio sp.YH4胞外丝氨酸蛋白酶EYHS耐盐性及生物信息学分析

为探讨菌株Salinivibrio sp.YH4分泌的丝氨酸蛋白酶EYHS的耐盐性及结构特征,采用明胶底物酶谱法分析EYHS的耐盐性,并应用生物信息学手段对EYHS及6种耐盐的S8家族丝氨酸蛋白酶结构特征进行分析。结果表明EYHS在4 mol/L的NaCl溶液中仍具有活性,属于耐盐蛋白酶。EYHS及6种S8家族丝氨酸蛋白酶分子表面的loop区等无规则卷曲所占比例较高,α-螺旋与β-片层则主要位于酶分子内部。EYHS分子表面酸性氨基酸含量较高,且具有弱疏水内核。多序列比对发现蛋白酶的催化三联体两侧存在高度保守的基序和保守的极性氨基酸及芳香族氨基酸,并存在多个保守的Gly与Ala。同源模建和表面电荷分布显示,α螺旋和β片层围成了蛋白酶的催化腔,EYHS活性中心包含由Asp32、His65与Ser215组成的催化三联体,且催化位点区域表面静电势为负。上述结构特征可能有助于耐盐丝氨酸蛋白酶EYHS在高盐环境下维持其稳定性和适度柔性,并有助于其催化功能的发挥,为深入研究耐盐丝氨酸蛋白酶的高盐环境适应性提供了一定的理论依据。

黄芪注射液治疗糖尿病肾病的临床观察

目的：观察黄芪注射液治疗糖尿病肾病（DN）的临床疗效。方法：选择80例DN患者，随机分为两组，对照组给予常规治疗，治疗组除常规治疗外加用黄芪注射液40mL静脉滴注，10～15d为1个疗程，测定两组患者治疗前后的肾功能、血糖、血脂、血浆白蛋白及24h尿蛋白定量。结果：黄芪治疗组24h尿蛋白排泄量明显低于对照组（P〈0．05）。结论：联合应用黄芪注射液治疗糖尿病肾病可降低尿蛋白，改善肾功能，调节脂质代谢。

马勃多糖CGP-Ⅱ抗S_(180)肉瘤及体外抗氧化研究

目的:探讨马勃酸性多糖CGP-Ⅱ抗S180肉瘤的作用及体外抗氧化作用。方法:水提醇沉法制得马勃粗多糖,再经HiTrap Capto DEAE阴离子交换层析和Sephacryl S-300 HR凝胶柱层析进一步纯化得到马勃酸性多糖CGP-Ⅱ。采用咔唑-硫酸法测得糖醛酸含量,同时建立小鼠S180肉瘤移植模型,研究CGP-Ⅱ的体内抑瘤效应。利用氧自由基吸收法(Oxygen Radical Absorption Capacity,ORAC)、DPPH法评价其体外抗氧化能力。结果:CGP-Ⅱ糖醛酸含量为17.2%,200mg/(kg·d)剂量组多糖对S180肉瘤的抑瘤率为48.4%,CGP-Ⅱ具有一定的DPPH自由基清除能力和氧自由基吸收能力。结论:酸性多糖CGP-Ⅱ具有一定的抗肿瘤活性及体外抗氧化作用,本研究为其进一步开发利用奠定了基础。

替吉奥联合奥沙利铂治疗中晚期胃癌近期疗效观察

目的:探讨替吉奥胶囊联合奥沙利铂治疗中晚期胃癌的近期疗效及不良反应。方法:38例中晚期胃癌随机分2组,治疗组18例,奥沙利铂135mg/m2,d1,替吉奥胶囊80mg/m2,d1～14,分2次餐后口服,停药7d。对照组20例,奥沙利铂135mg/m2,d1,5-Fu0.6mg/m2,d1～5,静脉持续滴注大于4h+CF0.1g/m2。21d为1个周期,至少完成2周期后评价疗效。结果:治疗组与对照组有效率无明显差异,疾病控制率有统计学意义,2组副反应有统计学意义(P<0.05)。结论:替吉奥联合奥沙利铂治疗中晚期胃癌与5-Fu联合奥沙利铂相比,近期疗效相似,但可提高中晚期胃癌的疾病控制率,且不良反应较对照组明显减轻,值得进一步临床应用及推广。

Rhodococcus sp.发酵条件及其胆固醇酯酶的部分性质

Rhodococcussp.经发酵培养可合成分泌胆固醇酯酶。对该菌种进行诱导及发酵条件的优化,确定其培养基为(%):蛋白胨1.3,KCl 0.5,牛肉膏0.1,Na2HPO40.632,MgSO40.06,油酸0.4,卵磷脂0.25,Triton X-100 0.16;最适培养条件为:pH7.4,250 mL三角瓶中装量40 mL,接种量6.0%,摇床转速180r/min,30℃培养24h。在最适培养基及最适培养条件下,胆固醇酯酶比活力可达到5.47 U/mg。酶学性质研究结果表明,该酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。

乙型肝炎病毒X蛋白在乙型肝炎病毒感染血清学阳性患者肾组织中的表达及意义

目的通过观察乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)患者临床及肾组织的病理特点,分析乙型肝炎病毒X蛋白(HBx蛋白)在HBV-GN中的病理诊断价值。方法选取2014年6月至2017年6月大同市第五人民医院收治的51例HBV-GN患者,对其肾穿刺活检组织进行免疫组织HBx蛋白表达的观察分析,并与间接免疫荧光法乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)表达情况进行比较,评价HBx蛋白在HBV血清学阳性患者肾组织中的表达及意义。结果 51例患者,乙型肝炎病毒相关性膜性肾病(HBV-MN)12例;不典型膜性肾病(UAMN)9例;膜性肾病(MN)12例;IgA肾病(IgAN)8例;微小病变(MCD)9例;局灶节段性硬化(FSGS)1例。不同病理类型患者肾组织中HBx蛋白及HBsAg,HBcAg的表达有差异。其中UAMN患者HBx蛋白的阳性率高于HBsAg,HBcAg表达的阳性率。IgAN患者、MCD患者HBx蛋白的阳性率均高于HBsAg,HBcAg表达的阳性率。结论 HBV-GN临床易误诊漏诊,在临床基础上结合肾组织中HBx蛋白的检测及病理特点可以提高HBV-GN的诊断准确率。

关于推进医学生物化学理论教学改革的探索

医学生物化学理论教学如何适应现代生命科学的迅猛发展,满足社会对高素质医学人才的需求是高等医学院校需要认真研究的课题。结合生物化学的教学实践,针对医学学科特点,对生物化学所用的教学内容、教学方法及课程考核方法等进行了一系列的探讨,对医学院生物化学理论课程改革提出几点建议。

口服VEGFR2 DNA疫苗抗小鼠Lewis肺癌血管生成的实验研究

背景与目的血管内皮生长因子(VEGF)及其主要受体血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)在肿瘤新生血管和肿瘤基质形成过程中起着重要作用。本研究的目的是观察口服VEGFR2 DNA疫苗抗C57BL/6小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤生长的作用,并探讨其可能的作用机制。方法将重组DNA疫苗对小鼠进行免疫,通过观察小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤大小,记录各组小鼠离体肿瘤湿重,检测移植瘤微血管密度(MVD)及血液CD3+、CD8+T细胞水平,评价重组疫苗的抑瘤作用。结果疫苗组、空质粒组、生理盐水组的MVD分别为1.75±1.07、6.89±2.52、7.57±3.75,肿瘤湿重分别为(2.05±1.32)、(4.83±1.47)、(5.12±1.02)g,疫苗组与其它两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。接种肿瘤后,疫苗组CD3+T细胞仍维持较高水平,其它两组明显下降(P<0.05);疫苗组CD8+T细胞水平较其它两组明显升高(P<0.05)。结论口服VEGFR2DNA疫苗对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的生长具有较强的抑制作用。该疫苗可能是通过杀伤肿瘤内皮细胞、抑制血管生成而起到抗肿瘤生长的作用。

膜性肾病80例临床病理分析

目的探讨膜性肾病的临床病理特征。方法选取2014年—2017年我院收治的80例膜性肾病患者为研究对象,依据患者的年龄、性别、临床特点和病理分型进行分组,总结患者的临床病理特征。结果肾病综合征的占比(50%)明显高于肾炎综合征(17.5%)、血尿(27.5%)以及其他(5%),差异有统计学意义(P<0.05);病理分期Ⅰ期和Ⅱ期患者的占比(83.75%)明显高于Ⅲ期和Ⅳ期患者(16.25%)。免疫荧光IgG和C_3沉积占比76.25%(61/80)明显高于IgM、IgA、Clq沉积占比的23.75%(16/80)。结论膜性肾病多发于中老年患者,临床主要表现为肾病综合征,病理分期主要为Ⅰ期和Ⅱ期,免疫复合物沉积以IgG和C_3沉积为主。

药用真菌马勃多糖的分离纯化及结构分析

目的研究马勃多糖的分离纯化及基本性质。方法以马勃为材料，经热水浸提，用Sevag法脱蛋白，乙醇沉淀，经DEAE—sepharoseFF和Sephacryl S-300HR层析纯化制备多糖；采用Sephacryl S-300HR凝胶层析，200～360nm扫描和SDS—PAGE鉴定多糖的纯度，并测定多糖的表观分子质量；GC—MS分析单糖的组成和摩尔比；咔唑-硫酸法测定糖醛酸的含量；高碘酸氧化、Smith降解和红外光谱分析其结构。结果经分离纯化得到CGP—Ⅰ、CGP-Ⅱ、CGP-Ⅲ主要多糖组分，经凝胶层析检测显示单一对称峰；琼脂糖电泳显示单一多糖条带，未见蛋白染色条带，200～360nm扫描未见特征吸收峰。CGP—Ⅰ、CGP-Ⅱ和CGP-Ⅲ的表观分子质量分别为9．12×10^4、18．6×10^4、15．6×10^4。3种多糖均含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖，CGP—HI还含有另外一种未知单糖，各自的摩尔比分别为1．22：11．28：3．92、1．74：26．45：0．36、1．06：9．9：3．29。CGP-Ⅱ和CGP-Ⅲ的糖醛酸含量分别为17．2％和20．5％，为酸性多糖，CGP—Ⅰ为中性多糖。3种多糖均为1→4连接，有少量的1→6连接。CGP— Ⅰ以α-和β-差向异构为主；CGP—Ⅱ、CGP—Ⅲ以β型差向异构为主，均主要以吡喃糖形式存在。结论对所纯化的马勃多糖进行了初步的性质研究与结构分析。

白细胞介素6体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化

背景：骨髓间充质干细胞是肝细胞的重要肝外来源,在多种细胞因子和生长因子诱导下可分化为肝细胞,从而参与肝功能的修复和重建。目的：观察白细胞介素 6 是否可诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞定向分化。方法：采用贴壁法分离培养昆明种雄性小鼠骨髓间充质干细胞,在无血清肝细胞培养液 HEPATOZYME-SFM 中分别加入2.5,5,10,20 μg/L 白细胞介素 6 诱导其向肝样细胞分化;诱导培养 0,7,14,21,28 d 时取出细胞爬片,细胞免疫组织化学法检测细胞角蛋白 18、甲胎蛋白表达情况,过碘酸-Schiff 糖原染色检测细胞功能,ELISA 和硝酸还原酶法分别检测培养液中白蛋白和一氧化氮水平。结果与结论：当白细胞介素 6 质量浓度在 2.5~10 μg/L 范围内,呈浓度依赖性和时间依赖性增加细胞角蛋白 18、糖原表达率及细胞培养液中白蛋白水平;甲胎蛋白表达为先升后降直至 21d 停止。当白细胞介素 6 质量浓度增加到 20 μg/L 时上述诱导作用均不及质量浓度 10 μg/L 组。只有 10 μg/L 白细胞介素 6 组诱导到 28 d 时细胞培养液中测得微量一氧化氮;提示白细胞介素 6 可诱导骨髓间充质干细胞向肝系细胞分化,且在 10 μg/L 作用最强,质量浓度再增高时诱导作用反而减弱。

硒化牡丹籽粕多糖的抗氧化研究

为了研究硒化牡丹籽粕多糖的抗氧化活性,水提醇沉法提取牡丹籽粕粗多糖,离子交换层析制备牡丹籽粕多糖(peony seed dreg polysaccharides,PSDP)PSDPⅠ、PSDPⅡ及PSDPⅢ。硝酸-亚硒酸钠法对PSDPⅢ进行硒化修饰得Se-PSDPⅢ。采用体外抗氧化实验,评价Se-PSDPⅢ对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟自由基(·OH)的清除作用及对DNA氧化损伤的抑制作用。并以巨噬细胞RAW264.7建立H 2O 2诱导的氧化损伤细胞模型,探讨Se-PSDPⅢ在细胞水平的抗氧化能力。结果表明:Se-PSDPⅢ具有较好的体外清除自由基的能力和抑制DNA氧化损伤的能力。细胞模型法评价结果显示,Se-PSDPⅢ可以降低H 2O 2诱导的巨噬细胞RAW264.7内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成。此外,Se-PSDPⅢ可以升高细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活力。因此,硒化牡丹籽粕多糖作为潜在的抗氧化物,可用于功能产品的开发。

短杆菌属产胆固醇氧化酶的发酵条件优化

短杆菌属(Brevibacterium sp.)是胆固醇氧化酶高产菌,对其进行底物诱导及发酵条件的优化,其最适培养基为蔗糖0.3%,酵母膏0.2%,蛋白胨0.3%,牛肉膏0.3%,K2HPO4 0.1%,MgSO4 0.05%,pH6.8。最适培养条件为接种量5%,24℃培养20h,通气量为50mL培养基/250mL三角瓶,200r/min。结果表明,胆固醇氧化酶的酶活力可达到2439U/L,比未优化前195U/L提高了12倍。在pH6.5和温度54℃条件下测得酶米氏常数Km值为7.1×10-5 mol/L。

链球菌产磷酸甘油氧化酶的基本特性

介绍了经筛选的链球菌（StreptococcusSP．）产磷酸甘油氧化酶的分离纯化及部分性质的研究．发酵培养液经离心收集菌体，用超声波破碎，40％～75％硫酸铵沉淀法进行粗分级，再通过Q-Sepharose FF、Phenyl—Sepharose CL-4B、Chelating Sepharose FF和Sephacryl S-200HR层析纯化，纯化的磷酸甘油氧化酶在还原、非还原SDS-PAGE中显示单一条蛋白着色带并测得该酶的表观分子质量为67．6kDa，用HPLC测得其天然状态酶的表观分子质量为121kDa，据此推测该酶由两个分子质量相同的亚基组成．酶学动力学研究结果表明，该酶的最适温度为35℃，最适pH为8．0，最适条件下测得Km为3．22×10^-2mol／L．一些金属离子和某些有机物对酶活性的影响也进行了讨论．

“互联网+”背景下科研反哺教学在生物化学教学中的探索

科研反哺教学以科研论文为主线,实验方法为手段,有助于增加教学信息量,引导学生主动探索科学研究提出问题-解决问题的过程,体会科研之美和科研论文“讲故事”的逻辑性,实现教师主导、学生主体的教学。该模式充分结合学习通线上网络教学平台,将最新科研成果及时融入课堂教学,提高学生的课堂参与度和学习热情,增强学生独立思考、分析问题和解决问题的能力;最后,通过课堂表现、章节测试、课后作业和课程论文作为过程性评价的指征,及时调整每堂课每一环节的教学设计,提高生物化学教学质量。