神经节苷脂联合亚低温治疗新生儿缺氧缺血性脑病的疗效及对患儿行为智能发育影响

目的:探究神经节苷脂联合亚低温治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的疗效及对患儿行为、智能发育影响。方法:选取2018年1月至2022年12月本院收治的148例HIE患者,随机分为实验组和对照组,74例/组。对照组接受神经节苷脂治疗,实验组在此基础上联合亚低温进行治疗,观察两组治疗后疗效、新生儿行为神经评分(NBNA)、临床表现恢复时间、智能发育商数(DQ)评分以及治疗前后神经损伤标志物[S100β蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)]和血清炎性因子[白细胞介素-8(IL-8)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。结果:治疗后,实验组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);实验组各时间点NABA得分均明显高于对照组(P<0.05);实验组各临床表现恢复时间明显短于对照组(P<0.05);实验组智能发育各指标得分较治疗前升高值大于对照组(P<0.05);实验组S100β蛋白、NSE和MBP水平较治疗前降低值大于对照组(P<0.05);实验组IL-8、hs-CRP和TNF-α水平较治疗前降低值大于对照组(P<0.05)。结论:将神经节苷脂和亚低温联合应用于HIE的临床治疗中,其疗效良好,能改善患儿的行为神经功能和智能发育水平,缩短原始反射、吮吸等临床表现的恢复时间,降低患儿体内炎性因子和神经损伤标志物的水平。

健脾解毒汤联合西药治疗小儿急性感染性腹泻疗效及对炎症因子的影响

目的观察健脾解毒汤联合西药治疗小儿急性感染性腹泻疗效及对炎症因子的影响。方法患者106例随机分为对照组与观察组,分别给予西医常规药物治疗和在此基础上与健脾解毒汤联用治疗;比较两组近期疗效、止泻时间、退热时间、治疗前后主要证候评分,IgG、IgM、IgA、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)及絯因子-κB(NF-κB)水平。结果观察组总有效率为91.80%,显著优于对照组的72.13%(P <0.05);观察组止泻时间和退热时间均显著短于对照组(P<0.05);观察组治疗后主要证候评分显著低于对照组(P <0.05);观察组治疗后IgG,IgM、IgA、IL-8、IL-10及NF-κB水平均显著优于对照组(P <0.05)。结论健脾解毒汤联合西药治疗小儿急性感染性腹泻可显著减轻消化道和全身症状,缩短临床病程,改善肠道免疫功能,并有助于调节IL-8、IL-10及NF-κB水平。

^60Coγ射线全身照射对小鼠胸腺中叉状头转录因子N1表达水平的影响

目的探讨^60Coγ射线全身照射（TBI）诱导的小鼠胸腺损伤，对叉状头转录因子N（Foxn）1及其相关基因表达的影响，以及该变化水平与胸腺损伤程度的相关关系。方法选择65只雄性C57BL／6小鼠作为研究对象。其纳入标准：无特殊病原体（SPF）级，6～8周龄，体重为18．0～21．0g。采用简单随机法将其分为4组：①致死剂量全身照射（L-TBI）5d组（n=10），小鼠接受剂量为7．5Gy的^60Coγ射线TBI；②非致死剂量全身照射（SL—TBI）5d组（n=10），小鼠接受剂量为5．5Gy的TBI；③SL—TBI24d组，小鼠接受剂量为5．5Gy的TBI（n=10）；④对照组（n=5），小鼠不进行任何处理。L—TBI5d组、SL—TBI5d组及对照组小鼠均在TBI处理5d后被处死，获取胸腺组织；L—TBI24d组小鼠于24d后被处死，获取胸腺组织。剩余30只小鼠用于梯度剂量^60Coγ射线照射实验。采用简单随机法将其按照接受^60Coγ射线TBI剂量平均分为6组，每组5只小鼠，即0Gy剂量组、1．0Gy剂量组、2．0Gy剂量组、3．0Gy剂量组、4．0Gy剂量组及5．0Gy剂量组。6组小鼠在TBI处理5d后处死，获取胸腺组织。本研究中TBI剂量率均为0．5Gy／min。采用流式细胞术（FCM）分析上述10组小鼠胸腺各细胞群的细胞数变化。应用定量聚合酶链反应（PCR）技术检测胸腺中与胸腺功能相关的转录因子Foxnl及相关基因mRNA相对表达水平的变化。对小鼠胸腺各细胞群的细胞数，Foxnl及相关基因mRNA相对表达水平进行统计学分析；对Foxnl与白细胞介素（IL）-22mRNA相对表达水平的相关性、FoxnlmRNA相对表达水平与胸腺各细胞群细胞数的相关性进行统计学分析。结果①L—TBI5d组、SL—TBI5d组、SL—TBI24d组及对照组小鼠胸腺组织中总细胞、双阳性（DP）胸腺细胞、CD4＋单阳性（SP）胸腺细胞、CD8＋SP胸腺细胞、双阴性（DN）2、DN3胸腺细胞及胸腺上皮细胞（TEC）数相比，差异均有统计学意义[平均总细胞数：（32．3±6．1）×10^6、（39．2±8．1）×10^6、（187．2±20．3）×10^5、（282．5±20．3）×10^6个，DP胸腺细胞数中位数：4．1×10^6、0．5×10^6、123．3×10^6、240．3×10^6个，CD4^＋SP胸腺细胞数中位数：5．2×10^6、10．4×10^6、26．8×10^6、20．5×10^6个，CD8＋SP胸腺细胞数中位数：1．9×10^6、2．4×10^6、10．2×10^6、6．5×10^6个；F／x^2=310．471、17．863、16．352、16．419，P=0．000、0．000、0．001、0．001]；但4组小鼠的DN2与DN3胸腺细胞及TEC数相比，差异却无统计学意义（DN2与DN3胸腺细胞数中位数：2．2×10^6、9．8×10^6、4．8×10^6、8．1×10^6个，TEC数中位数：1．9×10^6、4．6×10^6、2．5×10^6、3．3×10^6个；x^2=7．574、7．241，P=0．056、0．065）。与对照组相比，L—TBI5d组、SL—TBI5d组小鼠胸腺组织中总细胞数均减低，且差异有统计学意义（P=0．000、0．000）。其中，L—TBI5d组、SL—TBI5d组小鼠DP胸腺细胞数显著低于对照组，且差异亦有统计学意义（P=0．045、0．001）。与SL—TBI5d组相比，SL—TBI24d组小鼠胸腺组织中总细胞数与DP胸腺细胞数均显著增高，且差异有统计学意义（P=0．000、0．045）。②L-TBI5d组、SL-TBI5d组、SL—TBI24d组及对照组小鼠胸腺组织中Foxnl与IL-22mRNA相对表达水平相比，差异均有统计学意义（FoxnlmRNA相对表达水平：15．2±1．2、10．8±1．1、6．6±0．8、1．0±0．1，IL-22tuRNA相对表达水平：11．2±0．8、7．2±1．2、4．4±0．5、1．0±0．1；F=233．971、161．067，P=0．000、0．000）。与对照组相比，L—TBI5d组、SL—TBI5d组小鼠胸腺中FoxnltuRNA相对表达水平显著增高（P=0．000、0．000）；同时，这两组小鼠胸腺中IL-22mRNA相对表达水平亦显著增高（P=0．000、0．000）。与sL—TBI5d组相比，SL—TBI24d组小鼠胸腺中Foxnl与IL-22tuRNA相对表达水平显著减低（P=0．000、0．000）。小鼠胸腺组织中Foxnl与IL-22mRNA相对表达水平存在正相关关系（r=0．976，P〈O．05）。③梯度剂量TBI处理后，6个剂量组胸腺组织中FoxnlmRNA相对表达水平与DP胸腺细胞数存在负相关关系（r=-0．930，P〈0．05）。④L-TBI5d组、SL—TBI5d组及对照组的CC趋化因子配体（CCL）25、delta样配体（DLL）4、自身免疫调节蛋白（Aire）与骨形成蛋白（BMP）4mRNA相对表达水平相比，差异均有统计学意义（CCL25mRNA相对表达水平：11．2±1．5、11．4±1．2、1．0±0．1，DLL4mRNA相对表达水平：7．3±0．9、6．3±0．3、1．0±0．1，AiremRNA相对表达水平：5．1±1．0、5．0±0．1、1．0±0．1，BMP4mRNA相对表达水平：4．4±1．4、3．6±0．5、1．0±0．1；F=148．862、197．667、73．911、21．471，P=0．000、0．000、0．000、0．000）；3组中Foxnl上游基因同源框蛋白（Hox）a3mRNA相对表达水平相比，差异却无统计学意义（1．4±0．4、0．8±0．3、1．0±0．1相比；F=5．368，P=0．221）。与对照组相比，L—TBI5d组中Foxnl下游基因CCL25、DLL4与Aire的mRNA相对表达水平均显著增高（P=0．000、0．000、0．000）；SL—TBI5d组中CCL25、DLL4与AiremRNA相对表达水平亦显著增高（P=0．000、0．000、0．000）。同时，与对照组相比，L-TBI5d组、SL-TBI5d组中BMP4mRNA相对表达水平存在一定程度的增高，且差异亦有统计学意义（P=0．000、0．000）。结论^60Coγ射线TBI可导致小鼠胸腺中FoxnlmRNA表达水平增高，Foxnl表达水平上调及其相关基因表达水平的变化与胸腺受损程度的关系密切。

IL-22在小鼠胸腺受损后T细胞免疫重建中的作用研究

目的探索γ射线照射诱导胸腺损伤后胸腺内IL-22表达水平的变化趋势，并研究IL-22在胸腺损伤后T细胞免疫重建中的作用。方法建立非致死剂量γ射线照射诱导的小鼠胸腺损伤模型，分别设置正常对照组和全身照射（TBI）组，ELISA法检测鼠胸腺及血浆中IL-22的含量；分别给予TBI组小鼠PBS或重组小鼠IL-22腹腔注射处理，设为TBI＋PBS组和TBI＋IL-22组，计数胸腺内总细胞和外周血白细胞含量，同时使用流式细胞术分析胸腺上皮细胞（thymic epithelial cells，TEC）、各阶段胸腺细胞以及外周血T细胞的含量，实时定量PCR分析胸腺中与TEC功能相关的基因Foxnl、Ccl25、Aire和D114的mRNA表达水平。结果①照射后小鼠胸腺内IL-22表达水平高于未经照射处理的正常对照小鼠（P值均〈0．05）；②给予TBI组小鼠IL-22腹腔注射后，TBI＋IL-22组小鼠胸腺内IL-22含量高于TBI＋PBS组（P值均〈0．05）；⑧照射后第14天，TBI＋IL-22组胸腺内Foxnl、Ccl25、Aire和Dll4mRNA表达水平均高于TBI＋PBS组（P值均〈0．05），同时，TBI＋IL-22组胸腺总细胞计数[（5．93±3．19）×106/ml对（1．42±0．46）×106／ml，t=3．128，P=0．033]和外周白细胞计数[（3．08±0．94）×106／ml对（1．43±0．30）×106／ml，t=3．730，P=0．015]均高于TBI＋PBS组。流式细胞术分析示，照射后第14天TBI＋IL-22组小鼠胸腺内TEC和各胸腺细胞亚群含量均高TBI＋PBS组（P值均〈0．05），照射后第7天和14天TBI＋IL-22组外周血T细胞含量均高于TBI＋PBS组（P值均〈0．05）。结论 γ射线照射处理可导致小鼠胸腺内IL-22的含量升高，注射外源性IL-22可增加胸腺内IL-22含量。输注外源性IL-22可促进受损胸腺内TEC功能的修复，并增加各胸腺细胞亚群以及外周血中T细胞的数量。