Cdc42表达载体构建及协同药物对细胞迁移的影响

为了研究Cdc42协同拟肽化合物对A549细胞迁移的影响,构建携带红、绿荧光报告基因的Cdc42真核表达载体,转染293T细胞,观察基因表达情况;测定实验用化合物(PMC4)对A549细胞的毒性;进一步将Cdc42转染高迁移率的A549细胞,然后用拟肽化合物刺激,通过细胞划痕实验,初步检测Cdc42协同拟肽化合物对A549细胞迁移的影响。结果表明:本实验成功构建了Cdc42异构体基因的真核表达载体pGFP-cdc42-2、pGFP-cdc42-3、pRed-cdc42-2、pRed-cdc42-3,转染293T细胞效率约为90%;10 μmol/L的拟肽化合物对A549细胞毒性微弱,拟肽药物分子末端对位上的取代基为氟时,其对细胞迁移具有促进作用,过表达Cdc42时,Cdc42协同药物使细胞迁移进一步增加,具体机制有待进一步研究。