决明子提取物潜在风险因子分析

本文主要综述了决明子的功效及近些年服用决明子后的不良反应,并对决明子的主要成分及含量进行分析,筛查出其中的潜在风险因子,主要有蒽醌类物质,植物甾醇及其氧化物和生物碱等。重点对这些潜在风险因子进行分析,包括它们的性质、结构和安全性分析。大黄素等蒽醌类物质具有平面刚性结构,能显著抑制L-02细胞的活性;植物甾醇与胆固醇的结构类似,易被氧化而产生与胆甾醇氧化物(COPs)类似危害的植物甾醇氧化物(POPs),谷甾醇氧化物能显著抑制HepG2的细胞活性;腺嘌呤对大鼠口服也具有明显的急性毒性。最后对决明子提取物的毒理性研究进行展望,指出应建立体外毒理学评价模型、剂量-反应模型和结构-毒性模型,形成基础毒理数据库,构建保健食品安全性评价预警体系,提出安全限值建议。

叠氮溴化丙锭-荧光定量PCR法实时快速检测5种乳杆菌活菌数方法的建立与应用

【背景】乳杆菌属是发酵食品中最常见的微生物之一,与食品的品质和安全密切相关,定量检测乳杆菌活菌数、解析乳杆菌群落组成对发酵乃至肠道微生物等具有重要意义。【目的】建立一种在种水平上定量检测5种乳杆菌活菌数的叠氮溴化丙锭-荧光定量PCR(propidium monoazide-quantitative PCR,PMA-qPCR)检测方法并探讨其适用性。【方法】以植物乳杆菌、发酵乳杆菌、短乳杆菌、嗜酸乳杆菌和干酪乳杆菌等发酵食品中常见的5种乳杆菌为目标菌株,查找并筛选特异性引物用于荧光定量PCR(qPCR)检测,优化叠氮溴化丙锭(PMA)处理条件,测定PMA-qPCR检测法的特异性、灵敏度及可靠性。最后利用PMA-qPCR法检测黄酒酿造过程中5种乳杆菌的活菌数。【结果】PMA最佳处理条件为:浓度20μmol/L下暗处理15 min后曝光15 min,此时可抑制样品中99.89%的死菌DNA扩增。该方法特异性高,能够准确识别5种乳杆菌;线性关系强,R2>0.98;灵敏度高,检测限为101.8-103.2 CFU/mL;重复性好,Cq值变异系数小于1%;与平板计数相比差异不显著(统计学上),P>0.05。利用该方法检测黄酒中5种乳杆菌的活菌数,发现发酵乳杆菌、干酪乳杆菌和短乳杆菌是主要的乳杆菌(总计占比59%-89%),与已知黄酒酿造中乳杆菌群落组成相符。【结论】建立的PMA-qPCR法能够快速、准确地检测5种乳杆菌的活菌数,为解析样品中乳杆菌的实时组成及检测具有活性但不可培养(viable but nonculturable,VBNC)状态的乳杆菌提供了可靠的手段。