骨形态发生蛋白10及其突变体在CHO细胞中的表达

为了解决骨形态发生蛋白10(bone morphogenetic protein 10,BMP10)前体蛋白proBMP10在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中由于Furin导致的表达产物不均一问题,构建了proBMP10在Furin酶切识别位点处的突变体proBMP10-1(R313K)和proBMP10-2(R316K),并分别将目的基因定点整合进CHO-K1-BAK-/BAX-基因组,成功构建了稳定表达目标蛋白质的重组CHO细胞株。结果表明,proBMP10-2 (R316K)不再被Furin切割,且具有生物活性,而proBMP10-1(R313K)仍然会被Furin切割。

水酶法提取玉米胚芽油的研究

在水酶法制取玉米胚芽油的工艺中 ,纤维素酶和中温 α淀粉酶的复合作用能显著提高玉米胚芽油的收率。其最适参数为 :料液比 1∶5 ,蒸汽预处理时间 2 0min ,酶的加入量 0 8% (纤维素酶和淀粉酶的配比为 5∶3) ;反应时间 6h ,提油率可达 89 75 %。

一株产海藻糖合成酶极地细菌的鉴定

从来源于极地的微生物中筛选得到一株产海藻糖合成酶的耐冷细菌S1,通过形态特征、培养特征、生理生化特征及 16SrRNA基因序列分析 ,初步鉴定该菌为恶臭假单胞菌 (Pseudo monasputida)。

麦芽根中5'-磷酸二酯酶的提取及制备

主要研究了麦芽根中 5 ' 磷酸二酯酶的提取方法。采用细度 40目的原料 ,通过正交试验确定最佳提取工艺为 :加水 6倍 ,pH5 .0 ,在 4℃条件下浸提 2 0h后 5′ 磷酸二酯酶活力达到 1 6 0u/mL。不同浸提液种类、浓度、添加无机盐皆对酶活有影响 ,加入纤维素酶、果胶酶、Viscozyme对麦芽根破壁具有协同作用。

味精清洁生产蒸发凝结水再利用研究

在味精清洁生产工艺中 ,利用四效蒸发技术来浓缩谷氨酸等电结晶母液 ,所得的蒸发凝结水因COD值稍高而不能直接排放。为解决这一问题并节约水资源 ,文章中研究了将凝结水作为配料水应用于味精生产的可行性。通过与自来水进行比较 ,考察了其对液化、糖化和发酵过程的影响。分别用凝结水和自来水作为配料水进行制糖和发酵实验 ,结果二者均无明显差异。这一结果表明 ,蒸发凝结水应用于谷氨酸发酵是可行的。

热激对恶臭假单胞菌S1胞内海藻糖合成酶的影响

研究了热激对恶臭假单胞菌S1胞内海藻糖合成酶的影响。通过正交试验确定了热激的最佳条件:热激在产酶初期(培养20 h)进行,热激时培养温度由20℃升高至30℃,处理时间30 min。在此条件下,海藻糖合成酶的酶活提高了76%。同时在热激后菌体的耐盐性也有较大增强。

米曲霉腺苷酸脱氨酶的产酶条件

通过实验获得了米曲霉 3.80 0固态发酵产腺苷酸 (AMP)脱氨酶的适宜培养基 ,麸皮为主原料 ,成分质量分数为蔗糖 2 % ,鱼粉 2 % ,(NH4 ) 2 SO4 0 .1% ,吐温 80 0 .1% ,含水量 5 0 % .最佳的培养条件为 :2 5 0mL的三角瓶装 2 0 g培养基 ,在 2 8～ 30℃培养 6 0h .发酵结束称取一定量的麸曲加 10倍质量的蒸馏水 ,调节 pH 6 .0 ,在 35℃条件振荡水浴 2h .酶的浸提液经盐析、透析、DEAE柱层析分离后 ,可收集到较单一的活性峰酶 .

Pseudomonas putida S1海藻糖合成酶基因在大肠杆菌中的克隆表达

利用PCR和TA克隆方法扩增和克隆得到了恶臭假单胞菌Pseudomonas putidaS1的海藻糖合成酶基因treS。对其进行序列分析表明,其编码区含有2067bp,编码含688个氨基酸残基的蛋白质,其核苷酸序列和蛋白质序列与来源于其它假单胞菌属细菌的海藻糖合成酶的序列表现出了较高同源性。将该基因序列与表达载体pQE30T连接,构建重组质粒pQE30T-TS,并将其转化至E.coliM15菌株中。重组菌株经诱导表达后SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示有明显的分子量约77.5kD的特异蛋白条带出现。经测定酶活力达19U/mL,约是原始菌株P.putidaS1的50倍。

谷氨酸菌体中核酸类物质的提取

研究了谷氨酸菌体中核酸提取的工艺条件 ,获得了较好效果 .在 12 0℃ ,pH 9,菌体质量浓度 10 g/dL的条件下 ,提取 2h ,蛋白质的分离率为 90 % ,核酸的提取率高达 90 %以上 .

麦芽根中5′—磷酸二脂酶的提取及制备

主要研究了麦芽根中 5′—磷酸二酯酶的提取方法。采用细度 4 0目的原料 ,通过正交试验确定最佳提取工艺为 :加水 6倍 ,pH5 0 ,在 4℃条件下浸提 2 0h后 5′—磷酸二酯酶活力达到 16 0u mL。不同浸提液种类、浓度、添加无机盐皆对酶活有影响 ,加入纤维素酶、果胶酶、viscozyme对麦芽根破壁具有协同作用。酶液经超滤浓缩可制备得率较高的粗酶粉。

打造精品课程群 保障创新人才培养——江南大学“国家生命科学与技术人才培养基地”建设十年纪实

本文对江南大学"国家生命科学与技术人才培养基地"建设过程中课程建设的经验与成果进行了简要总结。人才培养基地建设10年来,逐步建立了融发酵工程上、中、下游知识为一体的课程体系和融课堂内外与校内外为一体的立体实践教学体系,建设了一支由国家级优秀教学团队和全国优秀教师领衔的一流师资队伍和以国家级规划教材、江苏省精品教材为代表的系列优秀教材,从而成功构建起以3门国家精品课程、1门国家双语示范课程和多门省级及校级精品课程为代表的生物工程专业核心精品课程群,极大地促进了人才培养基地的建设。

Aspergillus usamii B_1-12果胶酶合成降解物阻遏的初步研究

Asp·usanlii B_1—12果胶酶的合成为多种碳源所阻遏。加大阻遏物浓度,阻遏效应随之增强。在酶大量合成开始以后加入阻遏物,仍能观察到阻遏现象,对果胶酶不同组分多聚半乳糖醛酸酶(PG)和多聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)具有相同的阻遏效果。外源 cAMP 可以消除这种阻遏效应。阻遏动力学分析和利用各种抑制剂所进行的研究表明。阻遏发生在转录水平上。

稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响

以目前我国谷氨酸发酵广泛使用的谷氨酸棒杆菌S9114 为实验菌株 ,研究了稀土元素对谷氨酸发酵产酸及其谷氨酸脱氢酶的影响。结果表明LaCl3、CeCl3和NdCl3浓度分别为 0 72 0、0 0 71和 0 0 0 7mmol/L时 ,促使谷氨酸发酵产酸水平提高 6%～ 8% ,对菌体的GDH NADPH的酶活性有显著的激活作用。实验还表明 ,稀土元素对纯化GDH

无溶剂体系中酶催化亚油酸、甘油生产1,3-甘油二酯工艺的研究

以亚油酸、甘油为原料,用专一性脂肪酶在无溶剂系统中快速合成了1,3 dilinolein,实验发现真空脱水可有效增加亚油酸的转化率,使反应平衡向合成方向移动。不同反应温度、底物摩尔比条件下的酯化进程曲线对比研究表明,温度、底物摩尔比不仅影响酯化反应的初速度、转化率,还与产物组成密切相关。60℃、亚油酸与甘油摩尔比为2∶1,0.01MPa真空脱水,反应8h亚油酸酯化率可达90.2%。产品经分子蒸馏纯化后1,3 DAG可达84.25%

尼泊金庚酯对常见食品污染菌抑制作用的研究

用分光光度法和菌体干重法研究了尼泊金庚酯对三种细菌、两种酵母和两种霉菌的抑制作用。结果表明,在实验浓度下,尼泊金庚酯对食品中常见污染菌有很强的抑制作用,其中对G+菌作用最强,对霉菌和酵母的作用次之,而对G-菌的作用最差。还测得了对其中几株菌的最小抑菌浓度。其热稳定性比较好,经121℃、30min处理后仍具有良好的抑菌效果。

氮源与无机盐对高浓度酒精发酵的影响

在完全合成培养基条件下 ,就尿素、硫酸铵 2种氮源和硫酸镁、磷酸二氢钾、氯化钙 3种无机盐对 1株产高浓度酒精的酿酒酵母的间歇发酵影响进行了初步研究。结果表明 ,与尿素相比硫酸铵是较好的无机氮源 ,发酵终了酒精浓度可达 119.9g/L;并初步得到该株酵母发酵所需各无机盐的临界浓度分别为 :硫酸镁 5 g/L,磷酸二氢钾 5 g/L(或 <5 g/L) ,氯化钙 5 g/L。

生物柴油耦联丙酮丁醇发酵的初步研究

以4种生物柴油(原料为地沟油、菜籽油、棕榈油和废肯德基油)作为萃取剂,开展了丙酮丁醇静态萃取发酵。通过分析发酵过程中的产气量及发酵40 h后油水两相中的溶剂浓度,发现生物柴油对丙丁梭菌有毒性。另外,静置条件下丁醇在不同油水两相中的液液平衡系数大致相同。在发酵24 h时加入棕榈生物柴油(油水体积比为0.4∶1),丁醇发酵强度达到最大值0.213 g.(L.h)-1、比对照(传统发酵)提高10.9%,且生物柴油中的丁醇质量浓度达到6.44 g.L-1。

不同基质浓度对酒精发酵的影响

研究了 1株酿酒酵母在清液发酵过程中不同基质浓度对发酵的影响。研究发现 ,在初糖质量分数 >15 %时 ,该酵母的生长开始受到抑制 ;在初糖质量分数为 3 5 %时 ,可达最大发酵酒精体积分数 16 5 %。将平均对基质菌体得率与初糖浓度进行关联 ,描述了基质与菌体生长之间的关系 ;而在葡萄糖质量分数≤ 15 %时 ,产物浓度与初糖浓度之间存在线性关系。

HPLC/RI与HPLC/ESI-MS方法研究细菌D-97酶合成海藻糖的过程

通过高效液相色谱 /示差折光检测系统 (HPLC/RI)分析可获得细菌D 97利用糊精或淀粉水解物合成海藻糖的基本生物学信息 ,包括微生物培养碳源对细菌D 97胞内海藻糖合成酶系的影响以及该酶系利用不同种类或不同分子链长度的麦芽寡糖合成海藻糖的能力及作用过程。采用HPLC与RI及电喷雾电离质谱 (ESI MS)联用并结合其他生物学手段对由细菌D 97获得的纯酶组分 (酶A)作用产物进行定量和定性分析 ,从而基本明确了D 97胞内酶合成海藻糖的过程。

ε-聚赖氨酸抑菌性能的初步研究

ε聚赖氨酸是赖氨酸残基通过α羧基和ε氨基形成的酰胺键连接而成的短肽,具有抑菌谱广,水溶性好,安全性高,热稳定性好,抑菌pH范围广等优点.主要研究了ε聚赖氨酸对常见菌的抑菌性能;经过高温处理后的ε聚赖氨酸仍有抑菌活性,表明ε聚赖氨酸有较好的热稳定性;在米饭等食品防腐方面的应用,ε聚赖氨酸也有很好的效果,它与醋酸结合效果更明显.