重组人源化ING4基因的构建及其对肺癌NCI-H460细胞生长抑制作用

目的:构建重组人源化hING4基因并探究其对肺癌细胞的生长抑制效应。方法:以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,通过定点突变技术构建带有绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒Ad-hING4基因。用荧光显微镜和RT-PCR法检测hING4在肺癌细胞中的表达;Western印迹法检测hING4对肺癌细胞中Bax、Bcl-2表达的影响;集落形成试验和FCM法检测hING4对肺癌细胞增殖和凋亡影响。结果:基因测序和PCR结果提示成功构建人源化Ad-hING4基因;并能在肺癌细胞中表达,对肺癌细胞有细胞毒作用;Western印迹法检测结果提示基因在上调Bax表达同时下调Bcl-2的表达;集落形成试验、FCM检测结果提示hING4基因可抑制肺癌细胞增殖并诱导凋亡。结论:成功构建了Ad-hING4基因,并能在体外抑制肺癌细胞生长。

肺癌组织中环氧化酶-2表达和临床病理特征关系的研究

目的:研究肺癌组织中环氧化酶-2(COX-2)的表达及其与临床病理特征、预后的关系。方法:采用免疫组化SABC法检测58例肺癌组织及9例癌远旁正常肺组织中COX-2表达。结果:肺癌组织COX-2阳性表达为60.34%(35/58)较正常肺组织11.11%(1/9)差异有统计学意义(P<0.01);COX-2的表达与患者的TNM分期、淋巴结浸润显著相关(P<0.05),与患者的年龄、性别、吸烟状况、组织类型无关(P>0.05)。COX-2阳性表达组的生存率低于阴性表达组(P=0.001)。结论:COX-2在肺癌的发展、转移过程中有一定作用,COX-2可以作为肺癌的预后指标。

132例肺癌临床及纤维支气管镜结果分析

对 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 2年 12月经纤维支气管镜活检或刷检并经病理或细胞学诊断的肺癌 132例进行分析。结果 :管内增生型占 4 4 .7% ,管壁浸润型占 4 0 .2 % ,外压型占 5 .7% ,正常型占 11.4 % ,经病理证实管内增生型以鳞癌为多 ,占 76 .2 7% ;管壁浸润型以小细胞肺癌为多 ,占 5 2 .83% ,正常型以腺癌为多 ,占 73.33%。纤支镜诊断阳性率为 84 .1% ,以管内增生型和管壁浸润型为高 (P <0 .0 1)。认为纤支镜检查创伤小 ,方法简便 ,诊断效率高 ,是早期肺癌诊断的重要检查工具。

非小细胞肺癌中环氧化酶-2、表皮生长因子受体的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中环氧化酶-2(COX-2)、表皮生长因子受体(EGFR)的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SABC法检测58例非小细胞肺癌及9例癌远旁正常肺组织中COX-2、EGFR的表达水平。结果肺癌组织中COX-2、EGFR阳性表达分别为60.34%(35/58)、63.79%(37/58),明显高于癌远旁正常组织(11.11%,P<0.01);COX-2、EGFR表达与肺癌的TNM分期、淋巴结浸润显著相关(P<0.05),与肺癌患者的年龄、性别、吸烟状况、组织类型无关(P>0.05);COX-2、EGFR有相关表达(P<0.05),COX-2、EGFR阳性表达者预后不良(P<0.05)。结论COX-2、EGFR在肺癌的发展和转移中可能起作用,COX-2、EGFR可以作为肺癌的预后指标。

表皮生长因子受体在肺癌中表达的临床意义

目的探讨肺癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平及其临床意义。方法采用免疫组化法检测58例分化相近的肺鳞癌、肺腺癌及癌旁正常肺组织中EGFR的表达水平。结果肺癌组织EGFR表达阳性率为63.79%(37/58),正常肺组织为11.11%(1/9),EGFR的表达与肺癌患者的TNM分期、淋巴结浸润显著相关(P<0.01),与肺癌患者的年龄、性别、病理类型、吸烟状况无关(P>0.05),EGFR阳性表达组的生存率低于EGFR阴性表达组(P<0.01)。结论EGFR阳性表达的患者预后差,EGFR可作为肺癌的预后判断指标。

中西医结合治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性发作期的疗效观察

目的探讨中西医结合治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性发作期的疗效。方法选自2010年1月至2011年12月该院收治的98例老年慢性阻塞性肺疾病患者急性期为研究对象,随机分为两组;其中50例患者作为对照组,采用对症治疗:控制感染,控制哮喘结合一定激素治疗。48例患者作为研究组,在对照组的基础上,加自拟中药汤剂治疗,根据辨证施治原则,酌情加减观察。观察两组治疗前后的疗效,生活质量评分(SGRQ),第一秒用力呼气量占预计值百分比(FEV1%预计值)、第一秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV1/FVC)呼气峰流速(PEF)指标、动脉血氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2)。结果与对照组疗效(79.17%)比较,研究组疗效(91.84%)明显增加(P<0.05)。治疗后,与对照组SGRQ比较,研究组SGRQ改善明显(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗后各指标均有改善(P<0.05)。治疗后,与对照组比较,研究组FEV1、FEV1/FVC,PEF,PaO2和PaCO2改善均较对照组明显(P<0.05)。结论中西医结合综合治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性发作期的治疗效果要远远强于单一西医治疗,适合临床推广。

可溶性FasL联合survivin RNA干扰诱导肺腺癌细胞凋亡

目的:探讨可溶性FasL(sFasL)联合survivin RNA干扰对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法:构建survivin特异RNA小干扰表达载体,DNA测序,转染A549细胞。G418(geneticin)筛选稳定表达survivin RNA小干扰细胞株,荧光实时定量RT-PCR、免疫印迹(Western blot)和免疫组化法检测survivin mRNA和蛋白表达。sFasL作用于转染后细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测细胞活性和凋亡率。结果:成功构建survivin-siRNA表达载体,筛选出稳定表达单克隆细胞。Survivin mRNA和蛋白表达分别下降76.4%(P<0.01)和84.5%,免疫组化也显示survivin下调。sFasL联合survivinRNA干扰细胞,光密度值在各时间点较siRNA组、sFasL组和对照组均明显降低(P<0.01),抑制率增加;凋亡率较siRNA组、sFasL组和对照组明显增加(P<0.01)。结论:Survivin RNA干扰表达载体可降低survivin的表达。sFasL联合survivin RNA干扰较单用sFasL或survivin RNA干扰能更有效地抑制肺腺癌细胞A549增殖,促进凋亡。

Survivin特异小干扰RNA表达载体构建及对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的测定Survivin特异小干扰RNA(siRNA)表达载体对肺腺癌细胞A549 Survivin基因表达的抑制及对增殖和凋亡的影响。方法构建Survivin特异性小干扰RNA表达载体,转染A549细胞,筛选出稳定表达的细胞株。用荧光实时定量反转录聚合酶链反应法、Western blot和免疫组化法检测Survivin基因mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果经测序鉴定证实成功构建Survivin-siRNA表达载体。Survivin基因mRNA表达量下降76.4%,Western blot显示蛋白表达下降84.5%,免疫组化法也显示Survivin蛋白表达下降。MTT法测定细胞增殖较对照组减慢(P<0.01),细胞凋亡率较对照组增加8.95%(P<0.01)。结论Survivin特异siRNA表达载体下调Survivin基因表达,抑制A549细胞的增殖,促进凋亡。

全反式维A酸联合c-myc RNA干扰抑制肺腺癌细胞增殖并诱导凋亡

目的探讨全反式维A酸(ATRA)联合c-myc RNA干扰后肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的改变及对survivin基因表达的影响。方法构建c-myc特异RNA小干扰(siRNA)的表达载体,转染A549细胞后G418(Geneticin)筛选出稳定表达c-myc特异siRNA的细胞株,荧光实时定量RT-PCR和免疫印迹(Western blot)检测c-myc基因表达水平。ATRA作用于c-myc RNA干扰细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测吸光度值,流式细胞仪测凋亡率,定量RT-PCR和免疫印迹检测survivin基因表达。结果成功构建c-myc-siRNA表达载体。c-myc基因mRNA和蛋白表达下降71.9%和85.6%。ATRA联合c-myc-siRNA细胞组吸光度值在各时间点较单用ATRA组,单用c-myc-siRNA组以及对照组均下降,差异有显著性(P<0.01),凋亡率增加,差异有显著性(P<0.01)。ATRA联合c-myc-siRNA细胞,survivin表达下降49.2%,差异有显著性(P<0.01)。结论ATRA联合c-myc-siRNA较单用ATRA或c-myc siRNA能更有效地抑制A549细胞的增殖,促进细胞的凋亡。survivin基因表达降低。

HER2、HER1在非小细胞肺癌中过度表达及其临床意义

目的检测人体表皮生长因子受体2(HER2)与人体表皮生长因子受体1(HER1)在非小细胞肺癌中的表达,研究其过度表达与肺癌临床病理的关系。方法采用免疫组化(SP)法检测有5年随访资料的58例肺癌(32例鳞癌和26例腺癌)组织中HER2与HER1的表达。结果HER2、HER1、HER2和HER1双表达(HER2+1)表达率分别为56.9%、63.8%、31.0%; HER2、HER1、HER2+1的过度表达与肺癌的淋巴结转移、TNM分期呈正相关,与术后5年生存率呈负相关。结论HER2、HER1的过度表达不是肺癌形成过程中的早期现象,而是肺癌发生发展过程中的晚期现象;HER2、HER1、HER2+1过度表达与肺癌患者术后预后呈负相关,是肺癌患者预后的标记指标之一。

表皮生长因子受体与非小细胞肺癌患者预后及术后生存率的关系

目的:分析人体表皮生长因子受体1,2,3单独及联合过度表达与非小细胞肺癌患者术后的5年生存率的关系。方法:选用苏州大学附属医院1996-07/1998-12胸外科非小细胞肺癌手术蜡块标本共58例。男39例,女19例;年龄34～78岁。所有患者术前均未接受抗癌治疗。肺鳞癌32例,肺腺癌26例;Ⅰ期肺癌11例,Ⅱ期26例,Ⅲa期14例,Ⅲb期3例,Ⅳ期4例(Ⅲb,Ⅳ期为姑息手术的晚期肺癌);低分化肺癌12例,中分化肺癌31例,高分化肺癌15例;淋巴结转移41例。1999-01/2004-01采用复诊、电话、通信、登门询问的形式对患者的预后进行5年随访。采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测有5年随访资料的58例肺癌组织中人体表皮生长因子受体1,2,3的表达。结果:①鳞癌人体表皮生长因子受体1过度表达阳性率犤68%(25/37)犦明显高于腺癌犤32%(12/37)犦(χ2=6.348,P<0.05);有淋巴结转移患者人体表皮生长因子受体1,2,3及三者联合过度表达阳性率犤81%(30/37),82%(27/33),94%(16/17),100%(11/11)犦明显高于无淋巴结转移者犤19%(7/37),18%(6/33),6%(1/17),0犦(χ2=4.576～6.371,P<0.05);TNM分期Ⅰ+Ⅱ+Ⅲa期人表皮生长因子1,2,3过度表达阳性率犤81%(30/37),79%(26/33),65%(11/17)犦明显高于TNM分期Ⅲb+Ⅳ期者犤19%(7/37),21%(7/33),35%(6/17),χ2=4.518,6.031,12.224,P<0.05～0.01犦;而人体表皮生长因子受体1,2,3联合过度表达阳性率明显低于TNM分期Ⅲb+Ⅳ期者犤45%(5/11),55%(6/11),χ2=23.079,P<0.01犦。②人体表皮生长因子受体2,人体表皮生长因子受体3过度表达与病理类型鳞癌和腺癌无相关性(P>0.05);人体表皮生长因子受体1过度表达与肺癌病理类型相关(｜r｜=0.331,P<0.05)。人体表皮生长因子受体2,1,3过度表达与淋巴结转移及TNM分期相关(｜r｜=0.279～0.459,P<0.05～0.01),与肺癌的分化程度不相关。人体表皮生长因子受体2过度表达组的5年生存率明显低于非过度表达组(P<0.05)。人体表皮生长因子受体2,1,3联合过度表达组的5年生存率明显低于非联合过度表达组(P<0.01)。结论:有淋巴结转移、鳞癌、TNM分期Ⅰ+Ⅱ+Ⅲa期患者更易检测到人体表皮生长因子受体2,1,3的过度表达阳性;人体表皮生长因子受体2,1,3联合过度表达肺癌患者5年生存率低于人体表皮生长因子受体2,1,3的过度表达患者,人体表皮生长因子受体2的过度表达患者5年生存率低于非过度表达患者。

经纤支镜诊断46例支气管结核临床分析

目的 探讨纤维支气管镜在支气管内膜结核早期诊断中的作用。方法 1995年 1月～ 2 0 0 2年 12月经纤维支气管镜 (纤支镜 )活检或刷检确诊支气管内膜结核 4 6例患者进行临床特点和纤支镜结果统计分析。结果 4 6例病人均证实为支气管内膜结核。 8例痰涂片找抗酸杆菌阳性 ,38例行纤支镜刷检找抗酸杆菌阳性 ,11例活检证实为结核。纤支镜检查示炎症浸润型 4 1.3% ,增殖型 13.0 % ,狭窄闭塞型 2 6 .1% ,溃疡型 15 .3% ,正常 4 .3% ,纤支镜刷检阳性率高于痰涂片检查和活检 (P<0 .0 1)。结论 支气管内膜结核缺乏特异性临床表现 ,X- CT诊断价值不高 ,纤支镜检查成为支气管内膜结核早期诊断的主要措施。

克咳胶囊联合孟鲁司特治疗咳嗽的应用效果探究

目的:研究、分析克咳胶囊联合孟鲁司特治疗咳嗽的临床治疗效果。方法:收治慢性咳嗽患者46例,随机平分两组。对照组服用复方甘草口服液联合孟鲁司特治疗,观察组服用克咳胶囊联合孟鲁司特治疗,治疗10 d后对两组患者临床治疗效果进行评价。结果:观察组总有效率87.0%,高于对照组的65.2%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:克咳胶囊联合孟鲁司特治疗咳嗽临床效果显著。

环氧化酶-2与肺癌

环氧化酶 (COX)是前列腺素合成过程中的重要限速酶 ,目前至少已发现有两种同工酶 :COX 1和COX 2。国外学者研究发现COX 2在肺癌中高度表达 ,并通过抑制凋亡、增强肿瘤转移能力和诱导血管生成而使肿瘤发生、发展。本文就COX 2与肺癌的关系作一综述。

转化学困生 提高班级整体素质

在每一个班级，学生的学习水平都是参差不齐。有的能力强，素质好；有的基础差，学习能力弱。优、良等级学生学习能力强，教师点到即可，而对于基础较差、能力较弱的学生，我们要让他们明白自己的差距所在，知道自己的努力方向和将要达到的目标，花费较多的时间、精力。教师对这些学困生要因才施教，设计好辅导的计划。

环氧化酶-2表达与老年人非小细胞肺癌临床病理特征的关系

非甾体类抗炎药（NSAIDs）作用靶点为环氧化酶，环氧化酶是催化花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶。目前已被证实至少有2种同工酶COX-1和COX-2。COX-2被认为是诱导型反应基因，在正常组织中表达低下或者不能检出，但可被细胞因子、癌基因等诱导表达，并参与肿瘤的发生、发展。我们对44例老年人非小细胞肺癌组织中COX-2表达进行检测，探究其与老年人肺癌浸润、转移及其预后的关系。