东方百合‘Sorbonne’原生质体培养初步研究

百合原生质体培养对百合远源杂交育种具有重要意义。本研究以东方百合‘Sorbonne’花托为外植体，诱导胚性愈伤组织，并对其原生质体提取和培养进行初步研究。结果表明：MS＋Picloram 3mg／L为胚性愈伤组织诱导最佳培养基；胚性愈伤组织在酶解液为2％纤维素酶R-10＋0．5％离析酶R-10＋0．05％果胶酶Y23＋147mg／L二水合氯化钙＋976mg／L2-吗啉乙磺酸＋0．6mol／L甘露醇，酶解12h，制备的原生质体产量最高达4×10^5个／mL，活性达52％；在胚性愈伤组织诱导培养基中进行原生质体的悬滴培养、液体培养、固体培养、固液结合培养和看护培养。结果表明，看护培养是最佳培养方法，并在改良MS＋Picloram 2mgm的培养基中培养2～3d观察到长细胞壁的原生质体，培养4～6d，可见原生质体的第一次分裂，培养40-45d，观察到原生质体分化成的细胞团。