猪圆环病毒2型病毒样颗粒和塞内卡病毒灭活二联疫苗免疫效力实验

为评价猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)和塞内卡病毒(SVV)全病毒灭活二联疫苗免疫效果,本研究将PCV2-VLP与SVV全病毒灭活疫苗等体积混合,加入ISA201佐剂乳化制备成PCV2-VLP和SVV全病毒灭活二联疫苗,并以PCV2-VLP疫苗和SVV全病毒灭活疫苗分别作为对照,3组疫苗免疫仔猪后于不同时间采集血清,通过间接ELISA检测血清中PCV2特异性抗体,采用中和试验法检测SVV中和抗体,结果显示单独使用PCV2疫苗免疫组仔猪PCV2特异性抗体水平稍高于二联疫苗免疫组,但二者无显著差异(P>0.05);二联疫苗免疫组与单独使用SVV疫苗免疫组仔猪SVV中和抗体效价也相当。首免后28 d相应实验组分别经滴鼻肌注各2 mL感染PCV2(10^(5)TCID50/mL)或SVV(10^(9.5)TCID50/mL),进行攻毒保护试验,结果显示二联疫苗免疫效果与PCV2单苗免疫效果相当,针对PCV2的攻毒保护率均为80%;针对SVV攻毒,二联疫苗免疫组及SVV单苗免疫组仔猪均无明显临床症状,保护率均为100%。以上结果表明PCV2-VLP和SVV全病毒灭活二联疫苗免疫效果与单独PCV2疫苗或SVV疫苗免疫效果相当,该灭活二联苗免疫仔猪后能够诱导机体产生体液免疫应答,具有良好的免疫保护作用。本研究首次将PCV2-VLP和SVV全病毒灭活疫苗进行联合免疫,试制了PCV2-VLP和SVV全病毒灭活二联疫苗,并评价了其对仔猪的免疫效力,该疫苗对临床预防PCV2及SVV感染具有潜在的应用价值。

PCV2-VLP和SVV全病毒灭活的组合物对小鼠的免疫原性研究

为评价猪圆环病毒2型病毒样颗粒(PCV2-VLP)和塞内卡病毒(SVV)全病毒灭活组合物的免疫效果。本研究首先通过透射电镜对PCV2-VLP的完整性进行鉴定,结果显示,PCV2-VLP颗粒完整,大小均一,直径为17 nm~20 nm。表明PCV2-VLP完整性良好,可以用于后续研究。然后将PCV2-VLP与SVV全病毒灭活病毒液等体积混合,制备二联组合物。将二联组合物、PCV2-VLP和SVV全病毒灭活病毒液分别以603和卡波姆作为佐剂两次免疫小鼠,并设立对照组。初免后每周采血,通过ELISA检测PCV2特异性抗体水平及IL-4和IFN-γ的分泌水平,通过中和试验检测小鼠血清针对PCV2和SVV的中和抗体。结果显示,相比卡波姆佐剂,二联组合物、PCV2-VLP和SVV全病毒灭活病毒液配合603佐剂免疫均能够诱导小鼠产生更高的特异性抗体及中和抗体。在相同佐剂下,二联组合物免疫小鼠产生的PCV2抗体与PCV2-VLP组相当,产生的SVV中和抗体则高于SVV单独免疫组(p<0.05)。各免疫组小鼠产生的细胞因子含量相当。表明,603佐剂优于卡波姆佐剂;二联组合物可以刺激小鼠产生针对PCV2和SVV的高水平中和抗体,具有良好的免疫原性。本研究首次将PCV2-VLP与SVV全病毒灭活病毒液进行联合免疫,在小鼠上证明具有良好的免疫原性,具有很大的参考价值,为进一步猪的免疫实验提供参考依据。