戊型肝炎病毒荧光定量RT-PCR快速检测技术的建立和初步应用

利用DNAMAN软件对GenBank登录的戊型肝炎病毒四个主要基因型代表株的序列进行分析,选择其高度保守的ORF2区域设计合成引物和探针,并用包含有扩增区域的核苷酸片段进行体外转录制备标准品cRNA。在对荧光定量RT-PCR的反应条件优化的基础上,建立了适用于戊型肝炎病毒主要基因型检测的荧光定量RT-PCR检测技术。该检测技术可以有效检测I型和IV型戊型肝炎阳性病料,而对猪的其它几种疫病阳性病料则为阴性结果,证实本技术的特异性强、可靠性好。对阳性标准品的检测结果表明,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR灵敏度可达2.0×10^1拷贝/反应,相比于巢式RT-PCR方法,其灵敏度高10-100倍以上。在对54份临床样品的检测中,进一步证实了该方法快速、灵敏且重复性好,可满足戊型肝炎病毒早期快速诊断的需要。

动物检疫实验室禽流感检验能力验证样本制备技术的研究

近年来在国际范围内发生的由高致病力禽流感等动物源性疫病造成的食品安全恐慌．给畜牧养殖业造成了严重的打击．使各国政府对动物源性食品安全问题予以前所未有的高度重视。动物检疫实验室能力验证的考核作为实验室质量控制方法、证实实验室自身实力．已成为促进检疫结果准确和国家动物源性食品安全技术支撑体系的有力工具．为实验室检疫结果的国际间互相承认在我国食品贸易中将具有更加积极的现实意义。

欧盟食品残留物质监控体系的概述及启示

食品残留物质监控是世界上大多数国家食品安全监管的主要手段之一,食品残留物质监控体系的完善与否也成为评判一个国家或地区食品安全监管水平的重要参数。本文在介绍欧盟食品残留物质监控体系的基础上,对我国食品残留物质监控中存在的问题进行了剖析,提出了进一步完善我国食品监控机制的建议。

口蹄疫病毒非结构蛋白基因的克隆表达及免疫活性的研究

从口蹄疫病毒(FMDV)细胞培养物中提取总RNA,设计简并引物通过RT-PCR获得了完整的3ABC基因片段,将3AB基因和部分3ABC基因分别克隆到原核表达载体上构建重组表达质粒pET-3AB和pET-3ABC,然后转化BL21(DE3)plysS进行诱导表达,将表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。结果表明,3AB基因和3ABC基因可以在大肠埃希菌中高效表达,且表达产物能够与FMDV阳性血清产生免疫反应。进一步摸索重组蛋白的纯化条件,制备纯化蛋白,以纯化的表达产物为包被抗原进行间接ELISA检测,结果表明,重组蛋白具有特异的免疫学活性,能够用于鉴别FMDV感染动物血清和免疫动物血清。

三重实时荧光RT-PCR检测三种鱼类弹状病毒的研究

鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus IHNV)、鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus VHSV)和鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus SVCV)是同属弹状病毒科(Rhabdoviridae)的3种鱼类病毒,也是影响水产养殖业的3种重要病毒。通过对这3种病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守区域,设计了3条分别针对这3种病毒的Taqman MGB探针,并选择3种无相互干扰的荧光基团进行标记。以此为基础建立针对该3种病毒的三重实时荧光RT-PCR的检测方法。通过反应条件的优化,该三重实时荧光RT-PCR最低可检测至102拷贝/反应的病毒量。同时,该方法还对病毒混合感染EPC细胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑马鱼进行了检测。实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的病毒检测方法。

法国食品、环境、职业健康与安全署简介

2010年7月由法国食品卫生安全局(AFSSA)和环境与职业健康安全局(AFSSET)合并成立了法国食品、环境、职业健康与安全署(ANSES)。该机构主要使命是促进人类健康与环境、工作场所和食品方面的保护。本文对ANSES的组织机构设置、涉及领域、职能、措施、管理和专家评估、风险评估的要求及实验室等基本情况进行了介绍。

意大利食品安全管理机构及其职责

意大利作为欧盟的食品生产和消费大国,在食品安全管理、科研、监督等方面有一套较为成熟的体系。本文重点介绍了意大利国家、地区、地方三级食品安全管理机构及其职责,以及与食品安全相关的技术支撑机构与体系。

鲤春病快速诊断技术的临床应用

本文在建立的鲤春病病毒荧光RT-PCR快速检测技术基础上,对国内外收集的19株SVCV病毒悬液进行了验证试验.验证结果良好。另外,还通过人工动物感染试验,将感染SVC病毒的鲤鱼组织样品在同经典的细胞培养分离病毒方法对比研究后,认为应用该方法检测SVCV的组织研磨样品悬液时,最多能将3尾鱼的组织器官混合后制备待检样品。本文还用本实验室制备的SVCV单抗,运用间接免疫荧光抗体技术(IFAT)对SVCV欧洲株和亚洲株感染的鲤鱼上皮瘤细胞进行检测.结果表明,该抗体可特异性检出接毒后感染细胞中的SVCV欧洲株和亚洲株.表明应用该单抗可以检测出SVCV的欧洲株或亚洲株.不会造成漏检现象。

检验检疫动物病原微生物实验活动生物安全要求的分析研究

本文在对现行的有关生物安全规章制度和标准的梳理基础上,针对农业部和卫生部颁发的操作细则和名录进行分析研究。在此基础上对编制原则、实验活动所需实验室生物安全级别的释义、检验检疫系统涉及到的动物病原微生物种类的组成情况、新增加的病原微生物的危害程度分类等级和具体的生物安全要求的确定原则与细则及时更新机制等内容进行了研究和探索。

一些国家对观赏鱼的进口检疫法规及要求

本文分析了欧盟、美国、日本等主要观赏鱼进口国的检疫法规及检疫要求,并对我国目前的观赏鱼检疫体系以及存在的问题进行了探讨,此文可为促进观赏鱼出口提供指导,也可为我国制定进口观赏鱼检疫法规和检疫要求提供了参考。

鲑鳟鱼类养殖过程中常见疾病及防治

目前鲑鳟鱼类病害主要包括病毒性鱼病、细菌性鱼病、真菌性鱼病和寄生虫性鱼病等几大类。本文 着重介绍了这几类鱼病的病原、传播途径、症状及其防治。

基于射频识别技术的进口种牛检疫采样记录系统的设计与开发

针对进口种牛检疫采样人员需求多、容易出错、耗时长的问题,设计开发了基于射频识别技术的动物检疫采样记录系统。该系统通过便携式电子耳标识别设备直接读取牛电子耳牌信息,通过蓝牙录入计算机,由电脑核对并记录动物耳号信息后制作样品标签,实现了采样记录的自动化,节省了人力、时间,降低了差错率。