金花茶对二乙基亚硝胺致大鼠肝癌抑制作用研究

目的应用本研究室建立的二乙基亚硝胺(DEN)致大鼠作用的短期体内实验模型,研究了5%的金花茶叶和5%的金花茶浓缩液对DEN致肝癌作用的影响。方法实验用SPF级雄性Wistar大鼠,用DEN作为肝癌的启动剂(200μg/kg,ip,只用1次),然后喂食含0.015%的2-AAF(2-乙酰氨基芴)饲料2周,加大部分肝切除,作为选择性促进程序,使被DEN启动的肝细胞迅速增生成癌前病灶。各实验组大鼠从实验一开始即喂食含5%的金花茶叶和5%金花茶浓缩液饲料,对照组则喂食基础饲料。大鼠于停饲2-AAF饲料3天后处死。肝脏按规定部位取材,做γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)染色,用笔者设计的计算机软件计算肝癌前病变γ-GT阳性灶,算出平均每cm2肝面积中γ-GT阳性灶的数目、面积。结果实验组γ-GT阳性灶的数目、面积均明显少于和小于对照组。结论5%金花茶叶和5%的金花茶浓缩液有抑制DEN致大鼠肝癌作用。

树实验肝癌形成过程中p53、bcl-2蛋白表达及其与细胞凋亡之间的关系

目的:动态研究在树肝癌形成过程中p53与bcl-2的蛋白表达以及它们之间的关系。方法:利用免疫组织化学SP法,对实验组35例树肝癌形成过程中第30周、60周、肝癌组织及13例同期的空白对照组树肝活检组织,进行p53、bcl-2蛋白的检测。结果:p53、bcl-2基因参与HCC的发生,在树HCC形成过程中,它们的表达均呈递增趋势。结论:p53、bcl-2基因之间的表达无明显依存关系。p53对凋亡的影响并不显著,bcl-2的抗凋亡作用受Bax的影响,bcl-2/Bax比率更能准确地反映细胞凋亡的程度。

PTEN基因在人和树鼠句肝细胞癌组织中低表达

目的:研究人和树鼠句肝癌和癌旁组织中PTEN基因的表达情况以及与肝癌侵袭转移的关系。方法:用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测人肝癌、癌旁组织和正常组织以及树鼠句肝癌和癌旁组织中PTEN mRNA和PTEN蛋白的表达情况。结果:PTEN mRNA在人的正常组织、癌旁组织、肝癌组织中的表达依次降低,差异有统计学意义,t值分别为-0.955和-10.065,P值均<0.001;树鼠句肝癌组织中PTEN mRNA的表达显著低于癌旁组织中的表达,t=-3.25,P=0.004。PTEN蛋白的表达在人的癌旁组织显著高于肝癌组织,t=-2.163,P=0.038;在树鼠句则无差别,t=0.757,P=0.459。结论:PTEN基因的表达缺失可能与肝癌的发生有关;用树鼠句进行肝癌发病学的研究基本上是可行的。

银杏叶对二乙基亚硝胺诱导的肝癌作用研究

[目的]应用二乙基亚硝胺(DEN)致大鼠肝癌作用的短期体内实验模型,研究银杏叶对DEN致大鼠肝癌作用的影响。[方法]SPF级雄性Wistar大鼠,用DEN作为肝癌的启动剂(200μg/kg,ip,只用1次),实验组大鼠从实验一开始即喂食含5%的银杏叶饲料,对照组则喂食基础饲料,然后喂食含0.015%的2-乙酰氨基芴(2-AAF)饲料2周,大鼠于停饲2-AAF饲料3天后处死。肝脏取材,做γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)染色,并利用计算机软件计算肝γ-GT阳性灶,计算平均每平方厘米肝面积中γ-GT阳性灶的数目、面积。[结果]银杏叶组γ-GT阳性灶的数目、面积分别为1.46±1.02和6.11±4.61,而对照组分别为4.96±0.97和20.21±4.46,统计学显示差异显著。[结论]银杏叶具有抵抗DEN对大鼠的毒性作用,并能抑制DEN诱导的大鼠肝癌前病变。

树鼩肝癌形成过程中凋亡抑制基因的表达及与细胞凋亡的关系(英文)

背景:目前对肝细胞癌(HCC)的研究大多数只局限于对人的肝癌及癌旁组织进行研究,这种研究方法的最大缺陷是不能动态观察肝癌形成过程中的不同时期的各种变化。目的:利用实验诱发树鼠句肝癌的动物模型,动态研究在树鼠句肝癌形成过程中凋亡抑制基因(survivin)的表达及其抑制凋亡的机制。设计:完全随机对照实验。干预:实验组给予AFB1(黄曲霉毒素B1)105周,然后继续喂正常饲料至150周。对照组动物不喂AFB1,仅按正常饲养方法同样喂至150周。实验期间每隔15周对实验组和对照组动物打开腹腔进行肝组织活检。活检组织用40g/L中性甲醛固定,石蜡包埋。然后将对照组30,60,90周和实验组30,60周及HCC组织的切片,采用免疫组织化学S-P法和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术,进行sur-vivin基因蛋白和凋亡细胞的检测。主要观察指标:树鼠句肝细胞癌形成过程中每一阶段的survivin基因蛋白的表达情况和细胞凋亡的情况。结果:survivin基因与HCC的发生有关,在树鼠句HCC形成过程中,其表达呈递增趋势。survivin在对照组30,60,90周,实验组30,60周平均得分分别为0.62,0.77,0.92,1.02,1.6,在树鼠句HCC组织切片中平均得分为5.34,与各组肝组织中的表达差异有显著性意义(t=3.0580,3.2564,3.0316,4.7715,3.8036,P<0.

PTEN基因在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的：研究人原发性肝癌（HCC）PTEN基因的表达及其临床意义。方法;用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测人HCC组织、癌旁组织、正常组织中PTEN-mRNA和人HCC组织、癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况。结果：PTENmRNA在人的正常组织、癌旁组织、HCC组织中的表达依次降低，差异有统计学意义（P＜0．01）；PTEN蛋白的表达在人HCC组织显著低于癌旁组织（P=0．038）。PTEN基因的表达与临床分期、门脉癌栓、病理分级有密切的关系（P=0．031，P=0．001，P=0．025）。临床分期为I-Ⅱ期的，其表达较Ⅲ～Ⅳ期的高；无门脉癌栓的较有门脉癌栓的表达高；病理分级为I～Ⅱ级的较Ⅲ～Ⅳ级的表达高。结论：HCC的发生中可能存在PTEN基因的突变或缺失。PTEN基因的表达缺失可能与HCC的恶性程度、疾病的进程及HCC的侵袭转移有密切关系。PTEN基因低表达，HCC病人病程较晚、肝癌的恶性程度较高，较容易发生侵袭转移，预后较差。

肝细胞癌组织中PTEN蛋白的表达以及与肝癌侵袭转移的关系

目的研究人原发性肝癌(HCC)中的磷酸酶基因(PTEN基因)蛋白的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学方法分别检测人HCC组织、癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况。结果PTEN蛋白的表达在人HCC组织显著低于癌旁组织(P=0.038),其阳性率也显著低于癌旁肝组织(P=0.007)。PTEN蛋白的表达与HCC患者的年龄、血清AFP水平、肿瘤个数、肿瘤直径、临床分期、术后复发、有无肝外转移、病理分级等多数临床病理学指标无关,而与有无门脉癌栓有密切的关系。无门脉癌栓的患者的肝癌组织中的PTEN蛋白较有门脉癌栓的表达高(P=0.010)。结论HCC的发生中可能存在PTEN基因的突变或缺失。PTEN基因的表达缺失可能与HCC的恶性程度,疾病的进程及HCC的侵袭转移有密切关系。PTEN基因低表达,HCC患者病程较晚、肝癌的恶性程度较高,较容易发生侵袭转移,预后较差。

实验诱发树鼩肝癌过程中细胞凋亡及其相关基因、p53突变位点的研究

目前对肝细胞癌（HCC）的研究一般为手术切除的肝癌组织，并用癌旁肝组织作为对照肝组织。这些研究只能观察癌形成时或形成后的基因表达状况，不能动态观察在肝细胞癌变过程中一些基因的表达状况。而以往利用动物模型研究不同诱癌阶段的基因改变，也通常是在不同诱癌阶段分批处死动物获取所需的组织，故也只能从群体上而不能从个体上动态观察基因表达情况。

bcl-2基因家族对细胞凋亡的调控

细胞凋亡的基本过程大致包括刺激期、信号传递期、效应期。细胞凋亡在多数细胞器官的发育和平衡中起着重要的作用。从线虫到人类遗传学和分子生物学的研究表明,细胞凋亡的发生是细胞受促进性双向因素共同调节的结果,它的正负调节因子常是同一基因家族成员,它们决定细胞阴亡的细胞外、细胞表面和细胞内各个步骤。已知细胞凋亡的相关基因比较多,如癌基因c-myc,抑癌基因p53、Rb以及bcl-2基因家族等等。本文重点阐述bcl-2基因家族对细胞凋亡的调控机制。

mRNA-cDNA高敏感性原位分子杂交技术

目的 :探讨效果更加满意的核酸分子杂交技术的方法。方法 :采用原位分子杂交技术结合免疫组化 SP法 ,在人肝癌组织石蜡切片上显示 c- myc和 N- ras基因的 m RNA。结果 :c- myc m RNA和 N- ras m RNA杂交信号呈红色 ,清晰可见于细胞浆内 ,背景浅淡 ,效果满意。结论 :此方法与以往的原位杂交方法相比 ,能明显放大杂交信号 。

转谷氨酰胺酶与肿瘤

转谷氨酰胺酶（Transglutaminase，TGase：EC2．3．2．13）为Ca^2＋依赖的酰基转移酶，催化酰基转移反应，使翻译后的多肽链形成交联蛋白。所形成的交联蛋白具有很高的机械强度，不易发生蛋白质水解的降解过程。在许多组织如皮肤、毛发、伤口和血凝块等中都已发现交联蛋白的蓄积。组织中转谷氨酰胺酶的表达水平和活性高低，可影响到细胞生长、分化和凋亡等生理过程，与一些炎症疾病、慢性变性疾病、传染性疾病以及肿瘤存在着某种病理关系。

加强人才培养,促进医院发展

邓小平同志曾经指出：科学技术是第一生产力，要尊重知识，尊重人才。因此，在当前各行各业竞争激烈的情况下，培养人才成为当务之急，作为一个集医疗和科研为一体的单位，更要创造一个人尽其才，才尽其用的良好环境，给予科技人员一系列倾斜政策，建立激励机制，充分调动...

树鼩肝癌形成过程中p53和Bax的蛋白表达及其二者间的关系

目的:动态研究在树鼩肝癌形成过程中p53和Bax的蛋白表达以及它们之间的关系。方法:利用免疫组织化学S—P法,对实验组35例树鼩肝癌形成过程第30周、60周的肝癌组织及13例同期的空白对照组树鼩肝活检组织,进行p53、Bax蛋白的检测。结果:p53、Bax基因在树鼩HCC形成过程中,它们的表达均呈递增趋势。结论:p53、Bax基因的表达无明显依存关系。动态观察Bax的表达对预测肝癌有一定作用。

广西地区肝细胞癌患者组织中p53蛋白表达的研究

目的 :探索广西肝癌高发区肝细胞癌(HCC)的组织中检测 p53蛋白的表达情况。方法 :用免疫组织化学方法对30例肝细胞癌(HCC)和癌旁组织进行检测。p53蛋白的免疫组化染色一抗用的是兔抗。连续切片染色乙型肝炎表面抗原和核心抗原。结果 :30例肝细胞癌组织中有13例(13/30 ,43.3 %)p53蛋白表达阳性 ;在≤5.0cm的肝细胞癌组织中有25%(1/4)的p53蛋白表达阳性 ;在>10.0cm的肝细胞癌组织中有71.4 %(5/7)的 p53蛋白表达阳性。p53蛋白阳性在中、低分化肝细胞癌中的表达高于在高分化肝细胞癌组织中 ,而且大多数在年轻患者的肝细胞癌组织中。结论 :本组资料表明 ,p53蛋白表达与肿瘤的大小、分级和患者的年龄有着密切的关系。30例中有27例(90.0 %)证实为HBV感染 ,表明p53蛋白表达与性别和HBV感染。

p16和Rb基因在人肝细胞癌中的表达

目的 :分析p16基因和视网膜母细胞瘤基因(Rb)在人肝癌细胞中表达的改变。方法 :用免疫组织化学方法对40例肝细胞癌和癌旁组织进行检测。结果 :肝组织中的 p16蛋白和Rb蛋白的异常表达分别为94.44 %(34/36)和45.71%(16/35)。p16蛋白阴性或弱阳性而Rb呈强阳性者13例(13/34,38.23 %) ,两者的表达呈负相关关系。p16和Rb蛋白均异常者15例(15/34,44.11 %) ,表明Rb蛋白表达的调节除 p16外 ,还有其他途径。二者的异常表达与肝癌的恶性程度无相关关系。结论 :细胞调节因子p16和Rb基因的异常表达 ,均参与肝细胞癌的发生。以

银杏叶提取物(EGb761)阻断AFB1致大鼠肝癌及其机制研究

目的:研究银杏叶提取物(EGb761)对黄曲霉素B1(AFB1)致大鼠肝细胞癌(HCC)发生发展的干预效果及其抗氧化作用。方法:实验大鼠按体质量随机分成3组:A组(AFB1组)、B组(AFB1+EGb761组)和C组(对照组)。分别于实验第14、28、42、55周进行肝活检并于第64周全部处死,观察大鼠肝脏癌前病变(γ-GT灶)、组织病理学及肝组织GSH-Px及MDA的变化。结果:在癌前期,第42及第55周时,B组单个γ-GT阳性灶的面积及灶总面积均显著小于相应时段A组的各项指标(P=0.000);动态观察定期肝脏活检的组织显示B组大鼠诱癌各时期肝脏损害均较A组轻,增生性病变发生亦较迟,HCC诱发率(26.92%)明显低于A组(76%)(P=0.000),对照组无肿瘤发生;B组GSH-Px活力较A组升高,而MDA含量较A组降低(P<0.05)。结论:EGb761能明显抑制AFB1诱发大鼠肝的癌前病变及延迟癌前病变向癌发展,这可能与其提高机体的抗氧化能力有关。

不同浓度绿茶及茶叶渣对黄曲霉霉素B_1致大鼠肝癌作用的影响

在研究癌的化学预防中,寻找拮抗化学致癌物的物质,越来越受到重视。我们曾报道茶叶及不同品种的绿茶对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)致肝癌作用有显著的抑制效果,但在这些研究中,绿茶用量均为5％,为找出绿茶的最低有效剂量,选择了3种不同浓度的绿茶作实验研究,并用茶叶渣作对比实验,现报告如下。

金花茶对二乙基亚硝胺致大鼠肝癌前病变及肝癌细胞株作用的影响

目的:观察不同浓度的金花茶对二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌前病变及对肝癌细胞株BEL-7404及正常人肝细胞株7702的作用。方法:实验动物按随机分组法分为7组,每组13只,分别连续给含有不同受试物的饲料及腹腔注射1剂DEN(150mg/kg.体重)处理,观察各组动物肝组织内γ-GT灶的数量(个/cm2)和大小(mm2/cm2);用RPMI1640培养基体外培养BEL-7404人肝癌细胞株和正常人肝细胞株7702,采用噻唑蓝(MTT)法半数抑制率测定(IC50),观察金花茶浓缩液及茶花浸泡液对肝癌细胞和正常人肝细胞有无抑制作用。结果:除茶叶渣组外,其它各实验组(包括茶花组,不同浓度浓缩液组)的γ-GT阳性灶的总面积、阳性灶的个数均少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法半数抑制率实验显示金花茶茶花、茶叶浸泡液及金花茶浓缩液对肝癌细胞株BEL-7404的细胞具有一定的抑制作用,对正常人肝细胞则无抑制作用。结论:金花茶对DEN诱发大鼠肝癌前病变有抑制作用,呈一定的剂量—效应反应趋势;金花茶对体外培养的BEL-7404人肝癌细胞株的生长繁殖具有抑制作用,可作为肝癌的预防剂。

茶多酚在树肝癌形成中的化学预防作用

目的 探讨茶多酚对黄曲霉素B1(AFB1)和乙型肝炎病毒(HBV)诱发树肝细胞癌作用的影响。方法 成年树分成三组:A组(AFB1+HBV+茶多酚组)、B组(AFB1+HBV组)和C组(空白对照组),实验期间定期抽血检查HBV感染标志和进行剖腹手术取肝组织活检,观察各组肝癌发生率、肝癌出现时间、HBV感染持续时间,并采用免疫组化方法检测肝癌形成过程中p53、bcl- 2、bax、survivin、GSTA1、SOD1、IL -2和SCF等蛋白在各组各时段的表达情况。结果 在实验第90、105、120、135、150、165周各个时段中,A组的肝癌发生率均低于B组;A组首例肝癌出现时间及肝癌平均出现时间均晚于B组;A组HBV感染标志(HBsAg,HBeAg和HBcAb)的平均持续时间短于B组;在诱癌中期(实验第60 周)及肝癌组织内突变型p53、凋亡抑制基因bcl -2和survivin蛋白的表达率均为A组低于B组。但上述差异在统计学上大部分无显著性。结论 茶多酚对黄曲霉毒素B1和HBV诱发树肝癌有一定程度的保护作用;可以促进树体内的HBV感染标志的消除。茶多酚可能是通过促进终致癌物的解毒、抗氧化作用、提高免疫功能、诱导肿瘤细胞凋亡等途径起到预防树肝癌的作用。