响应面法优化诺尔斯链霉菌发酵条件以提高谷氏菌素产量

诺尔斯链霉菌Streptomyces noursei的次级代谢产物丰富,抑菌谱广,在农业上具有潜在的应用前景。作者实验室筛选到一株诺尔斯链霉菌S. noursei NK27,其次级代谢产物对番茄灰霉病的防治效果显著。为了提高NK27次级代谢产物中谷氏菌素的产量,以NK27发酵液中谷氏菌素产量为响应值,采用单因素试验、Plackett-Burman (PB)试验、最陡爬坡试验以及响应面法中的Box-Behnken试验设计,对NK27的发酵条件进行了优化。结果表明,诺尔斯链霉菌种龄、接种量及初始pH值3个因素对发酵效果影响最为显著。优化后的发酵条件为:初始pH值7.6,种龄32.6 h,接种量2.6%,转速220 r/min,发酵时间144 h。与原始发酵条件相比,优化后谷氏菌素含量提高了约3倍。本研究可为诺尔斯链霉菌大规模工业化发酵提供理论依据和技术支撑。

25%溴菌腈·多菌灵可湿性粉剂配方及药效研究

为开发25%溴菌腈·多菌灵可湿性粉剂产品,采用干法粉碎工艺,对配方中的润湿分散剂、填料等组分进行筛选。25%溴菌腈·多菌灵可湿性粉剂最优配方:溴菌腈20.0%、多菌灵5.0%、甲基萘磺酸钠甲醛缩合物分散剂(DMF-6)4.0%、改性萘磺酸甲醛缩合物和阴离子润湿剂混合物(DMF-4)4.0%、白炭黑5.0%、柠檬酸0.15%、消泡剂Defoam X 0.5%,煅烧高岭土ZT补足至100%。田间试验结果显示:所制25%溴菌腈·多菌灵可湿性粉剂对柑橘炭疽病的防治效果较好,在有效成分用量为625和833 mg/kg时,对叶片炭疽病的防效分别为82.25%和85.57%,对果实炭疽病的防效分别为76.56%和81.09%。

高校党建在大学生思想政治教育工作中的实效性

随着国际竞争趋势的不断加大,各国之间的竞争归根到底就是人才的竞争。高校要自觉承担起人才培养的时代重任,为全面推进中华民族的伟大复兴提供人才保障。高校需要不断加强和推进党建工作在大学生思想政治教育工作的有效开展,进而提升教育工作的实效。本文基于高校党建在大学生思想政治教育工作中存在的问题,提出了实效性的改进策略,为高校培养符合社会发展需要的新时代人才贡献自己的一份力量。

信息技术应用创新标准化探索

当前,我国信息技术应用创新产业发展迅速,已经成为新形势下经济结构调整和经济发展的新动能。本文结合信息技术应用创新的背景和发展现状,分析了现有的标准体系情况。结合团体标准的特点,给出了信息技术应用创新领域的标准定位和规划,以及我国主要社会团体在信息技术应用创新领域的标准工作情况,为后续团体标准的开展提供思路,供行业相关人员参考。

咪鲜胺、氟环唑及其混配对水稻纹枯病室内毒力及田间防效

为筛选出对水稻纹枯病高效的新配方药剂及剂量,以咪鲜胺和氟环唑混配进行室内抑菌活性、持效期和田间药效测定。采用孙云沛法进行室内联合毒力测定,结果表明,供试的5种混配组合对水稻纹枯病菌的联合毒力均表现为增效,综合联合毒力、成本和持效期等因素,选择30%咪鲜胺·氟环唑微乳剂(2∶1)为最佳田间应用配比。田间药效试验亦表明,30%咪鲜胺·氟环唑微乳剂(20%+10%)158~180g/hm2的用量对水稻纹枯病有较好的防治效果。

CRF单克隆抗体和多克隆抗体制备及其在睡眠剥夺模型大鼠脑内的变化

目的:制备并鉴定促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)的单克隆抗体(mAb)和多克隆抗体(pAb),并研究其在睡眠剥夺模型大鼠脑内的变化。方法:用CRF分别与牛血清白蛋白(BSA)和牛甲状腺球蛋白(BTG)交联,制成免疫原和检测用的包被抗原。将BSACRF分别免疫新西兰大白兔和雌性BALB/c小鼠,制备其mAb和pAb,经ELISA和免疫细胞化学染色等方法进行鉴定,并用所获抗体观察CRF在正常成年大鼠睡眠剥夺48h后脑内的变化。结果:所获得的CRFpAb和9株mAb具有较高的效价、特异性及亲和力。其中,pAb和2株mAb(1D10,2F4)可用于免疫组织化学染色。睡眠剥夺48h后下丘脑室旁核、杏仁核中央亚核、终纹状核卵圆亚核等核团高表达CRF样阳性产物,而对照组相关核团内则极少或未出现。结论:①成功地获得可用于免疫组化染色的CRFmAb和pAb。②提示CRF在中枢神经系统对睡眠剥夺造成的应激反应的调节过程中具有重要的意义。下丘脑室旁核、杏仁中央核和终纹床核是脑内相关调节环路的一部分。

GAP-43原核表达载体的构建、表达及抗GAP-43单克隆抗体的制备

目的 :原核表达神经生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3) ,并制备抗GAP 4 3的单克隆抗体 (mAb)。方法 :从含有GAP 4 3cDNA的质粒中 ,用PCR扩增GAP 4 3cDNA的全长编码序列 ,克隆入表达载体pGEX 4T 1中 ,构建GAP 4 3的高表达工程菌 ,并以IPTG诱导表达目的蛋白。通过亲和层析法纯化表达的GST GAP 4 3融合蛋白 ,并以此为抗原制备mAb。结果 :酶切鉴定证明 ,获得含有目的基因片段的重组质粒。表达的GST GAP 4 3融合蛋白以可溶性的形式存在。ELISA检测表明 ,获得的抗GAP 4 3mAb效价为 1∶10 8,其IgG的亚类为IgG2a,亚型为κ型。用Westernblot检测大鼠脑匀浆蛋白 ,在相对分子质量(Mr)为 5 0 0 0 0处有一条特异性带。用此mAb进行荧光免疫法检测表明 ,在致敏豚鼠的肺切片中 ,有GAP 4 3阳性的神经纤维。结论 :所获抗GAP 4 3mAb的特异性强、效价高 ,对进一步研究GAP 4 3在神经系统中的作用提供了有用的试剂。

浅谈高职教育工学结合、能力本位的课程开发

课程建设与改革是提高教学质量的核心,目前高职教育的课程改革与开发如火如荼,已成为当前高职教育教学改革的热点、焦点、难点和重点。从课程开发的必要性、相关概念及内涵以及开发中注意的问题几个方面探讨了工学结合、能力本位的课程开发问题。

当前职业教育发展中存在的若干问题及对策

当前,我国职业教育迎来了春天,但由于历史和现实多方面的原因,职业教育仍面临诸多问题。我们应该紧密结合职业教育“十一五”规划,突破瓶颈。要对当前职业教育发展的基本情况有清醒的认识,要对当前职业教育的主要问题及根源有明确的了解,要对职业教育的出路有深入的思考。

加强区域战略性新兴产业人才队伍建设的思考——以湖南省为例

战略性新兴产业是经济绿色转型的关键,其关键是科技进步和人才支撑。要实现经济发展的预期目标,湖南省必须通过实施区域人才开发战略,包括进行人才培养,制定人才吸引政策和保障措施、营造内部人才发展空间等,建设一支强有力的人才队伍。

校企合作开发课程中存在的问题及对策

校企合作开发课程是高职教育教学改革的必然选择,但存在着政策上缺乏支持、个体上缺乏主动意识、质量上难以达到预期目标等问题。要促进校企合作开发课程,需从高职院校、企业、课程专家和政府四个方面采取相应措施。

高等职业教育课程教学改革问题探讨

教学改革是高等职业教育课程改革系统工程中的重要组成部分,其中,尤为重要的是要让教师拥有科学的教学理念,创新教学模式,掌握有效的教学策略和技术,积极实施课程教学改革,从而实现高素质技能型人才的培养目标。

对“转型期”高职院校内部管理运行机制的思考

当前,我国高职教育发展处于市场化和大众化的背景之下,高职院校内部管理运行机制发生了根本性变化。高职院校必须实行以市场为导向的现代管理体制,构建科学的内部管理运行机制。

湖南省高职教育发展现状及生源预测

在过去的10多年里,我国高职教育迅猛发展,独立设置院校数从1998年的431所增加到2008年的1184所,占普通高校总数的61%;2008年高职教育招生数达到311万人,比1998年增长了6倍,在校生近900万人,对高等教育进入大众化历史阶段发挥了重要的基础性作用。

浅谈高职院校决策机制建立的必要性和原则

随着高职教育的快速发展,加强高职院校内部管理,尤其是决策机制的建立,对高职院校生存与发展起着极为关键的作用。分析高职院校决策机制建立的必要性及必须遵循的原则,来促进决策活动沿着正确的途径进行,从而形成科学的决策机制。

湖南省高职院校学生“入口”问题及其对策思考

高职生源的减少是即将摆在各高职院校面前不可回避的问题,目前已经有一些高职院校在学生的"入口"上出现了难题,文章针对该问题以湖南省为例提出应对措施,旨在促进高职教育的健康稳定发展。

亚洲玉米螟越冬幼虫主要寄生性天敌及病原菌致死率的考察

对我国主要玉米产区亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis越冬代幼虫天敌和病原菌的寄生情况进行了调查。通过2年秋季采集14个省,20个点共计14984头玉米螟越冬幼虫,在室内(26±1)℃,RH(70%±10%),光周期16L:8D的环境中饲养。明确了主要病原菌苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis和白僵菌Beauveria bassiana及主要寄生性天敌昆虫腰带长体茧蜂Macrocentrus cingulum、玉米螟厉寄蝇Lydella grisescens和大螟钝唇姬蜂Eriborus terebranus在各地的寄生率。各地越冬幼虫平均感染苏云金芽孢杆菌死亡率为36.2%,感染白僵菌死亡率为14.4%。苏云金芽孢杆菌和白僵菌的感染率在东北春玉米区年度间有波动,而在夏玉米及其它玉米产区,苏云金芽孢杆菌的感染率显著高于白僵菌。腰带长体茧蜂和玉米螟厉寄蝇在各地普遍分布,为优势寄生性天敌昆虫,寄生致死率分别为7.0%和5.1%。大螟钝唇姬蜂仅在北方春玉米区的海伦、沈阳、应县和夏玉米区的保定等少数地区发生,且寄生率<1.0%。与天敌昆虫寄生死亡率相比,感染病原菌的死亡率显著较高,但年度间波动较大。由此可知,苏云金芽孢杆菌和白僵菌是玉米主产区亚洲玉米螟越冬幼虫的主要致死因子,且具有波动性;腰带长体茧蜂和玉米螟厉寄蝇是相对稳定的致死因子,大螟钝唇姬蜂具有区域特异性。

大鼠侧脑室置管方法的改良

国际上公认的实验动物脑室内给药方法是先在侧脑室内埋置固定于颅顶的套管,5～10 d后待动物从埋管过程造成的应激反应恢复后再经内管给药,这可以去除插管过程造成的应激对实验结果的干扰.但目前此种方法所用的管道系统多依赖进口,价格昂贵,且为一次性使用,其代价是很多国内实验室难以承受的.故国内神经生物学实验中动物脑室内给药的方法多为在颅骨钻孔后以微量注射器或玻璃微电极直接插入脑室内即刻给药,这种方法显然是有缺陷的.为克服这一问题,我们研究出了重复使用进口管道系统的方法,自行设计了置管时将管道固定在立体定向仪上的装置以取代国外公司昂贵的相关产品并可适用于国产定向仪.实验结果证实了这种方法是可行的.本文对这一实验方法的改造进行了详细的描述.

IgG刺激诱发的小胶质细胞Toll样受体4表达及细胞因子分泌

目的:了解在体外培养条件下免疫球蛋白G(IgG)刺激对小胶质细胞表达Toll样受体4(TLR4)和分泌细胞因子的作用。方法:用不同浓度的IgG(2mg/L、20mg/L、200mg/L)及脂多糖(LPS)(10mg/L)刺激原代培养的大鼠小胶质细胞,24h后以免疫荧光染色观察TLR4的表达,ELISA法检测培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的含量。结果:IgG直接作用于体外培养的小胶质细胞后,以剂量依赖的方式引起TLR4的表达和TNF-α的分泌,但未检测到IFN-γ含量的变化。作为阳性对照的LPS引起了小胶质细胞TLR4表达,并诱导了TNF-α及少量IFN-γ的分泌。结论:同种IgG刺激可使体外培养的小胶质细胞大量表达TLR4,可能通过MyD88依赖途径导致炎性细胞因子分泌。结果提示至少在中枢神经系统的固有免疫反应中,TLR4可能发挥识别病原体之外的蛋白分子,例如IgG的作用。

浅层巩膜静脉烧烙法诱发大鼠慢性高眼压的研究

目的 :证明大鼠基础眼压的昼夜节律并建立稳定的大鼠慢性高眼压模型 .方法 :健康雌性SD大鼠 4 0只 ,建立模型前早晚各测眼压一次 ,连续测量 1wk ,之后将 4 0只大鼠完全随机分为对照组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、模型Ⅲ组 ,每组 1 0只 .对照组只打开球结膜 ,巩膜静脉不做处理 ;模型Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅲ组分别烧烙 1 ,2 ,3条浅层巩膜静脉 ,术后即刻、术后 30min ,1h ,1 2h ,1d ,1wk ,4wk ,8wk分别测量各组眼压 ,并于术后观察术眼的局部表现 .大鼠眼压用TONO PEN测量 .结果 :大鼠白天正常眼压界于 1 .0 6kPa～ 1 .99kPa之间 ,平均眼压值为 (1 .4 6± 0 .2 5 )kPa ;夜间正常眼压界于 1 .73kPa～ 2 .6 6kPa之间 ,平均眼压值为 (1 .86± 0 .2 3)kPa .大鼠夜间平均眼压高于白天 (P >0 .0 1 ) .术后 8wk对照组平均眼压值为 (1 .6 8± 0 .2 5 )kPa ,模型Ⅰ组平均眼压值为 (1 .6 5±0 .2 6 )kPa ,模型Ⅱ组平均眼压值为 (4 .0 4± 0 .2 1 )kPa,模型Ⅲ组平均眼压值为 (4 .1 2± 0 .1 9)kPa .术后 8wk各组平均眼压值 ,对照组与模型Ⅰ组间以及模型Ⅱ组与模型Ⅲ组间平均眼压值没有差别 (P >0 .0 5 ) ,前两组与后两组分别进行比较 ,平均眼压值差别显著 (P >0 .0 1 ) .模型Ⅲ组术后有 3只眼出现角膜大泡、热伤性白内障等并发症 .结论 :