丝素蛋白在组织工程中的应用

目的:总结丝素蛋白在生物材料和组织工程领域的应用,分析和展望丝素蛋白材料在医学生物领域的应用前景。资料来源:应用计算机检索PUBMED 1993-01/2007-01关于丝素蛋白和组织工程的文章。检索词为“silk,tissue engineering”,并限定文章的语言种类为English。同时利用计算机检索中国期刊全文数据库1994-01/2007-01的相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词为“丝素蛋白、组织工程”。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①丝素蛋白的性质、在组织工程中的应用。②骨髓间充质干细胞与丝素蛋白复合的相关性研究。③丝素蛋白的改性、修饰在生物学领域的应用。排除标准:重复性研究。资料提炼:共收集到符合上述要求的文献96篇,排除45篇重复性研究。48篇符合纳入标准:其中13篇关于丝素蛋白的结构和性质的,7篇关于丝素蛋白表面修饰的,篇关于丝素蛋白和组织工程的。28资料综合:实验证明丝素蛋白可以多种形式(薄膜、膜、网状结构、海绵状等)在体外支持干细胞的黏附、增殖和分化,体内促进组织的修复,尤其是干细胞组织工程中三维的丝素蛋白支架扩大了丝素作为生物材料的应用,成为最有前景的生物材料之一。结论:丝素蛋白作为一种新的生物材料应用越来越受到关注。而且,通过多种方法改进、表面修饰等技术控制丝素蛋白的分子结构和形态,使得丝素蛋白在生物材料和组织工程领域的应用变得更为广泛。

EB病毒感染临床应用研究进展

EB病毒感染是儿科比较常见的病毒感染性疾病，感染时其症状轻重不一，可累及全身多个系统，引发多种疾病，主要有传染性单核细胞增多症（IM）、慢性活动性EB病毒感染（CAE—BV）和噬血淋巴组织细胞增生症（HLH）。很多时候不能早期诊断，给临床治疗带来困难，本文就EB病毒感染相关疾病及临床检测研究进展综述如下。

诱导分化过程中不同融合状态大鼠骨髓间充质干细胞成骨的差异

背景:诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的方案已基本成熟,但是诱导过程中影响分化效果的因素仍处于探索阶段。目的:观察诱导时机的选择对大鼠骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的影响。设计、时间及地点:以细胞为对象的观察实验,于2006-08/2007-01在苏州大学江苏省干细胞重点实验室完成,省级重点实验室完成。材料:骨髓间充质干细胞来源于SD大鼠,雌雄不限,体质量150～200g。方法:采用Percoll淋巴细胞分离液分离培养大鼠骨髓间充质干细胞。将第3代大鼠骨髓间充质干细胞以5×107L-1密度分组培养,诱导组分别于接种当时、细胞达50%～60%融合时、细胞达85%～95%融合时加入含地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C的成骨诱导培养基诱导。非诱导组采用普通培养基培养。主要观察指标:诱导后7,14,21,28d行钙钴染色、Von-Kossa染色、碱性磷酸酶活性检测成骨细胞能力。定期在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化及生长状况。结果:经钙钴染色后,诱导组大部分染色的细胞呈阳性反应,胞浆中可见浅棕色至棕黑色的细胞颗粒,大多数多角形细胞呈阳性,如铺路卵石样排列,随着时间的延长,可见片状强阳性细胞,以细胞达85%～95%融合时诱导培养组数量最多,结节体积最大。非诱导组未见片状强阳性细胞。Von-Kossa染色后可见深棕色致密结节。以细胞达85%～95%融合时诱导培养组形成结节较早,同期相比数量较其他组多。细胞内碱性磷酸酶活性检测表明经成骨诱导剂诱导后与同期非诱导组相比细胞内碱性磷酸酶活性明显提高,表现细胞成骨分化特点。结论:初始接种密度相同的情况下,细胞间相互接触程度越高,成骨能力越强。

建筑工程新型绿色施工技术应用及节能环保方法探究

现在,国家政府部门以及建筑工程企业都非常重视新型绿色施工技术以及节能环保方法,原因是新型绿色施工技术以及节能环保方法的应用,有效减少了对资源的浪费和对环境的污染。文章对建筑工程新型绿色施工技术和节能环保方法中存在的问题、解决措施以及新型绿色施工技术、节能环保方法在建筑工程中的应用进行阐述,以供参考。

人骨髓MSC对PHA活化T细胞周期以及表型和细胞因子分泌的影响

目的研究人骨髓间充质干细胞(MSC)对T细胞周期和活化的影响,探讨MSC对T细胞增殖抑制的作用机制。方法Ficoll密度梯度离心法分离纯化人骨髓MSC,体外扩增培养3代后用于实验。应用流式细胞术分析MSC对PHA作用下T细胞周期和早期表型CD25、CD69表达的影响,ELISA法检测细胞因子水平。结果人骨髓MSC体外可使PHA刺激下的T细胞滞留于细胞周期的G0/G1期,下调活化T细胞早期表型CD25、CD69的表达,抑制IL-2、IFN-r的分泌。结论人骨髓MSC体外可通过对T细胞周期的影响抑制其活化和增殖。

再生柞蚕丝素蛋白对人骨髓间充质干细胞体外扩增的支持作用

大量的研究表明家蚕丝素蛋白具有良好的生物相容性。而对于柞蚕丝素蛋白在医用生物领域的研究报道在国内外尚较少。本研究选择再生柞蚕丝素蛋白为研究对象,观察了人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)在再生柞蚕丝素膜上的粘附、生长及表面抗原的变化。结果在1h观察再生柞蚕丝素对hBMSCs的粘附力几乎与胶原相同,明显优于家蚕丝素和聚苯乙烯培养板。MTT法检测结果显示在第4d hBMSCs在再生柞蚕丝素膜上的增殖明显高于其他各组。电镜观察结果显示hBMSCs在再生柞蚕丝素膜上能够很好的粘附、生长,细胞间能相互连接形成片状结构。流式细胞仪检测再生柞蚕丝素蛋白对hBMSCs表面抗原的表达亦无明显影响。本研究结果显示再生柞蚕丝素蛋白体外支持hBMSCs的粘附、生长,具有良好的细胞相容性。

新型生物材料在骨组织工程中的应用前景

组织工程学是一门多学科交叉的边缘学科,基本原理是将细胞在体外培养扩增后,吸附于预先设计的生物学支架上,构成细胞-支架复合体,植入机体相应的病损部位,随着细胞长入,支架材料逐渐降解吸收,最终形成具有正常生理结构与功能的新生组织,从而达到器官再生或修复的目的。

痰培养标本采集处理方法改进对细菌学检验质量的效果影响

目的 对当前的痰培养标本采集处理方法进行改进,分析改进前后对细菌学检验质量结果的影响,有效提高我院的痰培养标本采集处理水平与细菌学检验质量。方法 本研究选择2021年1-12月的2755例痰培养送检阳性患者作为对照组,采用自然咳痰法采集标本,选择2022年1-12月的3178例痰培养送检阳性患者作为观察组,均需采用改进痰培养方法采集标本,分析比较两组患者的细菌学检验质量情况。结果 比较发现,应用改进后痰培养标本采集处理方法的观察组患者临床标本合格率、标本可用率相对较高,与对照组患者形成显著的统计学差异(P<0.05)。与此同时,观察组患者的细菌学检验质量水平较高,阳性检出率与实际临床诊断一致性较高,与对照组患者有统计学差异(P<0.05)。结论 在临床痰培养标本采集处理过程中,应用改进后的采集与处理方法可有效促进痰标本细菌学检验质量的提高,有效推动临床检验效果准确性的提升,可为患者的后续诊断与治疗提供依据,具有确切的临床推广价值。

干细胞在脂肪组织工程中的应用

目的:脂肪组织再生的关键因素在于种子细胞,深入认识脂肪组织工程的现状,分析和展望干细胞在脂肪组织工程中的作用。资料来源:应用计算机检索PUBMED 1996-01/2006-06的相关文章,检索词为"stem cells,adipose tissue engineering",并限定文章语言种类为English。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与干细胞在脂肪组织工程中的应用相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到209相关文献,98文献符合纳入标准,排除的111篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的98篇文献中,分别涉及脂肪组织中的细胞组成、脂肪组织工程的现状、干细胞的来源以及在脂肪组织工程中的应用等内容。资料综合:软组织挫伤、肿瘤及先天畸形等都可能造成大量脂肪组织的缺失从而导致软组织缺损,种子细胞的选择、支架材料、细胞生存环境、将细胞重新植入损伤部位的方法是重建缺损软组织的重要环节。迄今为止,依然没有一种理想的在任何情况下都适用的填充材料,而利用自体脂肪组织移植来治疗软组织缺损的方法尚不成熟。脂肪组织再生的关键因素就是种子细胞,干细胞因其自我复制、自我更新、多能分化的特点成为目前较理想的种子细胞。结论:前脂细胞和脂细胞移植是软组织重建的可行方法,而干细胞诱导生成脂肪组织应用于软组织重建虽然面临伦理和科技上的障碍,但由于它蕴含着巨大的潜力,有望成为推动脂肪组织工程发展的革命性力量。

时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎病毒血清标志物研究

乙型肝炎病毒（HBV）是严重危害人类健康的传染病，我国是乙型肝炎高发区，HBV血清标志物的检测对乙型肝炎的诊断、疗效观察及预后判断具有非常重要的意义。

大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞诱导分化及神经蛋白的动态表达

背景:现阶段骨髓间充质干细胞定向诱导分化为神经元样细胞的方法并不统一。目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞体外向神经样细胞诱导分化的条件,及其定向分化过程中神经蛋白的动态表达。设计、时间及地点:细胞形态学观察及蛋白分子水平检测,于2006-09/2007-01在苏州大学生命科学学院完成。材料:清洁级SD大鼠2只。胎牛血清为杭州四季青产品,成纤维生长因子、丁羟基茴香醚为Sigma公司产品,二甲基亚砜为Amresco产品。方法:Percoll法体外分离培养、扩增纯化大鼠骨髓间充质干细胞,调整细胞密度为5×107L-1。设立2组,诱导组用含10%胎牛血清和10μg/L成纤维生长因子的L-DMEM培养基预诱导24h后,再以含2%二甲基亚砜和200μmol/L丁羟基茴香醚的L-DMEM无血清培养基诱导1,3,5h。对照组始终用含10%胎牛血清的L-DMEM进行培养。主要观察指标:细胞形态学变化,免疫荧光染色鉴定神经细胞表型。结果:预诱导24h,胞体由原来的长梭形变成多角形或不规则形,伸出多个短棒状突起,可见2～3个核仁,细胞间漩涡状生长趋势消失,排列无规律;诱导1～3h,细胞逐渐变圆,胞质收缩明显,折光性增强,双级或多极的突起互相连接呈网状;诱导5h,突起出现一、二级分支。诱导1h后部分细胞表达神经前体细胞表面抗原巢蛋白;3h后巢蛋白达高峰,同时表达成熟神经元标志物神经元特异性烯醇化酶和微管蛋白;5h后巢蛋白表达下降,神经元特异性烯醇化酶和微管蛋白达高峰。对照组细胞形态无明显变化,巢蛋白表达为阴性。结论:在添加化学诱导剂之前先使用成纤维生长因子进行预诱导,能促进骨髓间充质干细胞向神经前体细胞和神经元转化,且在诱导分化过程中神经蛋白分子的表达顺序与神经细胞发育过程一致。

浅谈水泥稳定砂砾基层施工与质量控制

目前我国经济高速发展，为了适应新形势的需求，针对交通量大、车辆吨位大的问题，公路建设部门积极采取措施，提高公路等级，推广使用高强度高稳定结构。水泥稳定路面基层得到了很快的普及。

标本类型、储存时间和温度对血钾测定的影响评价

目的 评价标本类型、储存时间和温度对血钾检测的影响.方法 选取医院2017年5月至2017年6月健康体检人员12例,空腹、安静状态下采血.将血液标本分别采集于含有分离胶和肝素钠抗凝剂的样本管中,离心分离血清和血浆后分别置于4℃、-20℃、-70℃冰箱储存,在1 h、3 h、6 h、24 h、48 h、72 h、1周、2周共8个时间点各重复测定血钾3次.分析不同样本容器中血钾含量随时间和温度的变化趋势.结果 两种样本管血钾测定结果在温度不变,测定值随时间的延长呈缓慢下降趋势,肝素钠管下降趋势明显,差异有统计学意义（4℃F值17.42,P〈0.05）;血浆中血钾在4℃冰箱中1 h内偏倚〈6％可接受,-20℃、-70℃保存条件下可延长至3 h.4℃、-20℃、-70℃条件下血清72 h内血清钾偏倚〈6％可接受;两种标本类型血钾检测的不精密度（变异系数）之间差异未见统计学意义（P〉0.05）.结论 肝素钠管和分离胶管均可用于检测血钾水平,血清管血钾稳定性优于肝素钠管,肝素钠管用于急诊检测优于分离胶管.各实验室应评估本实验室血钾检测样本类型及储存条件.

标本类型、储存时间和温度对血氨测定的影响评价

目的评价不同的标本类型、储存时间和温度与血氨浓度之间的关系。方法将山西省人民医院2017年5-6月健康体检人群12名血液标本分别采集于含有分离胶、EDTA-K2抗凝剂、肝素钠抗凝剂的样本管中,离心分离血清或血浆,分别置于4℃、-20℃、-70℃冰箱储存,在1h、3h、6h、24h、48h、72h、1周、2周时间点各重复测定血氨含量3次。分析不同样本容器中血氨含量随时间和温度的变化趋势。结果血氨测定结果随时间延长,温度的升高、测量值逐渐升高。分离胶管4℃条件下血氨测量值较-20℃、-70℃条件下升高显著,差异有统计学意义(4℃比-20℃,F=7.18,P=0.006;4℃比-70℃,F=8.34,P=0.0202;P<0.05);4℃、-20℃、-70℃储存条件下分离胶管的血氨测定值均高于EDTA-K2抗凝管及肝素钠抗凝管,差异有统计学意义(4℃分离胶管比EDTA-K2/分离胶管比肝素钠管,F=203.99/136.65;-20℃,F=14.51/121.83;-70℃,F=48.81/60.05;P<0.05)。血清中血氨在4℃冰箱中1h内偏倚4.59μmol/L,<5μmol/L可接受,血浆中可延长至6h。-20℃及-70℃冷冻条件下血清血氨稳定时间可延长至6h,血浆中延长至48h;不同样本类型0测量点结果变异系数分析显示EDTA-K2管变异系数1.59%,优于肝素钠管5.38%和分离胶管2.36%。结论EDTA-K2抗凝管分离血浆检测血氨的精密度、正确度及稳定性优于分离胶管和肝素管;各实验室应评估本实验室血氨检测得样本类型及储存条件。

血清HE4及CA 125在慢性肾脏疾病中的诊断价值

目的 探讨不同分期慢性肾脏疾病（CKD）患者血清人附睾蛋白4（HE4）及糖类抗原125（CA 125）水平的变化及诊断价值.方法 选取2015年2月至2016年8月山西省人民医院收治的158例CKD患者作为CKD组,选取同期150例健康体检者作为对照组.采用电化学发光法检测两组样本的血清HE4及CA 125,采用紫外酶法检测血清肌酐（Scr）,采用免疫比浊法测定血清半胱氨酸酶抑制剂C（Cys-C）,采用尿素酶-谷氨酸脱氢酶法检测血清尿素氮（BUN）,利用CKD-EPI肌酐公式计算肾小球滤过率（GFR）;运用Pearson相关分析法,分析CKD患者血清HE4及CA 125与GFR、Scr、BUN、Cys-C的相关性;绘制受试者工作特征曲线（ROC）,比较血清HE4、CA 125、Scr、BUN及Cys-C对CKD的诊断效果.结果 CKD组血清HE4、Cys-C水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,且随着CKD分期的升高而升高.CKD1~CKD4期患者血清CA 125水平与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,而CKD5期血清CA 125水平与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.CKD1~CKD2期血清Scr和BUN水平与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,而CKD3~CKD5期与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.CKD患者血清HE4水平与GFR呈显著负相关（r=-0.795,P〈0.05）,与Scr、BUN和Cys-C呈正相关（r=0.483、0.503、0.745,P〈0.05）,与血清CA 125水平无明显相关性（P〉0.05）;血清CA 125与GFR、Scr、BUN、Cys-C均无相关性（P〉0.05）.ROC曲线分析显示,血清HE4对CKD的诊断性效能较佳（AUC=0.957）,再为Cys-c（AUC=0.840）,依次为Scr、BUN（AUC=0.786、0.636）,CA 125（AUC=0.534）对CKD不具备诊断价值.结论 血清HE4对CKD有一定的诊断价值,且浓度水平随着CKD病情的加重而显著升高,HE4在一定程度上能够预测CKD的发生发展.