四年制检验专业培养模式改革与实践

根据(高教〔2012〕9号)精神,检验专业由五年制改为四年制,原有的培养模式,已经不适合现代检验医学发展的需要。本文通过对检验医学培养模式的现状分析,促使高校进行课程体系、培养方向、教学模式等方面的改革,以提高教学质量、学生的综合素质以及学生的实践操作能力。

医学检验专业学生考研与实习矛盾解决方法的探讨

随着就业压力的增加,越来越多的医学检验专业本科学生选择考研,而考研和实习是同一个学期进行的,认真实习就没有时间复习考研,出现了考研与实习两难全的矛盾。本文就矛盾出现的原因、目前的现状、解决的方法等方面进行进行了探讨。

胃癌患者血清炎性因子水平检测的临床意义

目的观察胃癌患者血清炎性因子表达水平,并探讨其临床意义。方法通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫比浊法检测108例胃癌患者血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,并与85例胃良性病变患者和120例健康体检者对应指标进行比较。结果胃癌组患者HMGB1、CRP、IL-6、IL-8和TNF-α表达水平明显高于胃良性病变组和健康对照组(P<0.05,P<0.01)。胃癌组患者血清炎性因子水平与肿瘤淋巴结转移分期密切相关,随着胃癌病情加重,HMGB1、CRP、IL-6、IL-8和TNF-α水平逐渐升高,Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者各炎性因子水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05,P<0.01)。结论血清炎性因子与胃癌的发生发展密切相关,可作为反映胃癌进展的标志物。

吉西他滨对人非小细胞肺癌HCC827活性和凋亡的影响

目的：研究吉西他滨对人非小细胞肺癌HCC827细胞活性以及凋亡的影响,以及与Bcl-2表达的关系。方法：采用cell counting kit-8法、细胞核Hochest33258染色法、流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法等多种方法,体外研究吉西他滨对人非小细胞肺癌HCC827的活性、凋亡和细胞周期的影响;采用Western blot法,观察药物作用后细胞中Bcl-2蛋白表达的变化。结果：吉西他滨（0.1～1 000 ng/ml）对人非小细胞肺癌HCC827活性具有抑制作用,并有促凋亡效应。此外,可以将细胞阻滞在S期。在吉西他滨诱导的细胞凋亡过程中,凋亡因子Bcl-2蛋白的表达下调。结论：吉西他滨可以抑制人非小细胞肺癌HCC827细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,S期周期阻滞,其诱导的凋亡可能是其杀死肿瘤细胞的主要机制之一,此外,凋亡与相关基因Bcl-2蛋白的表达具有一定关系。

MBL调节白假丝酵母菌相态转化的作用及机制的初步分析

目的：探讨甘露聚糖结合凝集素（Mannan-binding lectin,MBL）对白假丝酵母菌（Candida albicans,C.albicans）相态转化的调节作用及机制。方法：以人MBL处理C.albicans 2、4、8 h,37℃200 r/min震荡培养,倒置相差显微镜下观察C.albicans的菌丝形成情况;FACS分析MBL与C.albicans的结合情况;RT-PCR分析C.albicans相态转化调控基因HWP1、DDR48的表达。结果：倒置相差显微镜观察发现MBL在早期（2~4 h）能够抑制C.albicans酵母相（Yeast form,Y）向菌丝相（Hyphal form,H）转化;FACS分析表明MBL能够以Ca2＋浓度依赖关系与C.albicans细胞结合;RT-PCR结果表明MBL能够减少C.albicans相态转化调控基因HWP1的表达,而其对DDR48表达的影响尚无规律可循。结论：MBL能够通过调控HWP1的表达抑制C.albicans酵母相向菌丝相转化。

长链非编码RNA HOTAIR通过调控PIK3R3促进肝癌HepG2细胞的转移和侵袭

目的:探讨长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)对肝癌Hep G2细胞转移和侵袭的影响。方法:运用免疫组化技术检测磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基3(phosphoinositide-3-kinase regulatory subunit 3,PIK3R3)在正常肝脏组织和肝癌组织的表达;运用q PCR和Western blot检测慢病毒LV3-sh HOTAIR和LV3-sh PIK3R3对HOTAIR和PIK3R3基因的沉默效率;Transwell侵袭实验检测HOTAIR和PIK3R3的表达对肝癌细胞Hep G2侵袭能力的影响;划痕实验检测HOTAIR和PIK3R3的表达对肝癌细胞Hep G2迁移能力的影响;q PCR检测沉默HOTAIR和PIK3R3后miR-214的表达;q PCR检测转染miR-214 mimics和miR-214 inhibitor后HOTAIR和PIK3R3的表达;双萤光素酶报告基因系统检测miR-214对HOTAIR和PIK3R3转录活性的影响。结果:和正常肝组织比较,PIK3R3在肝癌组织中的表达明显增加;沉默HOTAIR和PIK3R3基因后,肝癌细胞株Hep G2的侵袭和转移能力明显降低;沉默HOTAIR和PIK3R3基因后,miR-214表达上调;转染miR-214 mimics后,HOTAIR和PIK3R3的表达降低;转染miR-214 inhibitor后,HOTAIR和PIK3R3的表达上调;双萤光素酶报告基因系统检测结果显示miR-214可以直接调控HOTAIR和PIK3R3的转录活性。结论:HOTAIR可以通过miR-214调控PIK3R3的表达。

改革实验教学方式——提高临床微生物学与检验的教学质量

医学检验在临床上可以帮助医生对疾病做出准确的诊断,为快速制定准确的治疗方案提供可靠依据,因此医学检验已经成为现代医学不可或缺的一部分。而临床微生物学与检验作为医学检验的一个专业学科,更是由于这几年与微生物相关的一些疾病的流行变得更加重要。作为一门实践性和应用性很强的课程,临床微生物学与检验实验课程的教学质量直接影响到学生今后的临床工作,所以应该受到足够的重视。结合参加工作两年来的实验室工作体验及临床微生物学与检验的实验课代课经历,感觉实验教学还有提高的空间。传统的教学内容方法存在一定的局限性,传统考核方式很难全面评价学生的学习效果和综合素养。为提高临床微生物学与检验的教学质量,改革实验教学方式已迫在眉睫。

人TLR4胞外段的克隆、表达及功能活性分析

目的:获得高纯度、高活性的人TLR4胞外段蛋白。方法:采用PCR方法从含人TLR4 cDNA的质粒pCDNA3-TLR4中扩增人TLR4胞外段基因片段,将其插入载体pET32a并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白。SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的相对分子质量和抗原性,ELISA和FCM鉴定其功能活性。结果:获得1 911 bp的人TLR4胞外段基因片段,构建成重组表达载体pET32a-TLR4并在大肠杆菌中表达。TLR4-Trx融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的12%,其纯度较高。ELISA和FCM检测显示,TLR4-TrX融合蛋白不仅与配体LPS结合,还能竞争性抑制LPS与THP1细胞结合。结论:所获TLR4-Trx融合蛋白纯度高,功能活性好,为进一步研究TLR相关的免疫调节机制提供物质基础。

医学检验专业授课教师对后进生转化的有效方法探讨

怎样促进后进生转化是教学过程中普遍存在的问题。在医学院校,负责检验专业学生工作的主要是辅导员,但笔者认为授课教师可通过适当改变教学方法、以身示范、给予学生充分的自信、提升教师的人格魅力等来有效促进后进生的转化。本文对以上内容进行了简要的探讨和阐述。

mTORC1信号促进前成骨细胞MC3T3-E1的分化成熟

目的:研究mTORC1信号对前成骨细胞MC3T3-E1向成骨细胞分化成熟的调控作用。方法:通过向MC3T3-E1转染pcDNA3.1-Raptor,对mTORC1信号相关蛋白Raptor进行过表达。向MC3T3-E1转染Raptor siRNA,对mTORC1信号蛋白Raptor进行基因沉默。通过Real-time PCR方法测定Raptor的基因表达,通过蛋白免疫印迹法测定Raptor蛋白水平,并通过茜素红染色检测成骨矿化情况,以测定成骨分化程度。通过Real-time PCR检测成骨分化指标的基因表达。结果:与对照组相比,Raptor过表达组的Raptor mRNA和蛋白水平明显增加;茜素红染色结果显示Raptor过表达组染色更深,说明成骨矿化程度更高;荧光定量PCR结果显示,Raptor过表达组的成骨分化标记基因以及成骨转录因子的表达量均高于对照组。与对照组相比,Raptor siRNA组的Raptor mRNA和蛋白水平明显降低;茜素红染色结果显示Raptor siRNA组染色更浅,说明成骨矿化程度更低;荧光定量PCR结果显示,Raptor siRNA组的成骨分化标记基因以及成骨转录因子的表达量均低于对照组。结论:mTORC1信号促进前成骨细胞MC3T3-E1向成骨细胞分化成熟。

参与式实验教学促进学生实践能力培养

目的:探讨学生参与实验准备工作对于学生实践能力的影响。方法:将河南省某高校2006年级部分学生分为实验组与对照组,实验组课前跟随教师参与实验准备工作,而对照组不参加,只按常规模式上实验课,课程结束后,在同一时间内以相同的方法一同进行实验考核。结果:实验组在20个骨髓细胞的辨认、肠杆菌科分离及生化鉴定、肥达反应效价判断、质粒的提取与纯化、不规则抗体的筛选与鉴定、白细胞分类计数等6项内容的考核结果与对照组相比较,有显著性差异(P<0.05);而回收试验实验组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:医学检验专业是医学院校各专业中实践性较强的一个专业,学生利用课余时间参与实验准备工作,能够增强专业学习兴趣,提高实践动手能力。

手术对腹部肿瘤患者凝血功能的影响

目的探讨手术对腹部肿瘤患者凝血功能的影响。方法检测63例腹部肿瘤患者手术前后血浆血小板(PLT)计数、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)和D-二聚体(D-D),并比较手术前后各项指标的差异。结果与术前比较,术后血浆PLT降低(P<0.05),PT、TT、APTT缩短(P<0.05),FIB、D-D明显增高(P<0.01)。结论腹部肿瘤患者手术可增加血栓或出血风险,应在手术期间及时采取预防措施。

以应用型人才培养为导向完善实验教学管理

目的探讨以应用性人才培养为导向的高等医学院校教学实验室仪器设备标准化管理的重要性。方法将仪器设备标准化管理理念应用到高等医学院校教学实验室管理中。比较引入仪器设备标准化管理理念管理前后仪器完好率和操作合格率。结果实施仪器设备标准化管理后,仪器的完好率由实施前的82.91%提高至91.77%,差异有统计学意义(χ~2=5.61,P<0.05);操作合格率由62.50%提高至87.50%,差异有统计学意义(χ~2=5.33,P<0.05)。结论应用仪器设备标准化管理理念管理高等医学院校教学实验室仪器设备,提高了仪器设备的完好率,提升了实验教师的制度化素养和业务素养。

MBL抑制白假丝酵母菌刺激THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8

目的 探讨甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin,MBL）对白假丝酵母菌（Candida albicans）刺激的THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8的影响.方法 以不同浓度人MBL预处理THP1/CD14细胞2 h后,再用热灭活的酵母相C.albicans和/或菌丝相C. albicans刺激细胞24 h,收集培养上清,以ELISA从蛋白水平分析其TNF-α和IL-8的产生.收集细胞提取总RNA,以RT-PCR从转录水平评估TNF-α和IL-8的表达,Western blot分析NF-KB的细胞核移位.结果 ELISA检测发现,两种相态的C. albicans均可刺激各组细胞分泌TNF-α和IL-8,酵母相C.albicans刺激细胞产生细胞因子水平稍高;高浓度MBL（10～20 mg/L）均可抑制两种相态的C. albicans诱导细胞分泌TNF-α和IL-8,低浓度MBL（1 mg/L）则几乎无影响;RT-PCR分析亦显示,与相应只用C. albicans刺激的实验组相比,高浓度MBL（20 mg/L）对两种相态的C. albicans诱导的TNF-α、IL-B的mRNA表达均有不同程度的抑制作用;Western blot分析显示,高浓度MBL（20 mg/L）对两种相态的C. albicans诱导的NF-KB细胞核移位有显著的抑制作用.结论 MBL可抑制C.albicans诱导的THP1/CD14细胞产生TNF-α和IL-8,提示MBL能够在抗C.albicans 免疫中起调控作用.

参与实验教学准备 促进实践能力培养

目的探讨学生参与实验准备工作对于学生实践能力的影响。方法将河南省某高校2006级部分五年制医学检验专业学生分为实验组与对照组，实验组课前跟随教师参与实验准备工作，而对照组不参加，只按常规方式上实验课，课程结束后，在同一时间内采用相同方法进行实验考核。结果实验组在20个骨髓细胞的辨认、肠杆菌科分离及生化鉴定、肥达氏反应效价判断、质粒的提取与纯化、不规则抗体的筛选与鉴定、白细胞分类计数等6项内容的考核结果与对照组相比较，差异具有统计学意义；而回收试验实验组与对照组比较差异无统计学意义。结论学生利用课余时间参与实验准备工作，能够增强专业学习兴趣，提高实践动手能力。