药物性肝损伤的流行病学

一、药物性肝损伤概念和分类 药物性肝损伤（DILI）是指人体暴露于常规剂量或高剂量药物后，因药物本身或其代谢产物对肝脏的直接毒性，或人体对药物或其代谢产物产生过敏或代谢特异质反应而导致的肝脏损伤。

《用气垫导轨验证机械能守恒定律》实验方法探讨

1实验原理 当质量为m的滑块在倾斜的气垫导轨上运动时,滑块在运动过程中受到阻力很小,可以忽略.由于只有重力作功,因而系统的机械能保持不变.

在物理实验教学中培养学生创新能力的探索

物理学是一门以实验为基础的科学，在物理教学中培养学生的创新能力是非常必要的。本文从优化演示实验、倡导学生自主实验等方面，结合具体实验事例，论述了在物理实验教学中培养学生创新能力的具体方法和途径。

一些常见混凝土裂缝成因及措施

建筑业是国民经济建设中的支柱产业之一。如何保证建设工程质量,日益受到各级政府和各界的广泛关注。在众多的工程质量问题中,砼裂缝现象则多为突出,因此,必须十分重视砼裂缝成因的分析及预防。

探索职业技术学校物理实验教学的目标和评价方法

物理教学必须以实验为基础,实验教学目标对实验教学起到导向、反馈和调节作用,本文在分析职业技术学校物理实验教学目标要求的基础上,提出了物理实验教学目标达到程度的评价方法。

对防空地下室设计认识

随着城市建设不断发展,高层建筑如春笋般拔地而起,地下室设计是高层建筑的主要组成部分,而防空地下室是用于战时人民防空具有一定防护能力的地下室,是人防工程的重要组成部分,是目前修建最多的也是一般建筑专业人员最常设计的面广量大的人防工程。

神经节苷脂GD2可作为肺癌干细胞一个潜在的候选标志物

目的探索神经节苷脂GD2作为肺癌干细胞(LCSCs)标志物的可行性。方法用成球培养的方式在体外富集肺癌细胞系的肿瘤干细胞(CSCs);用实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测LCSCs中干性相关基因以及GD3合成酶(GD3S)的表达;用流式细胞测量术检测肺腺癌细胞系A549中GD2及其他干性表型的表达;用CCK8法检测细胞增殖;用Transwell小室法和细胞划痕愈合实验检测细胞的体外侵袭和迁移;用肺癌移植瘤模型比较细胞系A549中不同亚群的致瘤性。结果体外成球培养能够成功富集到A549细胞的肿瘤干细胞,贴壁培养时,GD2+细胞的比例为0.57%,成球培养后GD2+细胞比例能够上升至20.4%。与GD2-A549细胞相比,GD2+A549细胞的体外增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.05)和迁移能力(P<0.01)均显著提高。GD2与另外两种肺癌干细胞表型之间有密切联系,其表达水平与CD44(P<0.01)及EpCAM(P<0.001)的表达呈正相关。体内的结果表明,相比于GD2-A549细胞,接种GD2+A549细胞后肿瘤生长更快(P<0.001),恶性程度更高(P<0.01)。结论神经节苷脂GD2可作为LCSCs的潜在标志物以识别肿瘤干细胞,将GD2作为肺癌免疫治疗的靶点提供了新的思路。

基于术前人B-淋巴细胞趋化因子1检测的肝细胞癌患者肝切除术后复发预测模型的构建及分析

目的探究与肝细胞癌患者肝切除术后复发相关的血清学指标,构建复发预后模型以评估患者是否适合采用姑息性肝切除手术。方法共纳入了2009年2月—2013年7月于郑州大学附属肿瘤医院接受肝切除术并进行随访的肝细胞癌患者111例。收集患者的基本资料,根据患者在随访期间内是否复发分为复发组和未复发组。正态分布的计量资料两组间比较采用t检验;非正态分布的计量资料两组间比较采用Wilcoxon秩和检验。计数资料组间比较采用χ^(2)检验。Kaplan-Meier法绘制生存曲线,log-rank检验比较差异。单因素与多因素分析采用Cox回归分析,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)判断预测效能。结果Kaplan-Meier生存曲线显示AFP、ALP、GGT、FIB低值组及人B-淋巴细胞趋化因子1(CXCL13)高值组患者的中位复发时间更长(P值均<0.05)。AFP[HR(95%CI)=1.69(1.03~2.79),P=0.039]、GGT[HR(95%CI)=1.89(1.14~3.14),P=0.014]和CXCL13[HR(95%CI)=0.54(0.33~0.89),P=0.015]为与肝切除术后复发相关的独立因素。基于其构成的预后指数:PI=0.526×AFP+0.637×GGT-0.616×CXCL13,预测姑息性切除术后0~3个月内复发的ROC曲线下面积(AUC)为0.87,灵敏度为93.75%,特异度为63.64%,但对0~6个月(AUC=0.68)及更长时间的预测效能明显下降,对姑息性切除的复发预测效能显著高于根治性切除。结论基于CXCL13、AFP和GGT构建的预后模型可用于评估患者采用姑息性肝切除术后的早期复发风险,有助于临床医生依据患者获益情况作出诊疗决策。

gp73在小鼠肝纤维化肝组织中的表达及机制

目的在小鼠肝组织中探讨高尔基体跨膜糖蛋白73(gp73)在肝纤维化进程中的变化及机制。方法腹腔注射CCl4构建C57BL/6J小鼠肝纤维化模型;用ELISA检测小鼠血清中gp73的水平;用免疫组织化学染色检测肝组织内gp73的表达;用密度梯度离心法分离肝星状细胞(HSC)并检测其中gp73的表达;用免疫组织化学染色法检测肝组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)的表达;接下来分别转染IGF2BP3过表达与敲低的质粒,用RT-PCR检测GP73蛋白的编码基因GOLM1的表达变化;流式细胞计量术检测基因敲除鼠肝纤维化模型中HSC内gp73的表达。结果在肝纤维化模型的小鼠血清(P<0.01)、肝组织(P<0.05)及原代HSC(P<0.001)中gp73蛋白表达水平均升高,同时组织中的IGF2BP3蛋白表达也升高(P<0.05)。细胞系中转入IGF2BP3的过表达及敲低质粒后,成功过表达IGF2BP3(P<0.001)和敲低(P<0.01),GOLM1的表达也随之上调(P<0.001)和下调(P<0.01)。随后在IGF2BP3敲除鼠的肝纤维化模型的HSC中检测发现gp73表达降低(P<0.01)。结论在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中,由HSC表达的gp73蛋白水平升高,而RNA结合蛋白IGF2BP3是促进其表达的潜在调控因素。

M2型巨噬细胞来源外泌体对乳腺癌细胞系4T1干性特征的影响

目的探讨M2型巨噬细胞来源的外泌体对乳腺癌细胞系4T1细胞肿瘤干性特征的影响。方法用超速离心法分离M2型巨噬细胞来源的外泌体;用透射电子显微镜、纳米粒子追踪技术,Westernblot等对其进行鉴定;然后以乳腺癌细胞系4T1为肿瘤模型,使用Dil染料标记M2型巨噬细胞来源的外泌体,通过免疫荧光技术观察其能否进入4T1细胞。此外,用流式细胞计量术、共培养体系和Transwell实验探究在M2型巨噬细胞来源的外泌体影响下的4T1细胞的干性特征。结果M2型巨噬细胞在体外被成功诱导,分离并鉴定了M2型巨噬细胞来源的外泌体。通过免疫荧光,看到Dil标记的外泌体可成功进入4T1细胞。M2型巨噬细胞来源的外泌体与4T1细胞共孵育后,可明显增强4T1细胞的迁移能力(P<0.001)和成球能力(P<0.05);外泌体抑制剂GW4869可明显抑制4T1细胞的成球能力(P<0.05)。同时,M2型巨噬细胞来源的外泌体可明显增加4T1细胞中CD44highCD24low细胞的比例(P<0.001)。结论M2型巨噬细胞来源的外泌体能够促进4T1肿瘤细胞的迁移和成球能力,并明显增加4T1细胞中肿瘤干细胞的比例。

物理课堂教学提问艺术的原则和方法

提问艺术是教师教学艺术的重要组成部分．良好的提问艺术能优化课堂教学过程，从而提高课堂教学效果．

小鼠乳腺癌肺特异性转移细胞亚系的建立和验证

目的筛选和建立乳腺癌的自发性高器官特异性转移亚系,验证所建立的细胞亚系的细胞特征和肺转移器官特异性。方法利用实验性肺转移模型,尾静脉注射小鼠乳腺癌细胞系4T07,回收肺转移灶细胞,体外扩增培养后,再重复2次,获得高肺转移乳腺癌细胞;再利用小鼠乳腺脂肪垫原位接种构建自发肺转移模型;在此之间,结合肺转移灶体外培养扩增,重复3次,获得肺高转移细胞亚系及自发性肺转移模型;转染筛选稳定表达荧光素酶的高转移细胞亚系,显微镜下观察细胞形态学变化;小动物活体成像和HE染色来检测肺特异性转移和体外迁移能力的变化;流式细胞测量术分析原发灶、转移灶及脾脏中免疫细胞的变化。细胞划痕实验和Transwell小室法检测细胞亚系的体外迁移能力的变化。结果成功建立了小鼠乳腺癌4T07肺特异性转移细胞亚系4T07LuM。将稳定表达荧光素酶的4T07LuM细胞接种于小鼠乳腺脂肪垫后,小动物活体成像结果发现荧光信号主要集中于肺器官,HE切片可见肺脏中的肿瘤转移灶。4T07LuM相较于亲本细胞4T07体外迁移能力有明显提升,48 h的划痕闭合程度是亲本细胞的1.64倍(P<0.001),12 h时迁移过小室的细胞数是亲本细胞的1.91倍(P<0.001)。4T07LuM细胞荷瘤鼠的脾脏、原位灶和转移器官的免疫细胞比例发生显著变化,体内免疫微环境均更倾向于免疫抑制状态。结论实验性转移和自发性转移的连续筛选联合体外培养扩增可以建立高器官特异性转移的细胞亚系。

中东呼吸综合征冠状病毒感染

2012年6月,沙特地区1名老人因感染一种新型冠状病毒HCoV-EMC/2012而死亡的事件引起人们对这种新型冠状病毒的关注。截至2013年6月7日,全球共有55例患者确诊感染该病毒,其中31例死亡。本文从事件回顾、临床症状、基因组特征、致病机制、流行病学、实验室诊断以及预防与治疗等方面对此新型冠状病毒作一简单介绍,以加强民众意识,做好预防准备,防止类似SARS冠状病毒引起的流行暴发。

慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞频数、表型和体外细胞毒功能研究

目的探讨慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞的频数、表型和体外细胞毒功能特征。方法采用流式细胞术检测33例慢性HCV感染者及21例健康对照者外周血CD56＋T细胞的频数和细胞表面活化性受体NKG2C、CD＋6、NKp46和抑制性受体CD＋58a、NKG2A的表达水平；检测体外未刺激及K562细胞刺激作用下CD56＋T细胞毒效应（CD＋07a）和细胞因子分泌水平（IFN-γ和TNF-α），并分析上述3种CD56＋T细胞功能指标之间的关联性。结果与健康对照相比，慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞在淋巴细胞中的比例明显降低（P=0．018）。CD56＋T细胞表面的活化性受体NKG2C（P=0．015）、CD＋6（P=0．036）、NKpM6（P=0．001）均有不同程度降低，而抑制性受体CD＋58a、NKG2A未发现有统计学意义的差异（P〉0．05）。体外未刺激情况下，慢性HCV感染者CD56＋T细胞分泌细胞因子IFN-γ和TNF-α均显著弱于健康对照组（P〈0．0001）；在K562细胞刺激作用下，慢性HCV感染者CD56＋T细胞CD＋07a水平及分泌细胞因子IFN-γ和TNF-α均呈显著降低趋势（P〈0．0001），且3种功能指标表达水平密切关联（r〉0．80，P〈0．0001）。结论慢性HCV感染者CD56＋T细胞频数降低，细胞毒能力和重要细胞因子分泌能力均明显减弱。该结果提示显著受损的CD56＋T细胞功能可能与HCV慢性持续性感染有关。

抗HCV抗体水平在不同HCV感染人群中的临床意义评价

目的比较HCV单感染、人类免疫缺陷病毒（HIV）／HCV共感染、HCV自发清除者血清HCV抗体S／CO比值低值与高值的分布情况，对HCV不同感染状态下HCV抗体检测的临床意义进行初步评价。方法2009年对河南上蔡某村的129例HCV单感染者、98例HIV／HCV共感染者、65例HIV阴性的HCV自发清除者和48例HIV阳性的HCV自发清除者的血清或血浆样本进行HCV抗体、HCVRNA、ALT、AST检测，对HCV慢性感染者和HIV感染者分别进行HCV基因型分析和CD4＋T淋巴细胞计数检测，将各组人群的各项指标进行对比分析。2012年对该调查人群进行随访采样并检测HCV抗体水平。计量资料组间比较采用t检验，计数资料采用疋。检验；相关分析采用Pearson检验。结果HCV慢性感染者的HCV抗体水平几乎均为高值分布（S／CO≥10），而HCV抗体低值（1≤S／CO〈10）主要分布在HCV自发清除者和HIV／HCV共感染者中；HCV自发清除者的抗体水平随着时间推移发生衰减（2012年与2009年比：HIV阴性组：5．51土3．67与7．75±3．8，f=10．67，P〈0．01；HIV阳性组：4．93±3．35与7．61±3．47，t=9．52，P〈0．01），而HCV慢性感染者无此变化；HIV／HCV共感染者的HCV抗体S／CO比值与CD4＋T淋巴细胞数呈正相关（r=0．28，P=0．008）。比较不同HCV基因型的慢性感染者，HCV单感染组HCV-lb型患者的HCV抗体水平高于HCV-2a型（14．74±1．68与14．08±1．44，t=2．20，P=0．03）；HIV／HCV共感染者中，HCV—Ib型血浆ALT／AST水平升高的患者比例显著高于HCV-2a型（ALT：25／42与16／56，x^2=9．45，P=0．002；AST：28／42与18／56，x^2=11．49，P=0．001）。将HCV抗体水平、HCVRNA以及血浆ALT／AST检测结果联合分析，无论是否合并HⅣ感染，HCV抗体高值组的HCVRNA阳性率显著高于HCV抗体低值组（HIV阴性：128／151与1／43，z。=102．11，P〈0．01；HIV阳性：88／98与10／48，x^2=69．44，P〈0．01）；在HIV阴性且HCV抗体为高值的人群中，HCV慢性感染者的肝功能受损率明显高于自发清除者（ALT：x^2=10．52，P〈0．01lAST：z。=16．45，P〈0．01）。结论在临床诊断实践中，可将HCV抗体S／CO值等于10作为HCV抗体高值和低值的分界值。在未经HCV抗病毒治疗的唇耆中7排除合并感染HIV等免疫损伤性疾病的可能性，低值HCV抗体水平（s／co〈10）的出现在很大程度上可判断患者为HCV自发清除者。HCV抗体水平结合临床其他信息（如肝脏损伤情况、HIV感染状态等）可初步评价患者的HCV感染状态。

慢性乙型肝炎患者外周血CD8^+T细胞亚群分布和PD-1表达特征研究

目的分析慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中CD8+T细胞及其亚群表面程序性死亡受体-1(PD-1)表达的变化特征及其临床关联性。方法用流式细胞术检测14例CHB患者和15例健康对照者外周血中CD8+T细胞及其亚群初始T细胞(TN)、中央记忆T细胞(TCM)、效应记忆T细胞(TEM)、终末效应记忆T细胞(TEMRA)的频数及细胞表面PD-1的表达水平,同时收集患者一般资料、生化指标和乙型肝炎病毒(HBV)病毒学指标等临床资料。使用SAS 9.1统计软件分析数据,应用Mann-Whitney U test分析组间差异,应用Spearman秩相关进行相关性分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果与健康对照组相比,CHB患者的TEMRA亚群在CD8+T细胞中的频数显著降低(P=0.012),总CD8+T细胞(P=0.018)及其TEM亚群(P=0.004)表面PD-1的表达水平显著上升。相关性研究显示,CD8+TEM细胞表面PD-1的表达水平与HBV DNA载量呈显著正相关(r=0.554,P=0.040)。结论 CHB患者外周血中PD-1阳性的CD8+TEM频数升高,且与外周血中HBV DNA载量呈正相关,提示慢性乙型肝炎患者机体内HBV复制的活跃性可能与外周血中CD8+T细胞的活化状态,特别是其TEM亚群上PD-1的高表达关联。