浅谈我国水环境现存的问题及对策措施

随着经济的快速发展,人口的增长和城市化水平的提高,解决水环境的问题已显得愈加紧迫。本文介绍当今水环境存在的问题及其成因,并提出了解决水环境问题的方法,同时就解决我国水资源问题的方法对策展开论述。

初中语文诗歌教学目标设计新思考

诗歌是一种特殊的文学体裁,但部分教师在教学中过于强调学习效率导致诗歌的教学目标流于形式,并未发挥诗歌正面的导向功能。诗歌教学需要专门且操作性强的目标体系,本文分析了各类教育专著、有关初中语文诗歌的教学文献和课程目标的具体要求,归纳了阶段性功效突出的教学目标层级序列。

溶瘤腺病毒联合阿特珠单抗对EMT-6乳腺癌原位移植瘤模型小鼠的治疗作用

目的研究溶瘤腺病毒rAd.Null联合免疫检查点抑制剂阿特珠单抗(atezolizumab)对三阴性乳腺癌(TNBC)的治疗作用。方法健康雌性Balb/c小鼠第3~4脂肪垫接种EMT-6乳腺癌细胞(第0天,D0),制备EMT-6乳腺癌原位移植瘤小鼠模型。D7将模型小鼠随机分为移植瘤对照组、rAd.Null组、阿特珠单抗组和rAd.Null^(+)阿特珠单抗(联合治疗)组。D7和D10,rAd.Null和联合治疗组瘤内注射rAd.Null 100μL(2.5×10^(10)VPs);D8,D11和D14,阿特珠单抗和联合治疗组ip给予阿特珠单抗10 mg·kg^(-1)。D26将小鼠处死,剥离完整移植瘤组织,测量移植瘤体积和瘤重,计算抑瘤率;HE染色观察移植瘤组织病理变化。D26同时收集外周血和脾,免疫组织化学染色法观察移植瘤组织CD8^(+)T淋巴细胞和活化胱天蛋白酶阳性细胞即凋亡细胞百分比,流式细胞术分析小鼠外周血和脾中CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞及脾调节性T细胞(Treg)百分比,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测移植瘤组织中Th1类细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、Th2类细胞因子白细胞介素10(IL-10)及肿瘤杀伤相关基因颗粒酶B和穿孔蛋白mRNA表达水平。结果移植瘤D26,与移植瘤对照组相比,rAd.Null和阿特珠单抗单独治疗组移植瘤体积无明显变化,联合治疗组移植瘤体积明显减小(P<0.05);3个治疗组移植瘤重量均明显减轻(P<0.05,P<0.01),抑瘤率分别为(54.6±10.2)%,(48.4±30.8)%和(71.1±24.2)%,联合治疗组虽与两者单独治疗组比较无统计学差异,但有进一步降低的趋势。HE染色结果表明,3个治疗组移植瘤组织中肿瘤细胞均有程度不等的坏死,联合治疗组更加明显。免疫组织化学染色结果表明,与移植瘤对照组比较,联合治疗组移植瘤组织中CD8^(+)T淋巴细胞和凋亡细胞百分比明显增加(P<0.05,P<0.01),且明显高于两者单独治疗组(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术结果表明,与移植瘤对照组相比,3个治疗组外周血和脾CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞百分比均无明显变化,但联合治疗组高于阿特珠单抗单独治疗组(P<0.05);两者单独治疗组脾Treg细胞百分比无明显变化,联合治疗组明显降低(P<0.05)且低于两者单独治疗组(P<0.05)。RT-qPCR结果表明,与移植瘤对照组相比,联合治疗组移植瘤组织中INF-γ、颗粒酶B和穿孔蛋白mRNA表达明显升高(P<0.01),IL-10 mRNA表达明显降低(P<0.01)且明显高于两者单独治疗组(P<0.01)。结论rAd.Null与阿特珠单抗联合治疗对TNBC的治疗作用优于两者单独治疗,该作用可能与其增加肿瘤微环境中CD8^(+)T淋巴细胞浸润、促进肿瘤细胞凋亡并激活细胞毒性T淋巴细胞和NK细胞功能有关。

^(60)Coγ射线照射对人脐静脉内皮细胞线粒体结构和功能的影响

目的探讨^(60)Coγ射线照射对血管内皮细胞线粒体结构和功能的影响。方法分别采用^(60)Coγ射线0(细胞对照组),5,10和20 Gy单次照射人脐静脉内皮细胞(HUVEC),照射后24和48 h,采用流式细胞术检测细胞凋亡;荧光探针H2DCF-DA标记,用激光共聚焦显微镜检测细胞产生活性氧(ROS)水平;JC-1探针标记,分别用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位;通过钙黄绿素-AM探针标记,激光共聚焦显微镜定性检测线粒体膜通道孔(mPTP)开放状态;电镜观察线粒体结构变化;Western印迹法检测线粒体分裂相关标志物磷酸化动力相关蛋白1(p-Drp1)和磷酸化线粒体分裂因子(p-Mff)蛋白表达水平。结果与细胞对照组相比,照射后24和48 h,5,10和20 Gy组细胞凋亡率增加(P<0.01),细胞ROS水平增加(P<0.05,P<0.01),细胞mPTP开放增加(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术和荧光显微镜检测结果显示,与细胞对照组相比,照射后24和48 h,5,10和20 Gy组线粒体膜电位下降(P<0.01)。电镜观察显示,与细胞对照组相比,照射组照射后48 h,单个线粒体面积增加(P<0.05,P<0.01),单个线粒体周长增加(P<0.05),线粒体密度下降(P<0.05,P<0.01),异常线粒体数量大幅增加(P<0.01)。与细胞对照组相比,各照射组照射后48 h,p-Drp1和p-Mff蛋白表达水平均显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论^(60)Coγ射线照射加重血管内皮细胞线粒体损伤,促进线粒体分裂,诱发线粒体功能障碍。

大连市旅顺口区档案馆喜迁新馆

近日,大连市旅顺口区档案馆完成搬迁工作,占地6000余平方米的新馆正式投入使用,彻底结束了旅顺口区档案馆馆库陈旧、面积不足的历史,标志着旅顺口区档案事业进入新的发展阶段。旅顺口区档案馆新馆项目得到了区委和区政府的高度重视和大力支持,新馆于2016 年12 月30日开工建设,2018年末投入使用。

富源县魔芋产业发展初探

介绍富源县适宜种植魔芋的气候、土壤及森林植被等环境条件。对生产基地有保障,科技推广有支撑,产品有市场,有科学栽培方法等富源县魔芋产业发展优势进行阐述。分析了种植规模较小,市场秩序不够规范,加工企业处于起步阶段等目前存在的问题,并提出了相关发展建议。

牙髓干细胞来源胞外囊泡通过调节miR-100-5p抑制γ射线所致小鼠骨髓细胞FDC-P1凋亡

目的探讨牙髓干细胞来源胞外囊泡(DPSC-EV)对γ射线导致小鼠骨髓细胞凋亡的抑制作用及机制。方法使用超速离心法从DPSC中分离DPSC-EV,用Western印迹法鉴定其表面标志物,用纳米颗粒跟踪分析技术(NTA)检测DPSC-EV颗粒数目及粒径大小。细胞处理:①^(60)Coγ射线照射小鼠骨髓细胞FDC-P1,单次照射剂量分别为0,2和6 Gy,实验时间为照射后24和48 h;②FDC-P1细胞经^(60)Coγ射线2和6 Gy照射后立即加入DPSC-EV(终浓度5×10^(11) L^(-1))干预24 h;③FDC-P1细胞转染微RNA(miRNA)抑制剂后进行2 Gy照射并立即加入DPSC-EV(终浓度5×10^(11) L^(-1))干预24 h;④FDC-P1细胞转染miRNA模拟物后进行2 Gy照射,继续培养24 h。用流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹法检测胱天蛋白酶3、活化胱天蛋白酶3、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)和活化PARP蛋白表达水平,逆转录实时定量PCR检测细胞miR-100-5p表达水平。结果①与细胞对照组相比,^(60)Coγ射线2和6 Gy照射后24和48 h,FDC-P1细胞凋亡率均显著升高(P<0.01),细胞中胱天蛋白酶3和PARP蛋白活化水平均显著升高(P<0.05,P<0.01)。②照射后加DPSC-EV处理24 h,FDC-P1细胞凋亡率较2和6 Gy单纯照射组均明显降低(P<0.01),PARP蛋白活化水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。③经γ射线2 Gy照射后24 h,FDC-P1细胞miR-100-5p表达水平与细胞对照组比较显著降低(P<0.01),DPSC-EV干预可逆转2 Gy照射导致的miR-100-5p表达水平降低(P<0.01);转染miR-100-5p抑制剂后,FDC-P1细胞经2 Gy照射并加入DPSC-EV后,与抑制剂对照组相比,细胞凋亡率显著升高(P<0.01);④转染miR-100-5p模拟物后,2 Gy照射,与模拟物对照组相比,FDC-P1细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。结论DPSC-EV可能通过上调骨髓细胞中miR-100-5p表达水平而抑制γ射线所致小鼠骨髓细胞凋亡。

线粒体示踪体系的建立及验证

目的通过构建稳定表达线粒体荧光报告系统的牙髓干细胞(DPSC)建立线粒体示踪体系,并采用该示踪体系研究间充质干细胞(MSC)向辐射损伤细胞输送线粒体。方法①构建质粒pSIN-EF1α-COX8A-DsRed2(简称COX8A-DsRed2),并进行基因测序和PCR鉴定;COX8A-DsRed2用293T细胞包装获得慢病毒(Lv-COX8A-DsRed2)并感染DPSC,采用荧光显微镜观测红色荧光蛋白DsRed2在DPSC线粒体的稳定表达(DPSC-COX8A-DsRed2)。②在DPSC-COX8A-DsRed2中使用荧光染色法观察DsRed2荧光蛋白与线粒体膜受体线粒体外膜转位酶20(TOMM20)和线粒体示踪试剂MitoTracker Green的共定位。③采用10 Gy X射线照射大鼠小肠隐窝上皮细胞系IEC-6建立细胞辐射损伤模型,并使用5(6)-羧基二乙酸荧光素N-琥珀酰亚胺酯(CFSE)荧光染料标记IEC-6细胞;于照射后,立即加入DPSCCOX8A-DsRed2,继续培养24 h,荧光显微镜观察DPSC-COX8A-DsRed2能否向辐照受损细胞递送线粒体。结果①载体成功插入基因COX8A和DsRed2基因序列,COX8A-DsRed2构建成功;DPSC-COX8ADsRed2细胞内表达红色荧光DsRed2;②荧光染色法结果显示,红色荧光报告系统DPSC-COX8ADsRed2与线粒体膜受体TOMM20、线粒体示踪试剂MitoTracker Green共定位于细胞线粒体;③DPSCCOX8A-DsRed2与辐射损伤IEC-6细胞共培养,荧光显微镜可观测到绿色荧光的IEC-6细胞中出现DPSC来源的红色荧光标记的线粒体,表明DPSC与IEC-6之间发生了线粒体转移。结论构建的线粒体荧光探针能够准确指示线粒体的转移,为下一步研究间充质干细胞线粒体转移在辐射损伤救治中的作用提供了理想工具。

地方资讯

天津市市场监管委举办“5·20”世界计量日主题活动近日,天津市市场监管委、河东区市场监管局共同开展“天津市计量科技项目发布天津市河东区科普基地授权暨天津市菜市场诚信计量管理规范地方标准发布”主题纪念活动。经广泛征集、单位推荐、专家评审和立项审核,确立73个项目纳入2024年天津市计量科技项目支持范围,项目涉及面广、覆盖面全,承担单位中天津大学等高校和科研院所占比超过70%。

传统文化视角下的高中古代诗歌教学研究

新课改实施至今,给高中语文教学带来诸多变化,语文学科的地位明显上升。新课改强调语文能力的综合发展,将弘扬中华传统文化作为教学重难点。新课改对于语文教育者来说既是机遇又是挑战,以高中古代诗歌教学为例,与优秀传统文化接轨,找到适合诗歌教学的方法。