短间隔连续部分肝切除(SISPH)对肝细胞核和核仁的影响

以建立的 4种短间隔连续部分肝切除模型 (shortintervalsuccessivepartialhepatectomy ,SISPH)为材料 ,分析了连续部分肝切除 (successivepartialhepatectomy ,SPH)次数和方式对大鼠肝细胞核和核仁的体积、数目影响 ,证实了肝细胞核和核仁的大小、数目变化与SISPH的次数和方式正相关。

常压低氧小鼠氧耗量测定新装置的研究及应用

目的:建立一种实时记录常压低氧环境中动物氧耗量的方法。方法:本实验装置由动物舱、补水控制系统、天平、软管、装有体重记录软件的电脑等组成。为了实现常压低氧,用水补充动物消耗的氧气以保持动物舱内压力恒定,这个过程由气液联动装置控制;补充的水量由天平测量并同步输出信号至excel文档中。用注射器抽气校准方法检测了装置的准确性和精度。利用该装置观察了6只急性重复低氧小鼠(处理组)和6只未经低氧处理的小鼠(对照组)的常压低氧过程的氧耗量特征。结果:不同体积抽气量与相应补水量两组数据配对t检验P=1;重复抽1 ml氧气6次的补水量变异系数为4%。处理组小鼠的存活时间为(58.8±6.8)min,显著高于对照组(46.0±8.7)min(P<0.05)。处理组小鼠的总氧耗量为(85.1±8.5)ml,显著高于对照组(73.6±5.4)ml(P<0.05)。结论:处理组小鼠摄取氧总量增多从而显著延长其存活时间。氧耗量测定装置准确度和精密度较高,可用于低氧研究中氧耗量的测定。

高原肺水肿易感基因多态性的全基因组关联分析

目的:高原肺水肿严重影响高原人群的健康。筛选高原肺水肿易感基因以用于高原肺水肿易感者的评估及防护。方法:利用Affymetrix SNP Array 6.0芯片对23例高原肺水肿患者和17个健康对照进行全基因组SNP分型,利用PLINK软件进行了全基因组关联分析,利用GO和Pathway软件进行分析及作图。结果:全基因组关联分析获得39个相对显著的SNPs位点(P<10-4)。通过对这些SNP位点附近27个基因的GO和Pathway富集分析,发现这些基因主要参与细胞增殖调控过程、氮代谢过程和G蛋白耦联受体蛋白信号转导通路等。结论:本文发现的多态性位点及相关基因可能与高原肺水肿易感性相关。

血管紧张素转换酶基因I/D多态性与埃他卡林抗高血压临床疗效之间的相关性

目的:研究汉族高血压人群血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与埃他卡林临床疗效的关系。方法:对162例汉族原发性高血压(EH)患者给予埃他卡林8周治疗,并进行ACE基因I/D多态性分析。结果:162例汉族高血压患者ACE基因I/D多态性分型结果为:II∶ID∶DD(0.401∶0.463∶0.136)。埃他卡林治疗前收缩压(SBP)和舒张压(DBP)分别是(153±13)mm Hg和(100±4)mm Hg。各基因型组患者在药物治疗前SBP和DBP的特点是DD基因型组的SBP显著高于II和ID基因型组(P<0.05),而3种基因型组的DBP比较相近(P>0.05)。治疗后SBP和DBP分别是(142±13)mm Hg和(89±9)mm Hg。治疗后II基因型组患者的ΔDBP显著大于ID组的ΔDBP(P<0.05)。治疗后血压较治疗前血压降低(P<0.001)。162例汉族高血压患者埃他卡林治疗8周后临床有效率为66.67%。II基因型组的总降压有效率(75.38%)比ID基因型组的总降压有效率(58.67%)高(P<0.05)。结论:埃他卡林是新型有效降压药物,II基因型患者对埃他卡林的降压反应较好。

小鼠pdd87基因在大肠杆菌中的表达与纯化

利用PCR和基因重组技术构建了三个小鼠pdd87基因的原核表达质粒:表达全长cDNA的pET-28a-pdd87质粒;表达PDD87C端404个氨基酸的pET-28a-pdd87-404质粒;表达全长cDNA的pMXB10-pdd87质粒。经IPTG诱导后三种质粒都得到表达。pET-28a-pdd87质粒和pET-28a-pdd87-404质粒表达的蛋白经His6亲和层析纯化后分别获得了带His标签的PDD87蛋白和含C端404个氨基酸的蛋白。pMXB10-pdd87质粒表达的蛋白经几丁质柱亲和层析纯化后获得了纯的PDD87蛋白。

人碳酸酐酶Ⅰ原核表达及其新型抑制剂研究

目的评价35个新碳酸酐酶抑制剂对人碳酸酐酶Ⅰ(hCAⅠ)的抑制作用。方法以大肠杆菌表达的hCAⅠ作为酶源,利用酯酶活性检测方法对35个新化合物进行了hCAⅠ的抑酶活性评价并与hCAⅡ的评价结果进行了综合分析。结果发现4个化合物对hCAⅠ和hCAⅡ的抑制作用均大于醋氮酰胺,2个化合物对hCAⅠ的抑制作用大于醋氮酰胺而对hCAⅡ的抑制率与醋氮酰胺相当,6个化合物对hCAⅡ的抑制作用大于醋氮酰胺而对hCAⅠ的抑制作用与醋氮酰胺相当。结论进一步深入研究这12个化合物有望获得高效、低副作用的急性高原病防治药物。

低压低氧大鼠摄氧量测定装置

目的:设计并制作一种用于测定模拟不同海拔低压低氧环境中大鼠摄氧量的装置。方法:该装置容积约为0.01 m3。它包括动物舱、参照舱、高度表、高度升降速率表、动物舱与参照舱间气压差感应和氧气自动补偿装置、低范围气压计、钠石灰和氯化钙、小风扇、温度湿度表、循环水温度控制装置、真空泵。利用该装置检测大鼠在平原(50 m)、4 000 m和6 000 m模拟海拔环境中的摄氧量。结果:大鼠在平原(50 m,北京)、4 000 m和6 000 m模拟海拔环境中的摄氧量分别为(24.4±2.1)、(10.8±2.0)和(8.8±1.6)ml/(kg.min)(-x±s,n=10),随着海拔高度的升高其摄氧量逐渐降低。结论:本文制作的低压低氧动物摄氧量测定装置可用于测定不同海拔环境中大鼠的摄氧量。

pten敲除小鼠中转录上调基因pdd87编码蛋白定位于高尔基体

为了明确pten敲除小鼠中转录上调基因pdd87编码蛋白在细胞中的定位,构建PDD87与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白表达载体pEGFP-C1-pdd87,利用Lipofectamine2000转染该载体于体外培养的NIH3T3细胞中,采用高尔基体特异探针BODIPYTRC5-Ceramide染色显示高尔基体,激光共聚焦显微镜下观察到PDD87-GFP融合蛋白定位于高尔基体,提示pdd87基因编码的蛋白定位于高尔基体。

细胞内部核糖体进入位点研究进展

细胞内部核糖体进入位点(IRES)是mRNA5'端非编码区的一段特殊的序列,它允许核糖体不从mRNA的5'到3'端阅读而直接在此序列处结合mRNA并起始翻译。本文综述了IRES的发现、IRES的识别及细胞IRES的特征、作用机理、生物学意义及其生物学应用等方面的研究进展。

Pten^(L/L)MEFs与Pten^(△/△)MEFs细胞系的差异表达蛋白质组分析

目的研究PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞的蛋白表达差异。方法运用双向电泳技术比较PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞的蛋白表达差异,6个差异蛋白进行胶内酶切后运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行质谱分析,肽质量指纹图谱检索数据库后5个蛋白得到鉴定。结果同对照PTEN野生型细胞PtenL/LMEFs相比,磷酸甘油酸变位酶1(phosphoglycerate mutase 1,PGAM1)和肽脯氨酰顺反异构酶C(pepti-dyl-prolyl cis-trans isomerase C,cyclophilin C)在Pten△/△MEFs细胞中表达上调而Transgelin 2蛋白在Pten△/△MEFs细胞中表达下调。经鉴定已知蛋白点B和F都是过氧化物氧化还原酶6(Peroxiredoxin-6),蛋白点B在Pten△/△MEFs细胞中表达而在Pten△/△MEFs细胞中检测不到,蛋白点B和F的分子质量相似而等电点不同,可能是由于翻译后修饰。结论同对照PTEN野生型细胞PtenL/LMEFs相比,PTEN缺失的Pten△/△MEFs细胞有明显的差异性蛋白表达谱。PTEN的缺失引起细胞内多种蛋白表达改变,这些表达改变的蛋白可能与PTEN缺失后细胞癌变相关。

Pten^(+/+)MEFs与Pten^(-/-)MEFs细胞系的差异表达蛋白质组分析

目的:研究PTEN缺失细胞的蛋白表达规律。方法:用双向电泳技术比较Pten+/+MEFs与Pten-/-MEFs细胞的蛋白表达差异;用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对差异蛋白进行质谱分析;用肽质量指纹图谱检索数据库对差异蛋白进行鉴定;用Northern印迹和Western印迹验证蛋白的差异表达。结果:与Pten+/+MEFs细胞相比,Pten-/-MEFs细胞有明显的差异性蛋白表达谱,Pten-/-MEFs细胞中表达下降的蛋白有铜锌超氧化物歧化酶、过氧化物氧化还原酶5和6等,表达增加的蛋白有低分子量蛋白酪氨酸磷酸酶和丝切蛋白(coffilin)1。结论:PTEN的缺失引起细胞内多种蛋白表达改变,这些表达改变的蛋白可能与PTEN缺失后细胞癌变相关。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与心血管疾病关系的研究进展

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CystatinC，CysC）是人类半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族中的一员，是半胱氨酸蛋白酶最主要的一种抑制剂。CysC是一种相对分子质量小的蛋白质（13．4kDa），经肾小球自由滤过，并被近端肾小管重吸收继而发生分解代谢，但无分泌，仅从尿中排泄一小部分。

在BEP2D细胞恶性转化过程中TGF-β1对Smad7表达的调节

背景与目的:细胞逃避转化生长因子-β(TGF-β)诱导的对细胞生长、增殖的抑制是许多肿瘤发生的一个重要机制。Smad7是TGF-β信号转导通路的抑制型Smads,它可阻断TGF-β信号在胞浆内的传导,其紊乱是TGF-β信号转导通路紊乱的机制之一。本研究旨在分析在细胞恶性转化过程中,Smad7基因表达是否发生紊乱,TGF-β1对Smad7基因的调控功能有无发生变化,以探索细胞发生恶性转化的原因。方法:培养BEP2D细胞及BERP35T-2细胞,于收获前60min和90min加入不同剂量的TGF-β1,提取细胞总RNA,分别以未加TGF-β1的细胞组作为对照,用Northernblot杂交比较两组细胞Smad7mRNA表达的差异以及细胞对TGF-β1细胞因子刺激的反应性。同时提取BEP2D及BERP35T-2细胞蛋白,用Westernblot方法比较两组细胞内源性TGF-β1表达的差异。结果:Smad7mRNA表达水平恶性转化细胞高于永生化细胞;加了TGF-β1细胞因子后,BEP2D细胞Smad7mRNA表达增高,BERP35T-2细胞表达水平改变不明显。而内源性TGF-β1的表达水平,BERP35T-2细胞稍高于BEP2D细胞。结论:Smad7在辐射致肺癌细胞系中的过表达及对TGF-β1应答的降低可能是辐射诱发肺癌发生的机制之一。

Smad7基因在细胞恶性转化过程中的促增殖作用

用基因转染的方法,建立稳定表达Smad7基因的永生化及恶性化人支气管上皮细胞系,用MTT法检测Smad7基因过表达对细胞生长、增殖的影响及对TGF β1介导的生长抑制效应的影响.结果表明在永生化和恶性化人支气管上皮细胞系BEP2D和BERP35T2中各筛选到2个稳定表达SMAD7蛋白的克隆,命名为BS7 1、BS7 2(来源于BEP2D),RS7 1、RS7 2(来源于BERP35T2).这些细胞系细胞的生长、增殖能力均强于转染空载体的对照细胞系,同时TGF β1对这些细胞系的生长抑制能力明显减弱.提示Smad7基因通过降低细胞对TGF β的应答来促进细胞的生长、增殖能力.

过程控制系统综合性设计性实验的研究

介绍了一种过程控制系统综合性、设计性实验,实验内容改变了以验证为主的实验思路,通过学生两年的实践收到了明显的效果,为达到培养具有创新素质人才的目标作了有益的探索。

单兵供氧器对高原移居青年心率和SaO_2影响的评价

目的:探讨单兵供氧器在高原低氧环境下对高原移居青年动脉血氧饱和度(Sa O2)、心率(HR)的影响及其应用效果。方法:10名高原移居青年受试者采用单兵供氧器,鼻吸式吸氧10 min,检测吸氧前、吸氧后安静时的心率和血氧饱和度,同时观察单兵供氧器的高原现场应用情况。结果:受试者使用单兵供氧器吸氧后的心率分别为(81.80±4.47)b/min低于吸氧前的(88.80±6.55)b/min(P<0.01)。给予单兵供氧器吸氧后受试者的血氧饱和度为(93.80±1.23)%低于吸氧前的(87.40±3.69)%(P<0.01),单兵供氧器的供氧时间平均为(29.6±2.7)min,供氧连续且使用正常。结论:单兵供氧器在高原移居青年受试者中的应用效果良好,可明显降低心率和提高血氧饱和度,促进高原习服。

微丝相关新基因hHBrk1的克隆及功能鉴定

微丝相关新基因hHBrk1被克隆 .hHBrk1基因位于 3p2 5 3 2 4 1区 ,由 3个外显子和 2个内含子组成 .Northern印迹杂交结果表明hHBrk1基因有 2个转录本 ,在人体 12种组织中均有表达 ,尤以心肌和骨骼肌为著 .hHBRK1蛋白含 75个氨基酸 ,分子量约 9kD ,与动植物界相关蛋白的同源性达 98%～ 35 % .hHBRK1蛋白定位于细胞浆 ,在细胞运动的最前沿富集 ;在有丝分裂期 ,hHBRK1蛋白定位于细胞膜皮质区和缢缩环 .实验结果提示 ,hHBRK1蛋白可能通过调控F 肌动蛋白的聚合而参与调控细胞运动、分化等基础生命活动 .

一种新型的数字式液位——流量控制系统综合实验装置

本文介绍了一种新型液位-流量控制系统实验装置--数字式液位流量控制系统,它改变了传统的过程控制中通过模拟量控制来实现对液位流量的控制的方法,采用了以数字调节器为核心的控制系统,具有结构简单、高运算能力、高精度的特点,为学生实验提供了良好的对象,适应了当今数字化时代的要求.

胃镜电凝止血联合瑞巴派特三联疗法治疗胃溃疡出血的疗效

目的观察胃镜电凝止血联合瑞巴派特三联疗法治疗胃溃疡出血的临床疗效。方法将106例胃溃疡出血患者按随机数字表法分为研究组与对照组,每组53例。对照组在基础治疗基础上给予胃镜电凝止血;研究组在基础治疗基础上给予胃镜电凝止血联合施奥美拉唑+铝碳酸镁+瑞巴派特三联疗法治疗;2组均治疗4周。比较2组的临床疗效、治疗前后炎症反应指标[包括白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)]与相关血清学指标[包括超氧化物歧化酶(SOD)、血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)]变化情况及预后质量(包括止血时间、输血量、住院时间)。结果研究组治疗总有效率明显高于对照组(92.45%比75.47%,χ^2=5.67,P=0.02)。2组治疗后VEGF、EGF、SOD水平均较治疗前显著升高(P<0.05),IL-6、IL-17、IL-23水平较治疗前显著降低(P<0.05);且研究组改善较对照组更为显著(P<0.05)。研究组止血时间、输血量、住院时间与对照组比较均明显减少(P<0.05)。结论胃镜电凝止血联合瑞巴派特三联疗法可明显改善胃溃疡出血患者临床症状以及机体高炎症状态,且对其预后质量的改善效果显著。