大鼠FasL^+Sertoli细胞的分离与鉴定

为了将睾丸Sertoli细胞应用于细胞治疗 ,应用胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶消化制备睾丸Sertoli细胞 ,并对其做生活观察、透射电镜检查 ,了解其功能状态。SABC法标记Fas配体和卵泡刺激素受体的表达情况 ,对睾丸Sertoli细胞加以鉴定。培养的睾丸Sertoli细胞 ,形态完整 ,细胞器和细胞核保持良好 ,有丰富的线粒体、内质网、高尔基复合体和溶酶体 ,功能状态良好。且高度表达Fas配体和卵泡刺激素受体 ,出现优势生长现象。Fas配体阳性的睾丸Sertoli细胞可以作为联合移植的供体 。

大鼠甲状旁腺细胞经培养后再移植的实验研究

目的 研究大鼠甲状旁腺细胞经培养后再移植对其存活的影响。方法 将经胶原酶和胰蛋白酶消化的甲状旁腺细胞培养后再行移植 ,观察移植物的存活情况 ,并对移植物做透射电镜观察。结果 新鲜甲状旁腺移植组平均存活期为 (9.2 5± 3.4 5 )d ;甲状旁腺细胞培养后移植 ,移植物的存活时间为 (46 .2 5± 7.4 4 )d ,明显延长(P<0 .0 1) ,在 5 0d观察期内 ,8只鼠中有 6只的血清钙及PTH值持续在正常范围内。移植物内可见完整的甲状旁腺细胞 ,其内见丰富的粗面内质网、杆状的线粒体及分泌颗粒。结论 大鼠甲状旁腺细胞经培养后再移植可以延长移植物的存活时间 ,是治疗甲状旁腺功能低下症的一条有效途径。

去甲状旁腺模型鼠的制备

目的探讨去甲状旁腺(PTG)模型鼠的制备方法,为PTG移植奠定实验基础。方法手术切取PTG,并行病理学检查。对术前和术后2、5、10、15和30d的大鼠血清钙和甲状旁腺激素(PTH)进行测定。结果8只鼠的PTG被成功切除,切除率为80%(8/10)。假手术组手术前、后血清钙和PTH水平无明显变化(P>0.05)。PTG切除组术后2、5、10、15和30d血清钙和PTH水平均明显低于术前,并明显低于同时相假手术组水平(P<0.01)。结论准确切取大鼠PTG,可成功制备去PTG模型鼠。术后10d可作为异体移植的适宜时间。

大鼠甲状旁腺的切取及功能测定

目的 通过对大鼠甲状旁腺的切取方法及功能的研究 ,为甲状旁腺细胞的移植奠定基础。方法 手术切取甲状旁腺 ,并行病理学检查。同时 ,用胶原酶和胰蛋白酶消化甲状旁腺 ,进行细胞培养。对培养5d的甲状旁腺细胞做透射电镜检查 ,应用放射免疫分析对 1d、3d、5d、7d的细胞培养液行甲状旁腺激素测定。结果 18只鼠的甲状旁腺被成功切除 ,切除率 90 % (18/ 2 0 )。培养 5d的甲状旁腺细胞具有丰富的粗面内质网、高尔基复合体、杆状的线粒体和分泌颗粒。培养的甲状旁腺细胞可以正常分泌甲状旁腺激素 ,以第 5d为最佳。结论 大鼠甲状旁腺可以被准确的切取 ,培养 5d的甲状旁腺细胞 ,细胞器最完整 ,分泌功能最强 。

大鼠甲状旁腺细胞体外培养及功能的实验研究

目的:探讨大鼠甲状旁腺细胞的培养方法及其分泌功能,为甲状旁腺细胞移植奠定实验基础。方法:胶原酶和胰蛋白酶系列消化甲状旁腺后,进行细胞培养。透射电镜检查培养5d的甲状旁腺细胞,对1、3、5、7d的细胞培养液行甲状旁腺激素测定。结果:培养5d的甲状旁腺细胞具有丰富的粗面内质网、高尔基复合体、杆状的线粒体和分泌颗粒。甲状旁腺细胞经过培养后可以正常分泌甲状旁腺激素,以第5天为最佳。结论:培养5d的甲状旁腺细胞仍保持原有的形态结构,分泌功能最强,可作为同种移植的最佳供体。

持续皮下胰岛素输注在伴有糖尿病的腹部大手术后危重患者肠外营养期间的应用

目的 探讨持续皮下胰岛素输注在伴有糖尿病的腹部大手术后危重患者完全胃肠外营养期间的应用价值。方法 选择腹部大手术后行完全胃肠外营养（TPN）治疗1周（或以上）的伴有糖尿病的危重患者40例，随机分成两组：胰岛素泵持续皮下胰岛素输注（CSII）组和胰岛素盐水微量输液泵静脉持续输入组，分别监测血糖水平、低血糖发生以及切口感染和愈舍情况。结果 CSII组和对照组胰岛素应用后血糖均明显下降；治疗后第1天、第2天CSII组血糖控制情况明显优于对照组；治疗后第3—7天两组血糖比较无统计学意义；CSII组低血糖发生率、切口感染率、伤口愈合障碍率均低于对照组。结论 CSII控制腹部大手术后TPN支持期间伴有糖尿病危重患者的血糖，与传统静脉胰岛素滴注相比，血糖控制平稳，发生低血糖情况少，且可减少术后切口感染及愈合障碍等并发症，临床应用前景良好。

单侧甲状腺微小乳头状癌对侧腺体隐匿癌灶的预测因素及手术治疗策略

目的既往对单侧甲状腺微小乳头状癌(PTMC)的术式仍存在分歧,文中旨在探讨单侧甲状腺微小乳头状癌对侧腺体隐匿癌灶的预测因素,分析比较单侧PTMC的手术方式。方法回顾性分析哈尔滨医科大学附属第一医院乳腺外科2014年01月至2016年01月经术前彩超检查局限于单侧腺体的PTMC患者327例,根据对侧腺体是否存在隐匿癌灶分为单侧腺体癌灶者(n=278)与双侧腺体癌灶者(n=49);根据是否行预防性中央区淋巴结清扫分为淋巴结清扫者(n=117)与淋巴结未清扫者(n=210),进一步分析对侧腺体隐匿癌灶的预测因素及中央区淋巴结预防性清扫术后相关并发症。结果预防性行中央区淋巴结清扫术患者117例中存在中央区淋巴结转移者55例,转移率为47.0%。患侧腺体内多发癌灶是对侧腺体内存在隐匿癌灶的危险因素(OR=4.924,95%CI:1.605~15.107)。淋巴结清扫者和淋巴结未清扫者术后并发症差异无统计学意义(P>0.05)。结论单侧腺体内PTMC多发癌灶可以帮助预测对侧腺体隐匿癌灶的存在,并且中央区淋巴结转移率较高,建议对于单侧腺体内多发癌灶的PTMC行甲状腺全切除术+中央区淋巴结预防性清扫术。

改良式乳腺肿块切除术治疗乳腺良性肿块的临床效果分析

目的 探讨改良式乳腺肿块切除术治疗乳腺良性肿块的临床应用价值.方法 对176例乳腺良性肿块患者根据手术方式不同分为研究组86例和对照组90例,研究组病例行改良式乳腺肿块切除术治疗,对照组病例行传统式乳腺肿块切除术治疗,术后比较两组手术时间、术中出血量、疼痛时间、切口愈合、术后并发症、乳腺美容效果等情况.结果 与照组相比,研究组的术后乳腺美容效果得到明显提高（P＜0.01）;手术时间有所缩短（15～40 min,P＜0.05）;疼痛持续时间短（0.5 ～3 d,P＜0.05）;术区硬块感时间缩短（25 ～80 d,P＜0.05）;术后积液、术后感染及切口Ⅰ期愈合与对照组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 改良式乳腺肿块切除术是治疗乳腺良性肿块的一种安全、有效、美观的临床术式,值得在临床中应用与推广.

BRCA-1基因与三阴性乳腺癌相关研究进展

三阴性乳腺癌是乳腺癌中侵袭性强、预后差、治疗手段较为单一的乳腺癌亚型。近些年来,人们逐渐发现这种亚型的乳腺癌与BRCA-1基因突变乳腺癌在分子生物学水平方面有很多共性,且两者侵袭性强、预后差、复发早、生存期短。本文对BRCA-1基因以及三阴性乳腺癌的基本生物学特征,临床特征以及治疗的现状进行回顾。

美蓝和异硫蓝在乳腺癌前哨淋巴结活检中的对比研究

目的通过对比采用1％的异硫蓝和1％的美蓝行乳腺癌前哨淋巴结活检，对两种染料的发现率、灵敏度、准确率、假阴性率进行对比，了解两种染料的染色机制，比较和评价两种染料进行乳癌前哨淋巴结定位作用的差别，从而为患者的治疗提供相关的依据。方法从2006年4月～2007年12月间我院收治的乳腺癌患者中选取86例乳腺癌患者（T1，T2），按注射染料的类型不同随机分为关蓝组和异硫蓝组，其中美蓝组44例和异硫蓝组42例，染料被分4点注入乳晕周围皮下和乳腺组织，30分钟后行前哨淋巴结活检术（SLNB），再行腋窝淋巴结清扫术（ALND），并将前哨淋巴结及腋窝淋巴结送病理。结果美蓝组：44例患者检出前哨淋巴结者40例，其发现率为（90．91％），前哨淋巴结活检的灵敏度为93．33％（14／15），准确率为88．64％（39／44），假阴性率为6．67％（1／15），假阳性率为0。异硫蓝组：42例患者检出前哨淋巴结者39例，其发现率为92．86％，前哨淋巴结活检的灵敏度为93．75％（15／16），准确率为90．48％（38／42），假阴性率为6．25％（1／16），假阳性率为0。两组间无统计学差异（P〉0．05）。结论通过应用美蓝和异硫蓝两种染料的对比研究，其发现率、灵敏度、准确率相当，而美蓝应用起来费用较低，在我国更具有好的应用前景。

美蓝、异硫蓝和纳米碳混悬液在乳腺癌前哨淋巴结活检中的对比研究

目的通过对比采用1%异硫蓝、1%美蓝和纳米碳混悬液(卡纳琳)行乳腺癌前哨淋巴结活检,对三种染料的发现率、灵敏度、准确率、假阴性率进行对比,比较和评价三种染料进行乳癌前哨淋巴结定位作用的差别,从而为患者的治疗提供相关的依据。方法选择2006年4月～2007年12月间我院收治的乳腺癌患者(T1≤2cm或2cm<T2≤5cm)126例进入本研究,按年龄、肿瘤最大直径、腋淋巴结数、病理类型随机分为三组:(一)美蓝组44例;(二)异硫蓝组42例;(三)纳米碳混悬液组(卡纳琳)40例。三组资料无统计学差异(P>0.05)具有可比性。全部手术操作均由同一手术组实施。按照实验组的不同,分别取美蓝4ml或异硫蓝4ml或纳米碳混悬液2ml,分4点注入乳晕周围皮下和乳腺组织,30分钟后行前哨淋巴结活检术(Sentinellymphnodebiopsy,SLNB)将找到的前哨淋巴结送快速冰冻病理,后行乳癌根治术或乳癌改良根治术,结果回报后对此三组患者前哨淋巴结活检的发现率、灵敏度、准确率、假阴性率指标进行统计学分析。结果美蓝组:44例患者检出前哨淋巴结者40例,其发现率为(90.91%),前哨淋巴结活检的灵敏度为93.33%(14/15),准确率为88.64%(39/44),假阴性率为6.67%(1/15),假阳性率为0。异硫蓝组:42例患者检出前哨淋巴结者39例,其发现率为92.86%,前哨淋巴结活检的灵敏度为93.75%(15/16),准确率为90.48%(38/42),假阴性率为6.25%(1/16),假阳性率为0。纳米碳混悬液组(卡纳琳):40例患者检出前哨淋巴结者38例,其发现率为(95.00%),前哨淋巴结活检的灵敏度为92.86%(13/14),准确率为92.50%(37/40),假阴性率为7.14%(1/14),假阳性率为0。三组间无统计学差异(P>0.05)。结论通过应用美蓝、异硫蓝和纳米碳混悬液(卡纳琳)三种染料的对比研究,其发现率、灵敏度、准确率相当,而美蓝应用起来费用较低,又不影响疗效,在我国应用更广泛。

男性乳腺导管内乳头状瘤伴不典型增生1例

1临床资料<br> 病人男性，69岁，因左乳无痛性肿块进行性增大半月入院。查体：双乳不对称，左乳增大明显，无皮肤发红、破溃，无乳头溢血和溢液。左乳乳晕下可触及三枚樱桃大小不规则肿块，活动度可，边界清，有囊性感，无压痛，挤压未见液体自乳头溢出。双侧腋下可触及肿大淋巴结各一枚。右乳未见异常。乳腺彩超：腺体增厚，左侧乳头下方可见三个相邻的以囊性为主的混合型占位，大小分别为0.3cm×0.4cm、0.8cm×1.0cm、1.2cm×1.3cm，边界清，其内及周边可见少许血流信号。双侧腋窝可见淋巴结，右侧大小为1.5cm×0.6cm，左侧大小为1.2cm×0.8cm。2011年5月6日在全麻下行左乳腺体切除术，术中见肿块形状不规则，质软，包膜完整，与周围组织无粘连。快速冰冻报告：男性乳腺发育，伴导管内乳头状瘤。术后病理回报告：男性乳腺发育，男性导管内乳头状瘤伴不典型增生。免疫组化染色：CK5/6(+)，Calponin(+)，34βE12(部分+)，SMA(部分+)，P63(+)，CD34(血管+)。

乳腺导管原位癌浸润机制的研究进展

乳腺导管原位癌(DCIS)是可以治愈的早期癌症。近年来,人们一直认为DCIS是浸润性导管癌(IDC)的非专一性前体,识别出哪些DCIS具有进展能力,并发掘其进展机制是该领域的重要研究方向。肿瘤微环境被认为是肿瘤进展的重要参与者。在疾病发展过程中,构成微环境的细胞中存在显著的基因表达和表观遗传学改变,可作为治疗的生物标志物和靶点。此外,通过分析DCIS和IDC的基因表达谱发现两者具有很高的基因组相似性,但仍检测出一些质的差异,表明在某些样本中发生了从DCIS到IDC的进展。

甲状腺微小癌手术切除范围探讨与临床分析

甲状腺癌是人体内分泌系统最常见的恶性肿瘤，早期诊断及治疗至关重要。彩超技术的不断发展使甲状腺微小癌（thyroid microcarcinoma，TMC）的诊断率不断提高，但TMC（癌灶最大直径≤10mm）在手术方式的选择上尚有争议。我院2004年1月至2008年8月我院收治TMC患者48例，分析报告如下。

核转运蛋白基因2在乳腺癌发生发展中的作用

核质转运参与多种细胞生物学进程,如基因表达、细胞周期进展、细胞凋亡以及信号转导等。分子量大于40000的蛋白质通过核孔复合体主要依靠核转运蛋白。核转运蛋白基因2(KPNA2)是核胞质转运蛋白α家族的七个成员之一,在大分子的核转运中起至关重要的作用。大分子物质的核转运通过促进肿瘤细胞进展和恶性细胞转化而改变细胞表型。KPNA2在乳腺癌肿瘤组织中的表达上调,且KPNA2的异常表达与患者的预后差相关,提示KPNA2在肿瘤形成和进展过程中扮演重要角色。

p53作为乳腺癌潜在生物标志物和治疗靶点的研究进展

p53在浸润性乳腺癌中极易发生突变,但其还未被应用于乳腺癌的诊疗。目前,已有几种以p53为治疗靶点的化合物在乳腺癌的动物模型和临床前模型中表现出了抗癌活性。其中,PRIMA-1、APR-246、PK11007、PK7088和COTI-2可以通过不同方式,如与p53蛋白结合,重新激活突变型p53,以及将突变型p53结构改变使其转化为野生型构象,来抑制突变型p53乳腺癌细胞的增殖。且研究中均未发现重大不良反应。这使得p53作为乳腺癌的生物标志物和治疗靶点成为可能。未来,应进一步研究PRIMA-1、APR-246等化合物的具体作用机制,以明确它们与其他现有疗法是否具有相互作用及它们在临床试验中的具体疗效。

Cyclin D1与乳腺癌的相关研究

细胞周期的失调控是乳腺癌进展的一个早期事件,细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)是参与细胞周期进展的重要因素之一,它在正常乳腺组织中正常表达,在乳腺癌组织中过表达,导致细胞周期调控失调,它是参与乳腺癌细胞早期形成和生长的癌基因。乳腺癌中β联蛋白的异常表达可通过Cyclin D1来激活,并且Cyclin D1的过表达与雌激素受体阳性表达呈正相关。Cyclin D1在乳腺癌中的表达情况对乳腺癌的分期、分级、乳腺癌的治疗(包括放疗、化疗、靶向治疗)选择以及预后判断均有重要意义。

E-cadherin在乳腺癌诊疗中的研究进展

上皮钙黏素(E-cadherin)是上皮来源肿瘤细胞侵袭、增殖及转移的有效抑制因子,在乳腺癌的发生发展过程中至关重要。乳腺癌患者肿瘤组织中E-cadherin表达降低较为常见,而血清中可溶性E-cadherin却异常增多。肿瘤组织中E-cadherin异常表达的程度与乳腺癌的临床病理因素和分子病理因素有关,在不同的组织学类型或不同分子分型乳腺癌中有显著差异,并且影响患者的预后。E-cadherin的异常表达对于判断乳腺癌类型及预后有重要的作用,其可能是乳腺癌患者有价值的治疗靶点。

突变体p53相关的复合物在乳腺癌中的作用

乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤,通常可以在其最具侵袭性的亚型中检测到p53突变。而最多见的p53突变是错义突变,最终导致突变体p53蛋白在癌细胞中的高表达。突变体p53蛋白不仅丧失野生型p53蛋白的肿瘤抑制活性,还获得了新的致癌能力,它还可以通过影响乳腺癌细胞的胞吞胞吐改变基因表达。而突变体p53最主要的致癌活性是介导与其他转录因子或转录不直接相关的蛋白质形成异常复合物,而这些复合物与突变体p53的作用是目前靶向治疗的关键。

三阴性乳腺癌的治疗进展

三阴性乳腺癌(TNBC)是雌激素受体、孕激素受体以及人表皮生长因子受体均为阴性的乳腺癌。相对于其他乳腺癌亚型,其具有侵袭性强、恶性程度高、患者预后差、辅助治疗后复发转移率高等特点。TNBC对化疗较为敏感,治疗仍以细胞毒性药物为主。近年来,随着肿瘤分子生物学研究的深入,分子靶向治疗成为近几年乳腺癌研究和关注的焦点。该文就TNBC的治疗进展作一综述。