表达Cre酶复制缺陷型重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建Cre-loxP条件性基因敲除系统中Cre酶的重组腺病毒表达载体,作为体细胞条件性基因敲除的基础,并为传统ES细胞条件性基因敲除提供新的选择。方法用pAd-easy系统在大肠杆菌内经同源重组的方法构建Cre酶的复制缺陷型重组腺病毒载体;W estern b lot方法鉴定Cre蛋白的表达。结果在大肠杆菌内构建出重组腺病毒质粒,在包装细胞系内包装出重组病毒颗粒;测定病毒滴度为106pfu/L;重组病毒在细胞内表达Cre蛋白。结论表达Cre酶的重组腺病毒载体构建成功,阳性重组质粒的鉴定方法得以改进,为进一步的体细胞Cre-loxP条件性基因敲除提供了基础。

SARS冠状病毒RNA依赖的RNA聚合酶的原核和真核表达

目的:在大肠杆菌中表达和纯化重组RDRP蛋白,观察RDRP蛋白在293细胞中的表达及亚细胞定位。方法:构建原核表达质粒pGEX-4T-1-RDRP,实现插入基因的融合表达,经GST亲合层析纯化蛋白。构建真核表达载体pCMV-myc-RDRP瞬时转染293细胞,转染48 h后免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察蛋白表达及定位以及WesternBlotting检测。结果:成功构建了表达RDRP融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌内高效表达,纯化后得到分子量约为121 kDa的融合蛋白。RDRP蛋白在293细胞中高效表达,主要分布在细胞质。结论:获得了重组GST-RDRP融合蛋白,为进一步探讨RDRP的功能奠定基础,在真核细胞中过表达的RDRP蛋白主要定位在细胞质。

人细胞因子受体样因子3在真核及原核细胞中的表达

目的:观察CRLF3蛋白在293T细胞中的表达及亚细胞定位,并在大肠杆菌中表达和纯化了重组CRLF3蛋白。方法:将真核表达载体pCMV-myc-CRLF3瞬时转染293T细胞,转染24 h和48 h后免疫荧光染色,共聚焦显微镜观察蛋白表达及定位;构建原核表达质粒pGEX-4T-1-CRLF3,实现插入基因的融合表达,经GST亲合层析纯化蛋白。结果:CRLF3蛋白在293T细胞中高效表达,主要分布在细胞质和细胞膜;成功构建了表达CRLF3融合蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌内高效表达,纯化后得到Mr约为74 000的融合蛋白。结论:在真核细胞中过表达的CRLF3蛋白主要定位在细胞质和细胞膜;获得了重组GST-CRLF3融合蛋白,为进一步探讨CRLF3的功能奠定基础。

脂质代谢调控机制及相应药物研究进展

高脂血症的发病机制复杂,虽然目前临床上有许多降脂药物,但其适用范围有限且不良反应明显。寻找作用显著、不良反应少的降脂药物是新药研发的热点。目前针对降脂药物的研究集中于调控外源性脂质吸收、内源性脂质合成及脂质的转运和代谢等方面。在调节脂质吸收方面,现有研究主要集中在对总胆固醇吸收的调节,而对甘油三酯的研究较少,且没有发现新的药物靶点;在抑制脂质合成、转运和代谢方面,针对固醇调节元件结合蛋白、ATP柠檬酸裂解酶、低密度脂蛋白受体、前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin-9、胆固醇7α-羟化酶等新靶点,相应药物的开发多处于动物研究阶段,且已有研究缺乏与已上市降脂药物的药效学比较。

基于全极化微波遥感的干旱区典型绿洲盐渍化信息提取

采用Krogager、Pauli两种极化目标分解方法,分别构建基于支持向量机(Support Vector Machine,SVM)的分类模型(分别简称Krogager-SVM和Pauli-SVM),以渭干河-库车河三角洲绿洲地区(渭-库绿洲)为研究区域,利用全极化合成孔径雷达(Polarimetric Synthetic Aperture Radar,Pol SAR)遥感影像数据,进行干旱区典型绿洲不同程度盐渍化信息的提取研究。结合野外实地验证数据,将两种模型的分类结果与传统SVM分类作对比分析。结果表明,Krogager-SVM和Pauli-SVM模型改善了传统干旱区盐渍化分类方法,其总体精度从74.17%(传统SVM)分别提高到了80.598 0%和82.387 6%,分别提高了6.43个百分点和8.21个百分点(Kappa系数分别提高0.08和0.12)。表明本研究所提出的分类模型在Pol SAR数据的盐渍化信息提取方面有着一定的潜力。

塔里木河流域草地净初级生产力时空分异特征研究

采用MODIS数据和改进的光能利用率模型(CASA模型)对2006-2016年塔里木河流域植被生长季草地净初级生产力(NPP)进行估算,通过一元线性回归趋势分析、变异系数、Hurst指数等方法,分别从时间特征、空间特征、空间稳定性和未来变化趋势4个方面对其时空变化过程进行分析,阐述了2006-2016年塔里木河流域草地NPP的时空格局与变化特征。结论如下:1)时间特征上,2006-2016年塔里木河流域草地NPP总体呈波动上升趋势,其中增长区域占64.1%,负增长区域占35.9%,NPP总量平均增长速度为1.31×1011 g C·m-2·yr-1;6-8月为流域内草地的主要生长期,NPP总量占生长季总量的47.3%。2)空间特征上,2006-2016年塔里木河流域草地NPP分布呈现明显空间分异特征,总体分布特征为西北向东南呈递减趋势,草地NPP多年平均值为13.62 g C·m-2·yr-1。在垂直变化(海拔)上,呈现出随海拔升高NPP呈“降低-升高-降低”的特点;在水平变化上(经、纬度),草地NPP变化没有明显特征。3)空间稳定性上,塔里木河流域草地NPP变异系数介于0.19~3.17。草地NPP存在明显的空间差异性,草地NPP变异系数大部分地区均属于低值区,其中变异系数在0.5以下的占总面积的94.6%。高波动区域主要集中在“四源一干”和车尔臣诸小河流域。4)未来变化趋势上,塔里木河流域草地NPP Hurst指数介于0.10~0.97,均值为0.57。未来变化趋势呈持续性特征面积占71.6%,反持续性特征面积占28.4%,除开孔河流域北部及车尔臣诸小河西南大部呈反持续性特征,其余草地均呈现出持续性特征,预示着流域草地NPP未来处于持续增加趋势。草地NPP时空分布特征显示,塔里木河流域草地生态系统健康状况总体好转,局部恶化。

基于全极化Radarsat-2数据的干旱区典型绿洲盐渍化信息提取

土壤盐渍化不仅破坏了当地的自然生态环境,而且严重影响着可持续发展。为了对干旱区盐渍地进行有效、实时的监测,利用全极化合成孔径雷达PolSAR(Polarimetric Synthetic Aperture Radar)遥感数据进行盐渍地信息的提取。提出对以渭-库绿洲为研究区的全极化Radarsat-2数据进行Pauli分解和H/A/α分解,获取其极化特征分量。在此基础上,利用支持向量机(Support Vector Machine)、最小距离分类(Minimum Distance Classification)以及最大似然分类(Maximum Likelihood Classification)方法进行监督分类,并对分类结果进行对比分析。研究结果表明,极化分解方法在盐渍化监测中具有较好的研究潜力,基于Pauli和H/A/α分解的SVM分类方法更适用于PolSAR数据盐渍地信息的高精度提取。

中医“芳香辟秽”理论指导下芳香精油在农业生态种植中的应用潜力

为防治病虫害的高发,实现农业种植中作物的高产,大量化学农药的施用已成常规,由此造成严重的土壤环境污染、农药残留和不可预估的栽培作物品质和商品价值的降低。在人们日益关注食品安全和环境保护的当今时代,从自然界中寻求具有较强天然抗菌活性、低毒和较低环境不良反应的天然产物对于作物病害管理至关重要。如何高效寻找此类物质,研究其对病原菌的作用机制,并将之应用于农业种植领域是研究的重点。芳香药物自古就被认为具有“辟秽”“除恶”作用,芳香所辟之“秽”是各种无形、有形之秽,芳香辟秽理论在医学方面针对抗病原微生物实际应用历史悠久。那么,该理论在农用微生物上是否依然奏效?挥发油,又称为芳香精油,是具有芳香气味的植物次生代谢产物。鉴于挥发油中具有复杂多样的对多种致病菌有抑菌活性的化学物质,在自然界中能降解成为非毒性物质,因此对环境保护及农业生态系统可持续发展更为有利,故提出“芳香辟秽”理论指导下的中医农业发展理念,并结合前期研究,对不同来源植物的挥发油及其主要活性成分、作用机制及在农业生态系统中的应用进行总结,以期使挥发油真正为农业生态种植保驾护航。

黑色马铃薯 价格高数倍

新疆维吾尔自治区东部名城吉木萨尔县大有镇农民从地里刨出“黑疙瘩”,摇身一变成了“金蛋蛋”。去年,吉木萨尔县大有镇农民将土地流转,通过参加种植专业合作社,引种黑色马铃薯,从中受益。 大有镇村民云吉燕表示,大有镇推行合作社发展特色种植,带动周边农民致富,吸引了不少进城务工人员返乡参与发展特色种植。

酵母三杂交技术的应用策略及在病毒研究中的应用

从酵母双杂交系统衍生出来的酵母三杂交系统是一种主要用于研究细胞内RNA-蛋白质相互作用强大的技术方法,也为病毒相关研究,尤其为研究病毒生活史中病毒RNA与病毒蛋白和宿主细胞蛋白的相互作用提供了新的工具。本文重点介绍了此种形式的酵母三杂交系统的原理、缺陷、应用和应用策略。另外,本文还介绍了同时发展起来的另外两种形式的酵母三杂交系统,即分别用于研究小分子配体-受体相互作用、复杂蛋白质相互作用的酵母三杂交系统。

“一带一路”典型绿洲城市扩张特征研究——以乌鲁木齐市为例

为了探究"一带一路"重要节点中典型绿洲城市的扩张特征,该文以乌鲁木齐市为例,应用DMSP/OLS夜间灯光数据和统计数据,采用二分法提取建成区范围,选取扩张速度、紧凑度、分型维数、城市扩张弹性系数等指标,运用扇形分析、同心圆分析等方法,探究典型绿洲城市扩张的时空特征;结合统计数据等分析城市扩张的驱动机制。研究结果表明:乌鲁木齐市建成区面积在1993—2013年20年间从64 km^2扩张到428 km^2,净增约6.69倍。城市扩张经历了由中速到高速扩张,由分散到集中扩张,重心由东向西、由南向北扩张转移的过程。研究发现,在扩张过程中,城市扩张弹性系数从1.96增加至7.93,城市人地关系不和谐程度加剧,城市布局的合理性有待提升,边界趋于简单化。

青龙制动方治疗小儿抽动症的网络药理学研究

应用网络药理学方法预测青龙制动方治疗小儿抽动症(TS)的作用与机制。方法:通过TCMSP,TCMID数据库筛选青龙制动方主要有效成分和相关的蛋白靶点,通过uniport数据库转换为对应的基因靶点。同时,通过disGENT和OMIM数据库筛选并整理出于TS相关的基因靶点,并将药物相关靶点与疾病靶点相互映射,通过Cytoscape3.7.2可视化筛选出核心基因,对交集基因进行蛋白质相互作用网络构建、GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。结果:青龙制动方中药-成分-靶点-疾病网络包括5味中药、555种活性成分和354个疾病靶点。其中核心基因有BDNF、MET、SLC2A1、TNF、DRD1、DRD2、DRD3和GSK3B等。GO功能富集分析共得到条目34个,KEGG通路富集分析筛选出7条信号通路。结论:青龙制动方主要涉及化学突触传递、神经递质水平的调节、单胺运输等生物过程,通过调节神经活性配体-受体相互作用、多巴胺能突触、色胺能突触等多条信号通路来发挥治疗TS的作用。本研究体现了青龙制动方多成分?多靶点?多途径的作用特点,为进一步扩大青龙制动方的临床应用提供了理论基础。

乌鲁木齐建成区扩张及植被的演变特征

针对乌鲁木齐市建成区扩张及其内部生态环境发生变化的问题,该文选取1993年、2003年和2013年的DM_SP/OLS夜间灯光数据、2018年的NPP-VIIRS夜间灯光数据以及Landsat影像,利用二分法、归一化植被指数分析等方法,研究乌鲁木齐市建成区扩张及其植被状况的时空演变特征。结果表明:乌鲁木齐市建成区呈现"T"型扩张的同时也向北延伸,其扩张速度和动态度分别为40.28km^2/a、23.98%,均属于高速扩张类型。乌鲁木齐市建成区重心在1993—2003年向西转移了1 577.60m;2003—2013年向西北方向转移了2 584.54m;2013—2018年向东北方向转移了1 232.59m。建成区内的植被呈现先升高后急剧降低的趋势,由1993年的419.70下降到2018年的-18.20,且NDVI均值变化量为负值,说明该建成区内的植被状况在逐渐变差。