虫草素对脓毒症幼鼠急性肝损伤的改善作用

目的 探讨虫草素(Cor)对脓毒症幼鼠急性肝损伤的改善及对肝细胞自噬的影响。方法 将65只SD幼鼠随机分为假手术组、模型组、Cor低剂量组和Cor高剂量组,Cor低剂量、Cor高剂量组分别灌胃给予10、20 mg·kg^(-1)虫草素,1日1次,连续7 d;假手术组、模型组灌胃等量生理盐水,除假手术组外,其余各组复制脓毒症幼鼠模型。检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;ELISA检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6含量;计算肝脏指数;HE染色观察幼鼠肝组织病理变化;TUNEL法检测幼鼠肝组织细胞凋亡;Western blot检测自噬相关蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组、Cor低剂量、Cor高剂量组ALT、AST和LDH水平升高,血清TNF-α、IL-1β和IL-6含量增加,细胞凋亡率升高(P<0.05);与假手术组比较,模型组、Cor低剂量组肝脏指数升高(P<0.05),模型组微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin1相对表达量降低,p62相对表达量升高(P<0.05),Cor高剂量组LC3-Ⅱ、Beclin1相对表达量升高,p62相对表达量降低(P<0.05);与模型组比较,Cor低剂量、高剂量组ALT、AST、LDH水平、肝脏指数和细胞凋亡率降低,TNF-α、IL-1β和IL-6含量减少,LC3-Ⅱ、自噬基因Beclin1相对表达量升高,p62相对表达量降低(P<0.05);与Cor低剂量组比较,Cor高剂量组ALT、AST、LDH水平、肝脏指数和细胞凋亡率降低,TNF-α、IL-1β和IL-6含量减少,LC3-Ⅱ、Beclin1相对表达量升高,p62相对表达量降低(P<0.05);HE染色显示,假手术组肝细胞细胞核圆且大,细胞排列整齐、分布均匀,肝小叶欠清晰,炎症细胞浸润较少;模型组肝细胞排列紊乱、肿胀甚至出现坏死,肝小叶结构破坏,出现灶性松散的炎症细胞浸润;Cor低剂量、高剂量组肝细胞排列相对整齐,炎症细胞浸润减轻,肝小叶结构相对清晰,Cor高剂量组肝细胞结构、排列更清晰,炎症细胞浸润更少。结论 Cor可以显著改善脓毒症幼鼠的急性肝损伤症状并诱导肝细胞自噬。

乌司他丁对过氧化氢诱导的肠上皮屏障损伤的保护作用

背景:肠上皮细胞间紧密连接的破坏及其所致的肠黏膜屏障功能受损在一系列胃肠道疾病的发生、发展中起重要作用。目的:探讨乌司他丁对过氧化氢(H_2O_2)诱导的肠上皮屏障损伤的保护作用。方法:以Caco-2细胞体外培养制备肠单层上皮屏障模型,将其分为空白对照组(不予干预)、H_2O_2组(500μmol/L H_2O_2)和低浓度(500 U/mL)、高浓度(3 000 U/mL)乌司他丁治疗组并予相应处理。检测丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性,以跨上皮细胞电阻(TEER)和荧光素钠透过率评估上皮屏障功能,蛋白质印迹法和免疫荧光法检测紧密连接蛋白ZO-1、occludin的表达和定位,透射电镜观察紧密连接超微结构。结果:与空白对照组相比,H_2O_2组Caco-2细胞单层上皮MDA水平、荧光素钠透过率明显升高,SOD活性、TEER、ZO-1和occludin蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。透射电镜观察和免疫荧光法检测显示H_2O_2组细胞刷状缘受损,细胞间连接模糊,ZO-1、occludin蛋白分布断续不完整,荧光强度低。乌司他丁治疗组上述指标均较H_2O_2组显著改善(P<0.05),高浓度组改善更为明显。结论:乌司他丁对H_2O_2诱导的肠单层上皮屏障损伤有一定保护作用,其机制可能与其抗氧化活性以及调节紧密连接蛋白表达和分布有关。

连续性血液净化对脓毒症患儿CD64、降钙素原、C-反应蛋白及NLR的影响

目的:探究连续性血液净化(CBP)对脓毒症患儿中性粒细胞表面CD64、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)及中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)的影响。方法:选取本院收治的脓毒症患儿55例为研究对象,分为对照组30例(常规治疗)和试验组25例(对照组基础上同时给予CBP治疗)。观察两组临床疗效及治疗前后各时间点外周血中CD64、PCT、CRP、NLR的变化情况。结果:试验组总有效率92.00%显著高于对照组66.67%(P<0.05);治疗后12 h、24 h、3 d、5 d,两组患儿外周血中CD64、PCT、CRP、NLR水平均逐渐下降,且均低于治疗前(P<0.05);治疗后两组间任一相同时间点比较,试验组外周血中CD64、PCT、CRP、NLR水平均明显低于对照组(P<0.05)。两组治疗期间体温无明显变化,组间/组内比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:CBP能有效调节机体免疫平衡,尽快纠正脓毒症患儿血清炎症介质CD64、PCT、CRP、NLR水平,降低炎症反应,疗效显著。

连续性静脉-静脉血液透析滤过对严重脓毒症患儿凝血功能、细胞免疫功能及短期预后的影响

目的探讨连续性静脉-静脉血液透析滤过(CVVHDF)对严重脓毒症患儿凝血功能、细胞免疫功能及短期预后的影响。方法选取2016年1月至2019年12月保定市儿童医院收治的58例严重脓毒症患儿为研究对象,其中按照脓毒症治疗指南行常规治疗30例(常规治疗组),在常规治疗基础上行CVVHDF治疗28例(CVVHDF组)。比较两组患儿入住儿科重症监护病房(PICU)时间及机械通气时间,治疗前及治疗1、3、5 d后外周血纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、D-二聚体、T淋巴细胞亚群水平以及小儿危重病例评分(PCIS)、脓毒症相关性器官功能衰竭评分(SOFA),28 d存活情况等,并采用logistic逐步回归分析严重脓毒症患儿28 d死亡的影响因素。结果CVVHDF组患儿入住PICU时间及机械通气时间均明显短于常规治疗组(均P<0.05)。两组患儿治疗前外周血FDP、D-二聚体、T淋巴细胞亚群水平及PCIS、SOFA比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。随着治疗时间的推移,两组患儿外周血FDP、D-二聚体、CD8^(+)细胞比例及SOFA均逐渐下降(均P<0.05),CD3^(+)细胞比例、CD4^(+)细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)及PCIS均逐渐升高(均P<0.05)。CVVHDF组治疗5 d后外周血FDP、D-二聚体均低于常规治疗组,CD4^(+)/CD8^(+)、PCIS均高于常规治疗组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。58例严重脓毒症患儿28 d死亡40例,病死率为69.0%;治疗方式、治疗5 d后PCIS及D-二聚体水平是严重脓毒症患儿28 d死亡的独立影响因素(均P<0.05),其中采取CVVHDF治疗是保护因素(OR=0.007)。结论CVVHDF能进一步纠正严重脓毒症患儿的凝血功能异常,减轻免疫抑制状态,促进免疫平衡恢复,对短期预后的改善具有一定的作用。

姜黄素对肺炎支原体感染肺炎幼鼠抗炎作用及机制初步探讨

目的基于NF-κB途径探讨姜黄素对肺炎支原体感染肺炎幼鼠抗炎作用及机制初步探讨。方法选取50只SPF级BALB/c小鼠随机分为五组,分别为空白对照组(A组)、模型组(B组)、姜黄素高剂量组(C组),姜黄素中剂量组(D组)和姜黄素低剂量组(E组),模型组及姜黄素治疗组采用肺炎支原体标准株滴鼻法进行建模,HE染色观察肺脏病理组织学变化;免疫组化染色测定肺组织中NF-κB p65阳性细胞的积分光密度;采用Western blot实验检测肺组织中NF-κB p65蛋白表达变化;使用ELISA法检测IL-6、IL-8和TNF-α水平。结果模型组小鼠肺组织病理改变明显,姜黄素高剂量组小鼠肺组织与模型组相比,小鼠肺泡结构比较完整,肺泡与气管结构清晰,炎细胞明显减少,姜黄素中剂量组对小鼠有一定的治疗效果,姜黄素低剂量组小鼠和模型组小鼠比较并无明显差异;与空白对照组相比,模型组小鼠肺组织中NF-κB p65的IOD值、NF-κB p65蛋白表达和支气管灌洗液中IL-6、IL-8和TNF-α表达明显升高(P<0.01),与模型组小鼠相比,姜黄素高剂量组和姜黄素中剂量组小鼠肺组织中NF-κB p65的IOD值、NF-κB p65蛋白表达和支气管灌洗液中IL-6、IL-8和TNF-α表达明显降低(P<0.01)。与模型组小鼠相比,姜黄素低剂量组与模型组小鼠肺组织中NF-κB p65的IOD值、NF-κB p65蛋白表达和支气管灌洗液中IL-6、IL-8和TNF-α表达相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论姜黄素可改善肺炎支原体感染幼鼠症状且能够抑制炎症因子,其机制可能是通过抑制NF-κB通路的激活,表明姜黄素可作为治疗肺炎支原体感染的潜在药物。

保定地区重症肺炎患儿病原学检测及病例流行病学分析

目的对河北保定地区重症肺炎患儿进行病原学检测及病例流行病学分析,为临床治疗肺炎提供参考。方法回顾性分析确诊为肺炎的重症患儿57例,对呼吸道分泌物进行细菌及病毒相关的病原学检测,分析其流行病学相关性。结果经统计痰细菌培养结果显示共存在7种致病菌,检出率为36.8%。6月龄内儿童多发的两种细菌为金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌,其病发例数为18例。病毒检查结果显示阳性患者48例,阳性率为84.2%,主要为呼吸道合胞病毒,常见于<3月龄儿童。支原体感染仅有1例患者。春季及冬季病原体感染例数分别是18例(31.6%)和21例(26.8%),显著高于夏季及秋季病发程度(P<0.05)。结论保定地区重症患儿肺炎主要集中于在春冬季节,多见于<6月龄儿童。大部分患者均有一定程度的病毒感染,常见为呼吸道合胞病毒;一部分患者受细菌感染,主要为金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌两种细菌。

乌司他丁对乙醇诱导的肠黏膜屏障损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁对乙醇诱导的肠黏膜屏障损伤的保护作用。方法培养Caco-2细胞至形成肠上皮细胞屏障模型,分为空白对照组、乙醇组(终体积浓度10%)和不同浓度乌司他丁治疗组(750 U/mL、1 500 U/mL、3 000 U/mL)。测定单层上皮的跨上皮细胞电阻(TEER)及荧光素钠透过率,免疫荧光法及蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测紧密连接蛋白ZO-1在细胞单层的定位及表达量,透射电镜观察细胞紧密连接的超微结构。结果与对照组对比,乙醇组单层细胞的TEER降低(P<0.001);荧光素钠透过率升高(P<0.001);免疫荧光检测显示ZO-1蛋白表达断续不完整,荧光强度弱;Western blot检测显示ZO-1蛋白表达水平降低(P<0.001);透射电镜结果示细胞刷状缘受损,排列紊乱,细胞间连接模糊。乌司他丁治疗组的上述指标均改善(P均<0.05),其中3 000 U/mL乌司他丁组的改善最明显(P均<0.05)。结论乌司他丁对乙醇诱导的肠单层上皮细胞屏障损伤具有保护作用。

姜黄素对肠上皮细胞屏障的保护作用

肠黏膜是机体最重要的防御屏障。其选择性吸收氨基酸、维生素、离子等营养物质，阻止肠腔内有害物质如细菌或毒素等穿过肠黏膜进入血液循环和其它组织器官。各种病理情况均能导致肠黏膜屏障功能受损，致使有害物质入血循环引发严重脓毒症、败血症，甚至多脏器功能衰竭。笔者现就姜黄素（Cur）对乙醇诱导的肠上皮屏障损伤的保护作用进行探讨，报道如下。

持续血液净化治疗儿童重症急性胰腺炎1例

重症急性胰腺炎由于多伴有严重的全身炎性反应,免疫功能紊乱,水、电解质及酸碱平衡失调,甚至多系统器官功能障碍,在儿童中并不常见,但病死率却较高,在儿童中可高达50%[1]。如今在综合治疗的基础上,加持续性血液净化取得较好的效果[2]。现通过病例报道介绍持续血液净化在儿童重症急性胰腺炎治疗中的作用。1病例资料患儿,男,4岁,因腹痛7 h,呕吐、青紫5 h,意识淡漠0.5h,于2016年3月24日入院。入院查体：T正常,P 170次/min,

血浆置换联合连续性血液净化在儿童溶血危象中的应用

探讨血浆置换联合连续性血液净化在儿童溶血危象中的应用效果。对自身免疫性溶血性贫血发作溶血危象患儿1例进行血浆置换联合连续性血液净化治疗。经治疗后,患儿各项指标恢复正常,康复出院。治疗溶血危象的患儿,在一般治疗基础上采用血浆置换联合连续性血液净化,疗效显著。

2015-2016年保定地区重症肺炎儿童病原分布特点及药敏结果分析

目的分析保定地区重症肺炎患儿病原分布特点及药敏情况,为临床抗生素合理应用提供依据。方法回顾性分析2015年9月-2016年3月保定市儿童医院儿科重症监护病房(PICU)收治的116例重症肺炎患儿痰液标本病原学检测结果及药敏试验结果。结果 116例痰液标本中病原学检测阳性患者87例(75.00%)。呼吸道病毒抗原统计结果显示:阳性81例(69.83%),其中呼吸道合胞病毒68例(58.62%)、腺病毒6例(5.17%)、流感病毒7例(6.03%)。痰细菌培养结果:阳性38例(32.76%),其中金黄色葡萄球菌16例(13.79%)、大肠埃希菌7例(6.03%)、肺炎克雷伯菌9例(7.76%)、肺炎链球菌4例(3.45%)、阴沟肠杆菌1例(0.86%)、植生乌拉尔菌1例(0.86%)。肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺的敏感率均为100.00%;肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南的敏感率均较高,分别为88.89%、88.89%、100.00%,85.91%、100.00%、100.00%。结论保定地区儿童重症肺炎病原学检测阳性率较高,以病毒为主,但细菌感染也较多,临床需根据病原学检测结果及耐药情况选择相应的药物干预。

280例CAP住院患儿病原学分析及其预后影响因素分析

目的分析社区获得性肺炎(CAP)住院患儿的病原学特点及影响其预后的因素。方法选择保定市儿童医院儿科于2014年2月-2016年9月收治的CAP患儿作为研究对象,同时根据治疗后的预后状况分为预后良好组和预后不良组。对入组患儿血液及呼吸道分泌物进行分离培养,鉴定其中病原微生物,同时采用多因素Logistic回归分析方法分析影响CAP患儿预后的因素。结果肺炎支原体是CAP住院患儿的主要病原。呼吸道合胞病毒是CAP住院患儿主要感染的病毒类型,占50%以上。肺炎链球菌感染是CAP住院患儿感染的最主要细菌类型。年龄<3岁(OR=0.298,95%CI:0.128~0.692)及心功能不全(OR=0.690,95%CI:0.555~0.858)是CAP住院患儿预后良好的不利因素;有创机械通气治疗(OR=2.257,95%CI:1.709~2.981),初始抗菌联合用药(OR=1.587,95%CI:1.135~2.219)是CAP住院患儿预后良好的有利因素。结论 CAP住院患儿病原构成比从高到低依次为支原体、病毒和细菌,有利于预后的因素包括有创机械通气和初始抗菌联合用药。

外周血部分检验项目对脓毒症患儿短期预后的预测价值

目的探讨脓毒症患儿短期预后的影响因素及外周血中性粒细胞CD64、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、中性粒细胞和淋巴细胞比值(NLR)对其的预测价值。方法回顾性分析2016年1月1日-2019年12月31日某院PICU收治的75例脓毒症患儿的临床资料,比较不同严重程度脓毒症患儿入院24小时危重病例评分(PCIS)及各检验指标的差异,24小时PCIS评分与各检验指标的相关性。根据患儿28天病死情况分为死亡组(23例)和存活组(52例),单因素分析比较2组一般资料、检验指标等的差异,并应用Logistic回归分析脓毒症患儿短期预后的影响因素,同时通过绘制ROC曲线分析早期相关检验指标检测对脓毒症患儿短期预后的预测价值。结果不同程度脓毒症患儿24小时PCIS评分及外周血CD64、PCT、CRP、NLR水平差异均有统计学意义(P<0.05),且均随脓毒症严重程度的加重而呈逐渐上升趋势(P<0.05)。入院24小时PCIS评分与外周血CD64、PCT、CRP、NLR水平均呈显著负相关(P<0.05)。2组患儿在年龄、脓毒症严重程度、是否采取连续血液净化、入院24小时PCIS、多器官功能障碍综合征(MODS)情况、外周血CD64、PCT、CRP、NLR水平方面差异均有统计学意义(P<0.05)。以预后结局(PICU入住28天死亡和存活)为因变量,单因素分析中P<0.1的相关指标为自变量进行Logistic回归分析,结果显示,脓毒症严重程度加重、有MODS、入院24h PCIS降低、外周血CD64、PCT、NLR水平升高是脓毒症患儿28天死亡的独立危险因素,采取连续血液净化是其保护因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,单独检测时,入院24小时外周血CD64预测的AUC值、约登指数、灵敏度最高(0.855、0.625、0.913),PCT预测的特异度最高(0.788);而联合检测AUC、约登指数、特异度均高于单独检测(0.962、0.711、0.885)。结论脓毒症患儿短期预后的影响因素较多,应对入院24小时外周血CD64、PCT、CRP、NLR水平进行早期监测,对脓毒症患儿短期预后具有较高的预测价值,而早期积极采取连续血液净化,有利于改善脓毒症患儿的临床预后。