目的基于自动化移液工作站和超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry,UHPLC-QqQ-MS/MS),建立同时测定人体尿液中31种抗生素的方法,准确、快速地...目的基于自动化移液工作站和超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry,UHPLC-QqQ-MS/MS),建立同时测定人体尿液中31种抗生素的方法,准确、快速地测定尿液中多种抗生素含量。方法根据样本基质特点和目标物质理化性质,对仪器分析参数和前处理条件进行了优化。取1.0 ml尿样于96孔样本收集盘中,加入乙酸铵缓冲液和β-葡萄糖醛苷酶于37℃水浴过夜。采用Oasis HLB 96孔固相萃取板对样本进行富集萃取,洗脱液氮吹浓缩后用30%甲醇溶液定容,ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱分离,多反应监测模式下测定,采用内标法定量。结果31种抗生素在0.2~20.0μg/L的浓度范围内显示出良好的线性关系(r^(2)>0.990),方法检出限和定量限(limit of quantification,LOQ)范围分别为0.03~0.25μg/L和0.09~0.83μg/L。在3个不同浓度水平下,加标回收率范围为65.7%~115.4%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)为0.9%~17.4%。应用该方法对50份尿样进行检测,共检出13种抗生素,其中萘啶酸、磺胺二甲唑、强力霉素和红霉素检出率均>50%,浓度范围<LOQ~6.78μg/L。结论该方法实现了样本前处理过程的自动化,可同时检测多种抗生素指标,具有操作简便、回收率高和检出限低等优点,适合大批量人尿抗生素的检测。展开更多
文摘目的基于自动化移液工作站和超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(ultra-high performance liquid chromatography-triple quadrupole tandem mass spectrometry,UHPLC-QqQ-MS/MS),建立同时测定人体尿液中31种抗生素的方法,准确、快速地测定尿液中多种抗生素含量。方法根据样本基质特点和目标物质理化性质,对仪器分析参数和前处理条件进行了优化。取1.0 ml尿样于96孔样本收集盘中,加入乙酸铵缓冲液和β-葡萄糖醛苷酶于37℃水浴过夜。采用Oasis HLB 96孔固相萃取板对样本进行富集萃取,洗脱液氮吹浓缩后用30%甲醇溶液定容,ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱分离,多反应监测模式下测定,采用内标法定量。结果31种抗生素在0.2~20.0μg/L的浓度范围内显示出良好的线性关系(r^(2)>0.990),方法检出限和定量限(limit of quantification,LOQ)范围分别为0.03~0.25μg/L和0.09~0.83μg/L。在3个不同浓度水平下,加标回收率范围为65.7%~115.4%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)为0.9%~17.4%。应用该方法对50份尿样进行检测,共检出13种抗生素,其中萘啶酸、磺胺二甲唑、强力霉素和红霉素检出率均>50%,浓度范围<LOQ~6.78μg/L。结论该方法实现了样本前处理过程的自动化,可同时检测多种抗生素指标,具有操作简便、回收率高和检出限低等优点,适合大批量人尿抗生素的检测。
