木本植物开花调节基因的分离克隆及其童期控制

高等植物在萌发后需要经历一定时间的营养生长 ,即童期 ,才能进入生殖发育阶段。控制植物生殖转变调节童期的基因主要有花序分生组织特异基因、花分生组织特异基因、花器官分生组织特异基因。对近几年木本植物开花调节基因的分离克隆及其童期控制研究进行综述 ,对了解木本植物开花基因的作用功能 。

多酚含量及多酚氧化酶活性与柑橘胚性愈伤组织褐化的关系

研究测定了9种不同品种/基因型柑橘胚性愈伤组织的多酚含量和多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)的活性,探讨了其与柑橘愈伤组织褐化的关系。结果表明,不同柑橘品种/基因型间多酚含量和PPO活性明显不同;多酚含量高的宽皮柑橘类胚性愈伤组织容易褐化,葡萄柚与甜橙类次之,说明柑橘胚性愈伤组织褐化与多酚含量成正相关;PPO活性与柑橘愈伤组织褐化无明显相关。

柑橘转基因胚性愈伤组织的筛选与再生

转化子的高效筛选与再生是获得转基因植株的关键。为快速有效地筛选出转化子,并尽可能在较短时间内获得纯合的转基因植株,开展了柑橘胚性愈伤组织的转化研究。以椪柑、冰糖橙、默科特橘橙等胚性愈伤组织为外植体,采用根癌农杆菌介导法进行转化试验,根据愈伤组织再生过程中不同发育阶段的组织对抗生素的敏感程度及在不同筛选压下抗性组织的生长情况,提出了"5步筛选再生法",获得了大量的再生细胞系,并经GUS检测证实为转化子。

TDZ对柑橘胚性组织生长与遗传转化的影响

噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)是一类人工合成的苯基脲衍生物,广泛用于多种植物的组织培养。本文以椪柑胚性愈伤组织和球形胚状体为试材,研究了不同浓度TDZ对柑橘胚性愈伤组织增殖与胚状体发育的影响;在此基础上,研究了TDZ对12种柑橘胚性愈伤组织转化的影响。结果表明,培养基中添加较低浓度的TDZ可促进椪柑胚性愈伤组织的增殖,以0.4mg/L为最佳,超过该浓度则起抑制作用。单独使用TDZ不能促进该品种体胚的发生与再分化,但可促进胚状体体积的增大。在筛选培养基和共培养培养基中附加0.4mg/L TDZ,可明显促进椪柑抗性愈伤组织的增加和提高多种柑橘胚性愈伤组织的GFP瞬时荧光表达率,从而提高转化率。

苹果M_7砧木组织培养与抗性筛选

以M7组培苗为试验材料,进行继代扩繁和卡那霉素抗性筛选研究。结果表明,M7芽苗在MS+4.0 mg/L6-BA+0.3 mg/L IBA(3%蔗糖)固体培养基中继代时,出现严重的玻璃化,而MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA(3%蔗糖)固体培养基可大大改善其玻璃化程度,使其恢复健康生长;卡那霉素对M7叶片再生、新梢增殖、新梢生根均有抑制作用,并且随卡那霉素浓度增加,M7叶片再生率、新梢增殖率、新梢生根率不断下降;M7叶片愈伤组织形成、愈伤组织生根、新梢增殖及新梢生根对卡那霉素的敏感浓度分别为20、5、40、10 mg/L。

南丰蜜橘胚性愈伤组织诱导及其转化研究

南丰蜜橘是原产于中国的古老柑橘品种,其果实皮薄而肉甜,深受消费者喜爱,当前南丰蜜橘的品质发生劣变,影响了其商品价值。为采用基因工程育种以改善南丰蜜橘品质,通过诱导其愈伤组织并以其为试材进行了转基因研究。南丰蜜橘自种子实生苗下胚轴处长产生出愈伤组织,挑选胚性愈伤组织进行增殖后,采用根癌农杆菌介导法进行开花相关基因AP1的转化。结果获得22团抗性愈伤组织,平均产出率为7.3团/皿,表明该品种有较高的转化率。抗性愈伤组织经PCR分析、Southern blot检测证实为转化子。研究结果表明南丰蜜橘胚性愈伤组织是基因工程改良的良好受体,可用于其他基因的转化研究。

柑橘胚性愈伤组织总多酚含量影响因素的研究

研究了甲醇水溶液浓度和浸提时间、品种/基因型、培养时间对柑橘胚性愈伤组织总多酚含量的影响。结果表明,用40%的甲醇溶液在55℃水浴条件下浸提30min,柑橘胚性愈伤组织总多酚的得率最高;总多酚含量受品种/基因型的影响,在所比较的6个柑橘品种/基因型暗柳橙、椪柑、默科特橘橙、无酸甜橙、锦橙和红马叙葡萄柚中,暗柳橙胚性愈伤组织的总多酚含量最高;总多酚含量随培养时间的改变而变化,在培养40d时各品种/基因型胚性愈伤组织的总多酚含量均达到最大值。

高等农业院校大学生科研能力的培养研究

本文针对我校园艺专业本科生科研能力差的问题,提出了高等农业院校大学生科研能力培养的几点建议,营造一个良好的科研环境是前提,教师在教学中要注重学生的科研能力培养,学校也应该重视并加大支持力度,多措并举全面推进才能保障大学生科研能力的培养。

案例教学在“果树生理学”教学中的应用

"果树生理学"是果树学的重要领域,也是园艺专业的重要基础课程。将案例教学法融入"果树生理学"的课堂教学,创建"传统教学-案例教训-实践教学一体化"的教学模式,有利于激发学生的学习兴趣,帮助学生发现、分析、解决问题,从而加深学生对着专业知识的理解和应用能力,显著提高教学效果。

果树学科教师培养科研创新型大学生的探索

将科研融入教学、以科研促进教学,是提高教学质量、培养创新型人才的重要途径。笔者从教师积极参与科研、将科研成果融入课堂教学、指导学生进行科研实践三个方面进行了农业高校科研促进教学的实践,取得了良好的效果。

TPA质构分析硬肉桃果实采后质地变化

应用质地多面分析(TPA)测试法,以硬肉桃品种‘双久红’和常规品种‘川中岛白桃’果实为试材,研究两品种果实采后不同贮藏时间的质地变化。结果表明:随贮藏时间延长,两品种桃果实的硬度、黏力、黏性和咀嚼性均呈先上升后下降的趋势,且相同贮藏时间‘双久红’果实的参数值均极显著高于‘川中岛白桃’(P<0.01);‘双久红’果实的硬度形变量随贮藏时间延长而增加,与对照的呈相反的变化趋势;两品种桃果实的内聚性变化均较平稳,且差异不显著。相关性分析表明,桃果实黏力、黏性、咀嚼性与硬度均存在极显著正相关(P<0.01),弹性、内聚性与其他质构参数之间相关性较差。

光对红肉桃果肉红色形成的影响

为探讨光照是否影响红肉桃果实果肉着色,以青岛市地方红肉桃品种"大把撸"为材料,研究了不同套袋处理对红肉桃果肉糖酸和色素尤其是花青苷含量变化的影响。结果表明:套袋明显抑制了果肉红色的形成,套袋果果实成熟时a*值为10.32,仅为不套袋果的19.4%;但如果套袋果实在采收前15天摘袋,则见光后的果实果肉花青苷合成能力迅速恢复,采收时花青苷含量达到248.85nmol/g,比不套袋果还高27.88%。套袋也降低了红肉桃果肉可滴定酸、可溶性糖、叶绿素和类胡萝卜素含量。认为红肉桃果实果肉红色形成需要光照。

桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD的克隆与分析

从已构建的硬肉桃(Prunus persica L.)双久红果实SSH文库中获得4条铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)基因的ESTs,通过blast比对和电子克隆后进行了序列拼接和经RT-PCR方法,获得桃果实铜锌超氧化物歧化酶基因PpCuZnSOD全长cDNA序列(GenBank登录号:JX217743)。该基因全长665bp,包含一个459bp的ORF(120bp-578bp),编码152个氨基酸,推测蛋白分子量为15.38kDa,理论等电点为5.60。该基因具有典型的高度保守的Cu2+和Zn2+活化中心及特征信号,其氨基酸序列与其他植物的CuZnSOD具有很高的相似性。生物信息学分析结果表明,该蛋白定位于细胞质中,是非跨膜的非分泌性亲水蛋白。二级结构分析结果表明,该蛋白主要由无规则卷曲和延伸链等蛋白质二级结构元件构成,三维结构预测结果显示,PpCuZnSOD有3个转角环和8个折叠构成桶状的活性中心。系统进化分析结果表明PpCuZnSOD与小金海棠(Malus xiaojinensis)sod2同源关系最近,而与荔枝(Lichichinensis)、龙眼(Dimocarpus longan)和拟南芥(Arabidopsis trifoliate)等亲缘关系较远。QPCR结果表明,PpCuZnSOD在幼果中表达量最高,雌蕊和雄蕊次之,花瓣和叶片中表达量最少;果实成熟前后,PpCuZnSOD在硬肉芽变桃双久红果实中的表达量显著高于软肉桃川中岛白桃中的表达量,表明该基因可能在维持果实质地和硬度方面有一定作用。本研究结果为进一步研究该基因在桃果实成熟软化中的作用奠定了基础。

不同负载量对盛果期‘红富士’苹果树光合指标和贮存营养的影响

为探讨盛果期苹果园的适宜负载量与树体光合和贮存营养的关系,以盛果期‘红富士’苹果树为试材,研究了连续3年不同负载量处理对果树叶片光合指标和树体贮存营养的影响。结果表明,各处理间随负载量的增加,叶片的Pn、CE和WUE呈逐渐下降趋势,表现为处理A>处理B>处理C>处理D>处理E。不同处理间叶片的CI和Tr则相反,表现为处理E>处理D>处理C>处理B>处理A;休眠期各处理间枝条和根系的贮存氮素、碳素营养随负载量的增大,呈降低的趋势,且随连续处理年数的增加,贮存营养降低的幅度加大。可见中等水平苹果园盛果期45000～60000kg/hm2的负载量,可保证树体正常的光合作用和较多的贮存营养,有利于连年丰产优质。

苹果郁闭园不同间伐方式对果树群体结构和果实品质的影响

以成龄‘红富士’苹果郁闭园为试材,设计隔行间伐(处理A)、隔株间伐(处理B)、行内隔3去1间伐(处理C)3种处理和对照(CK),研究它们对果树群体结构和果实品质的影响。结果表明:与对照相比,各间伐处理的枝类组成得到了不同程度的优化,叶丛枝、短枝和长枝比例增加,徒长枝比例减小;3个处理的每公顷的总枝量、树冠覆盖率开始时下降明显,以后逐年恢复;处理A的行间交接率明显下降,而处理B的株间交接率下降明显;各处理的叶面积系数降低,叶片变大,百叶厚度增加;果园的通透条件明显改善。间伐处理的果实外观品质如单果重、色泽、着色面积、优质果率均明显的好于对照;果实的内在品质如含糖量增加、滴定酸含量下降、硬度增大,果实的风味和质地等也都优于对照。试验得出结论,适宜的间伐方式可从根本上改善苹果郁闭园的群体结构,提高果实品质,各间伐处理的综合效果以处理B最佳,处理A次之。

杜梨S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因的克隆与生物信息学分析

以杜梨为试材,采用同源序列法和RACE技术对杜梨SAMDC基因进行了克隆,命名为PbSAMDC,GenBank登陆号为:JX624260。生物信息学分析表明,PbSAMDC基因全长1 683 bp,编码358个氨基酸,相对分子量为39.767 7kDa,等电点为4.96;其编码氨基酸同源性分析表明,PbSAMDC基因与MdSAMDC1同源性最高,达到96%,其次是葡萄、甜橙等,同时对该基因的生物活性等进行了讨论,研究对梨属植物SAMDC基因的逆境调控机制和抗逆基因工程育种具有重要意义。

桃果实PpCuZnSOD基因的原核表达、纯化与鉴定

【目的】为了实现桃铜锌超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的高效表达,获得表达稳定、蛋白纯度高、活性强的工程菌,【方法】将前期获得的PpCuZnSOD基因(GenBank登录号:JX217743)重组到原核表达载体pET-32a(+)中,并转化到Escherichia coli BL21(DE3)宿主菌,经IPTG进行诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测,镍柱亲和层析纯化,并采用Brad Ford方法测定融合蛋白浓度,黄嘌呤氧化法分析其酶活。【结果】成功的构建了原核表达载体pET-32a(+)-PpCuZnSOD,并获得分子质量约为35 kDa的诱导表达产物,纯化后融合蛋白浓度为183.7 mg·L-1,活性为5.23×103U·mg-1。【结论】成功构建了桃pET-32a(+)-PpCuZnSOD原核表达载体,表达量高、稳定性强,重组表达产物具有较高CuZnSOD酶活性,为桃CuZnSOD酶的进一步研究奠定了基础。

不同溶质桃果实成熟前后及采后激素处理下硬度和果胶含量的变化

以软肉桃"川中岛白桃"及其硬肉芽变桃"双久红"为试材,研究了桃果实成熟过程中及采后激素处理下硬度和果胶的变化。结果表明,随着果实的成熟,果实硬度下降,果实中螯合可溶性果胶(CSP)和碳酸钠可溶性果胶(SSP)含量下降且与硬度呈显著正相关,而水溶性果胶(WSP)变化不明显,成熟后"川中岛白桃"的硬度明显低于而各果胶含均明显高于"双久红"的。ABA、NAA和乙烯利处理均促进了桃果实硬度的下降而对三种果胶含量的影响各不相同。乙烯利处理后促进了WSP和SSP含量的上升,ABA和NAA处理对各果胶含量的影响在两品种桃果实中有所不同。结论:桃果实硬度与CSP和SSP含量呈显著正相关,ABA、NAA和乙烯利处理可以促进SSP含量的下降从而导致桃果实软化。

抗根肿病大白菜新品种安秀的选育

抗根肿病大白菜品种安秀是以A定矮为母本、以2010-11为父本配制的杂交品种。该品种早熟,定植后55~60 d成熟。株型直立,开展度45~50 cm。叶球叠抱,球高20~22 cm,球径15 cm左右。外叶绿色,中肋白色,15片左右;球内叶淡黄色。平均单株净菜质量1.8~2.2 kg。2017—2018年连续2 a(年)在山东5个试验点春季测试结果:667 m^(2)净菜产量5000 kg左右;耐抽薹性较好,最高抽薹率为6.3%。该品种适宜山东青岛市、烟台市、潍坊市、临沂市、菏泽市等区域春季栽培。2021年通过农业农村部非主要农作物品种登记。

桃中熟新品种双脆红的选育

双脆红是以桃品种川中岛白桃作母本、以油桃品种龙丰作父本杂交育成的桃中熟新品种。果实圆形,平均单果重284.8 g;85%果面着浓红色,果面光洁,果实顶部稍尖,缝合线浅,茸毛短、极少;果核小,离核;果肉白色,肉质细、脆,风味甜,品质优;可溶性固形物含量14.20%以上,耐贮运性好;在山东省青岛市,果实7月下旬成熟。2015年4月通过山东省教育厅组织的品种鉴定。