一种准确、简便测定CRISPR/Cas9基因编辑效率的方法

CRISPR/Cas9基因编辑技术是近年来发展迅速的一项基因定点编辑技术,但对特定CRISPR/Cas9基因编辑技术的编辑效率进行有效评估的方法仍十分匮乏,本研究的目的是建立一种准确、简便测定CRISPR/Cas9基因编辑效率的方法。在我们的方法中,将与种子专一表达启动子(2S3)连接的mCherry荧光蛋白报告基因作为选择基因,并以编码脂肪酸脱氢酶FAD2的基因为靶序列;然后对经CRISPR/Cas9编辑的拟南芥种子进行脂肪酸组分分析,根据其组分变化计算该方法的编辑效率。结果显示,利用mCherry荧光蛋白报告基因的种子专一表达特性,可简便快速地筛选阳性的初级转化子和后代的无转基因突变子;而种子油脂分析法能快速、准确地鉴定CRISPR/Cas9编辑的突变体,可以精确地检测出核酸长度小至单个碱基对的突变,用该方法获得的CRISPR/Cas9基因编辑效率(54.5%~74.1%)远高于基于聚丙烯酰氨凝胶电泳法获得的编辑效率(3.7%~15.4%)。说明,该方法检测CRISPR/Cas9基因编辑效率的高效性与可行性。

新媒体时代女大学生安全问题的引导探究

采用实证性调查研究方法,对100名大学生进行问卷调查,分析了在新媒体时代下对于女大学生安全问题的关注度以及大学生的安全意识。调查结果表明大部分学生在安全教育知识上花费时间较少;大家对于女大学生安全问题关注程度一般;针对以上问题,有针对性地提出女大学生安全教育引导和提高女大学生的安全意识,从而提高女大学生防范能力,减少不必要的伤害。