硼替佐米联合环磷酰胺及地塞米松方案治疗多发性骨髓瘤

目的观察硼替佐米联合环磷酰胺及地塞米松(VCD)方案治疗多发性骨髓瘤(MM)患者的疗效和安全性。方法回顾性分析2012年6月至2017年6月收治的55例应用VCD方案治疗初治及复发难治的MM患者资料。结果患者应用VCD中位疗程为4(2～8)个。治疗的总体缓解率(ORR)为85.5%(45/55),其中完全缓解及接近完全缓解(CR/nCR)率为27.3%,非常好的部分缓解(VGPR)率为23.6%,部分缓解(PR)率34.6%;合并肾功能不全的10例患者总有效率80.0%,45例肾功能正常患者的总有效率为82.2%,两者差异无统计学意义(P=0.627)。中位随访13.5(1～61)个月,预计中位无进展生存(PFS)时间27(1～61)个月,中位缓解持续(DOR)时间18(1～50)个月,中位总体生存(OS)时间49(1～64)个月。单因素分析中,ISS分期Ⅲ期、难治复发、疗效未达VGPR及肾功能异常是影响PFS的不良因素;ISS分期Ⅲ期及肾功能异常是影响OS的不良因素。多因素分析中,ISS分期Ⅲ期及疗效未达VGPR是PFS的独立影响因素;ISS分期Ⅲ期是OS的独立影响因素。安全性分析显示VCD方案具有良好的安全性及耐受性,统计其不良反应,最常见的3/4级非血液学不良反应为感染(20.0%)、周围神经病变(5.5%)、高血压(5.5%)。最常见的3/4级血液学不良反应为血小板减少(10.9%)、中性粒细胞减少(9.0%)和贫血(5.5%)。共有2例(3.6%)患者因严重的神经毒性更换治疗方案,2例患者因肺部感染导致呼吸衰竭死亡(3.6%)。结论 VCD方案在初治/复发难治患者中有效率高,不良反应可以接受,对合并肾功能不全的患者可安全应用。

CCL3促进人骨髓间充质干细胞增殖并抑制其外泌体的分泌

目的:探讨趋化因子CCL3对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs)外泌体分泌的调控作用。方法:采用CCK-8法和活细胞计数检测h BMSCs的增殖活性;采用电镜观察、流式细胞术和纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)对外泌体进行定性和定量分析。结果:CCK-8检测显示,CCL3组细胞的存活率大于对照组(P<0.05);活细胞计数结果显示,CCL3组细胞数明显多于对照组(P<0.05),呈浓度依赖性;流式细胞术分析结果显示,h BMSCs表达CCR1、CCR5和CCR9 3种CCL3特异性受体;CCL3作用h BMSCs后,CCR9荧光强度明显增强,CCR5和CCR1荧光强度无显著差异。NTA结果显示,与对照组相比,CCL3组外泌体分泌量明显减小(P<0.05),同时微囊泡(粒径大于100 nm)数明显增多(P<0.05);外泌体流式细胞术分析结果提示,与对照组相比,CCL3组的CD9+外泌体阳性率显著下降(P<0.01)。结论:CCL3促进h BMSCs增殖并抑制其外泌体的分泌,同时影响h BMSCs外泌体的粒径分布,无效的微囊泡增多。

达沙替尼对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

目的:在体外探索达沙替尼对人骨髓来源间充质干细胞(hBMSCs)的活力、迁移、细胞周期和凋亡的影响以及潜在的信号通路,以评估达沙替尼在临床应用中对骨髓造血微环境的影响。方法:CCK-8法检测细胞活力;划痕实验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;同时采用吖啶橙/溴化乙啶法检测细胞凋亡;酶联免疫吸附实验检测细胞转化生长因子β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌情况;Western blot检测蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达和磷酸化以及cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:与对照组相比,达沙替尼(1~10nmol/L)抑制hBMSCs的活力和迁移;在随后的实验中使用的浓度为7 nmol/L。达沙替尼促进细胞凋亡,并使更多细胞的周期阻滞在G_1期。此外,hBMSCs TGF-β1和TNF-α的分泌量显著增加。7 nmol/L达沙替尼组cleaved caspase-3的蛋白水平增加,胞内Akt的蛋白量下调且其磷酸化受到抑制。结论:达沙替尼以浓度依赖性的方式抑制hBMSCs的活力和迁移,并促进TGF-β1和TNF-α的分泌,诱导细胞G_1期阻滞和凋亡;达沙替尼可能通过影响胞内Akt蛋白的表达和磷酸化调控上述细胞学行为。

克拉屈滨对人脐静脉内皮细胞的毒性作用及机制

目的研究克拉屈滨（2-CdA）对内皮细胞活力、迁移、周期和分泌活性的影响,以评估2-CdA在临床应用中对心血管的影响。方法 CCK-8法检测不同浓度2-CdA对内皮细胞生长的影响;划痕实验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞周期;吖啶橙/溴化乙啶法检测细胞凋亡;Gries法测定一氧化氮（NO）含量;ELISA法检测血管内皮生长因子（VEGF）水平。结果在0.4~40μmol/L浓度范围,2-CdA对内皮细胞有明显抑制作用,IC50为4.126μmol/L。随药物浓度升高和作用时间的延长,2-CdA的抑制作用增强;2-CdA高浓度长时间作用可导致内皮细胞凋亡。5μmol/L 2-CdA作用内皮细胞后,细胞迁移能力受抑制,细胞周期明显阻滞在S期。吖啶橙/溴化乙啶细胞染色结果显示,高浓度2-CdA可诱导内皮细胞的凋亡。5μmol/L 2-CdA作用内皮细胞后导致NO和VEGF含量减少。结论 2-CdA具有内皮细胞毒性作用,引起细胞周期阻滞,并导致细胞凋亡。

克拉屈滨对人脐静脉内皮细胞活力和代谢的影响

目的:研究克拉屈滨对人脐静脉内皮细胞EA.hy926生长及分泌活性的影响,探讨克拉屈滨通过抑制内皮细胞活力发挥抗肿瘤的作用机制。方法:采用CCK-8法检测不同浓度(0.4~1μmol/L)克拉屈滨对内皮细胞活力的影响;用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Western blot检测细胞凋亡和周期相关蛋白的表达水平;用ELISA法检测上清液肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平;Gries法检测上清液一氧化氮(nitric oxide,NO)含量。结果:克拉屈滨作用48 h对细胞活力有明显的抑制作用,其半数抑制浓度约为3.644μmol/L,随药物浓度升高和作用时间的延长而抑制作用增强。克拉屈滨作用48 h后,细胞周期被明显阻滞在S期,0.4μmol/L时S期细胞约43.74%,1μmol/L时S期细胞约77.23%。克拉屈滨处理后,各组内皮细胞的凋亡率没有显著差异。克拉屈滨处理后,caspase-3与Bax蛋白水平无明显差异;p21水平随着药物浓度增加而增高,而p53水平随着药物浓度增加而降低(P<0.05)。克拉屈滨处理后,上清液中TGF-β1和TNF-α水平升高,VEGF含量减少(P<0.05)。克拉屈滨处理后,上清液中NO含量减少(P<0.05)。结论:克拉屈滨能明显抑制内皮细胞EA.hy926的活力,其主要机制与细胞周期阻滞有关。同时克拉屈滨能促进内皮细胞EA.hy926分泌TNF-α和TGF-β1,抑制其分泌VEGF和NO。

10例心脏淋巴瘤患者的临床资料分析

目的分析心脏淋巴瘤的发病情况、临床特征、治疗效果及预后。方法收集2000年1月至2016年6月期间确诊并有心脏累及的10例淋巴瘤患者的资料，对患者的一般资料、临床表现、病理诊断、实验室检查、心脏累及方式、心脏并发症、治疗方式、疗效及预后进行分析。结果3918例淋巴瘤患者中，心脏累及者10例，其中原发性心脏淋巴瘤（PCL）1例（主要累及左右心房，以心肌内多发结节包块为主），继发性心脏淋巴瘤（SCL）9例（主要为心包包块，其中出现心包积液5例，心肌肿块2例）。男性6例，女性4例，中位年龄55（19～88）岁，主要临床表现为呼吸困难7例，胸痛5例，乏力、水肿各2例。病理类型包括弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）7例，T淋巴母细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤各1例。心脏并发症包括充血性心力衰竭7例，心律失常4例（主要为窦性心动过速、心房颤动和房室传导阻滞）。除1例高龄、一般状况差未接受治疗外，其余9例患者均接受治疗（单纯化疗4例，化疗联合放疗5例）。中位随访时间为9（1～28）个月。1例PCL患者化疗后获部分缓解（PR），无进展生存（PFS）期为6个月，总生存（OS）期为21个月。SCL患者中6例起病累及心脏者，治疗后1例获完全缓解，5例获PR，中位PFS期为5个月，中位OS期为19个月；3例病情进展累及心脏者，2例治疗后获PR，1例未治疗者死亡，中位PFS期为4个月，OS因数据截尾，未能获得。结论心脏淋巴瘤为少见类型，DLBCL为最常见类型，呼吸困难、胸痛为最常见临床表现，并易出现充血性心力衰竭和心律失常，治疗以系统化疗为主，总体预后差。

重型再生障碍性贫血行异基因造血干细胞移植后植入功能不良的危险因素分析

目的探讨重型再生障碍性贫血（SAA）患者行异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后发生植入功能不良（PGF）的危险因素。方法回顾性分析111例行allo-HSCT的SAA患者临床资料及移植情况，采用Cox比例风险模型对可能影响PGF的因素进行单因素及多因素分析。结果在111例行allo-HSCT的SAA患者中，共有16例发生了PGF（14．4％）。多因素分析结果显示，非血缘供者（HR=2．656，95％CI1．204～5．858，P=0．016）及移植前血清铁蛋白浓度（SF）〉1000μg／L（HR=3．170，95％CI1．400～7．180，P=0．006）是发生PGF的独立危险因素。结论非血缘供者及移植前SF〉1000μg／L的患者移植后容易发生PGF。