浅谈规模化种猪场疫病净化主要措施

在当前畜牧业发展形势下,规模化猪场有必要实施有计划、有组织的疫病预防、控制、净化及消灭的措施。本文探讨了规模化种猪场疫病净化的必要性和技术措施,希望对提高种猪场的疫病防控成效和疫病净化的开展有一定帮助。

基层兽医实验室生物安全管理建议

基层兽医实验室作为动物疫病诊断、疫情监测、免疫效果评估、疫病防控和净化的技术性支撑平台,在各个环节均面临着较高的风险。本文分析了当前基层兽医实验室生物安全管理中存在的问题,并提出管理对策,以期为科学管理的生物安全提供参考。

氯胺酮完全抗原的制备及免疫效果检测

基于盐酸氯胺酮是一种化学反应性质活泼的小分子,利用半抗原—载体效应的免疫学原理,以三氯化磷(PCl3)为桥梁,将盐酸氯胺酮分子共价连接到兔血清白蛋白(RSA)分子,随后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析偶联物,并用该偶联物免疫BALB/c小鼠,最后采用斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)检测氯胺酮抗体应答水平。蛋白电泳分析显示已成功制备出分子量约为78.8 ku、氯胺酮与RSA的分子偶联比为39的完全抗原,能诱导实验小鼠产生效价为1∶1 280的抗氯胺酮抗体。本试验不仅建立了检测氯胺酮的血清学方法,还为开发氯胺酮戒毒疫苗做了有益的积累。

抗STa多克隆抗体的制备、鉴定和纯化

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)可引起人及动物急性腹泻,其关键毒力因子为耐热肠毒素(ST)。由于ST是一种具有强烈毒性但缺乏免疫原性的小分子肽,如何在保持其免疫原性的同时减弱其毒性已成为制备ST类毒素疫苗的研究热点。本试验以利凡诺法提纯兔血清白蛋白(RSA),经0.2%戊二醛活化,再与人工合成的甲醇可溶性STa偶联,十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示获得分子质量约108.5ku的完全抗原。用该偶联物免疫新西兰白兔4次,采集抗血清并用Protein A/G琼脂糖小珠进行纯化,斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)和免疫印迹(Western blotting)结果显示抗血清效价均为1∶400。试验结果表明抗STa多克隆抗体成功制备,这为筛选ST结构类似物做有益的铺垫。

茶花鸡MHC单倍型及其对HPAI免疫应答水平影响的测定

为筛选茶花鸡H5N1高致病性禽流感(HPAI)抗性MHC单倍型,本实验对293只脱温茶花鸡先后两次接种同一HPAI灭活疫苗(0.4 m L/只),二次免疫前、后采集抗凝外周血,分别应用病毒血凝抑制(HI)试验和夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆特异性抗体效价和IFN-γ水平;通过PCR扩增分析微卫星LEI0258和MCW0371,根据扩增产物的长度多态性确定个体MHC单倍型及基因型。选取频数不少于5的MHC单倍型或基因型,对其与抗体效价和IFN-γ水平的关联性分别做单因素方差分析。结果显示,应用PCR扩增LEI0258获得50种长度多态性片段,包括已有命名的20种和新发现的30种;二免后茶花鸡实验群体特异性抗体效价和IFN-γ水平均极显著高于二次免疫前(p<0.01); 249 bp、307 bp、319 bp携带组和B17单倍型纯合子组二次免疫后抗体效价和IFN-γ水平均显著高于其它组(p<0.05)。本实验初步判定249 bp、307 bp、319 bp携带者和B17单倍型纯合子具有较高的HPAI免疫应答水平,提示其可以作为进一步鉴定HPAI抗性的候选MHC单倍型,有望为建立HPAI控制新策略提供思路。

奶牛关节炎病原菌的分离与鉴定

为避免奶牛关节炎对牛场造成巨大经济损失,采集患病奶牛关节积液,应用胰蛋白胨肉汤琼脂分离培养病原菌,随后通过形态学方法、生化试验和PCR扩增16SrRNA基因片段及TA克隆测序对其进行鉴定。结果显示,该菌在血琼脂上产生明显的β溶血;光镜下可见该菌个体为单个或短链状排列的革兰氏阳性球菌;该菌七叶苷、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、过氧化氢酶试验均为阳性,对头孢唑啉、恩诺沙星、环丙沙星、氨苄西林、链霉素、氯霉素、新霉素、头孢吡肟8种抗生素敏感,对四环素、红霉素、强力霉素、阿米卡星4种抗生素耐药;该菌与金黄色葡萄球菌核苷酸同源性为91%,但与肉葡萄球菌核苷酸同源性为92%。依据该菌株16SrRNA基因片段测序结果,并结合生物学特性分析,初步将分离菌株鉴定为葡萄球菌属的细菌。本试验结果可为该牛场确诊和防治关节炎提供必要的试验依据。

浅谈关联方关系及其交易中存在的问题及对策

随着中国经济的快速发展，关联方交易在我国经济活动中也愈来愈普遍，产生的影响也愈来愈大，且交易的形式也日渐多样化和隐蔽化，但有些上市公司为了美化其自身的经营业绩和财务状况及达到避税等其他目的，利用关联方关系进行非公允的关联方交易，致使会计信息失真，严重地损害了交易市场公平、公正、公开的原则，也损害了国家、公司、中小股东、投资者和债权人的利益。因此，深入了解并研究关联方及其交易的作用机理，探讨相对应的对策以规范关联方关系及其交易中存在的问题很有必要。

云南红河州小反刍兽疫的血清学及分子流行病学调查

为掌握小反刍兽疫在云南省红河州的流行情况及疫苗防控效果,应用竞争酶联免疫吸附试验(ELISA),对该州13个县市采集自人工免疫山羊的920份血清进行抗体检测,同时应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对215份山羊组织样品检测小反刍兽疫病毒(PPRV)核衣壳蛋白(N)基因小片段,并取PCR扩增呈阳性的组织样品进一步做N基因大片段的克隆与测序,最后与国内外参考毒株进行核苷酸同源性比较及进化关系分析。调查结果表明,该州小反刍兽疫血清抗体平均阳性率为70.65%,病毒核酸阳性率为20.46%;当地流行毒株与国内其他毒株同源性最高,均属于基因Ⅳ系毒株,并与印度株和土耳其株进化关系相近。据此推测,当地流行毒株可能最初从国外传入,再伴随引种传入云南。调查证实,以国外基因Ⅱ系毒株制成的弱毒疫苗,虽与我国毒株不同基因系,但具有较高的免疫保护力。

苏典乡山地放牧养牛的管理及疫病预防要点

农民养牛是增加收入的重要来源,山地放牧模式对小规模养殖户既能有效降低饲养成本又能提高收入,为进一步完善苏典地区放养牛技术,本文根据在盈江县山区乡镇苏典乡现状,提出科学的饲养模式,希望能有效提升养殖户的经济收入。

低致病性禽流感(MPAI)的诊断方法和防控

低致病性禽流感主要是由H9N2亚型H7N9流感痛毒所引起,致病力和致死率不高,但是引起肉鸡、青年鸡和蛋鸡的生产性能下降,造成巨大的经济损失,此外还要警惕低致病性禽流感病毒短期传播后突变成致病性高的病毒的风险。因此,对于低致病性禽流感,我们应该做好监测诊断和防控,做好免疫和消毒工作,最后达到疫病净化标准。

云南省芒市猪圆环病毒感染的血清学与病原学监测

为了解猪圆环病毒2型（PCV-2）感染在云南省芒市的流行情况,试验从当地规模化猪场及散养户未接种PCV-2疫苗的猪群采集血清和组织样品,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和PCR方法分别检测血清抗体和病毒衣壳（N）蛋白基因片段（ORF2）,并取PCR扩增阳性产物进行TA克隆、细菌转化和筛选培养,随后每个核酸样品随机挑取3个细菌克隆做DNA测序,最后应用DNAStar软件进行病毒DNA序列同源性比较和进化关系分析。结果表明：2013-2016年一季度、二季度、三季度、四季度猪群抗体阳性率分别为32.34%、53.53%、52.45%、40.22%,二季度抗体阳性率比较高。散养猪抗体阳性率略高于规模场猪群。病原学检测发现该市PCV-2的平均感染率达53.51%,且第三季度病原检出率高达77.42%,散养猪阳性率明显高于规模场;分析的8株毒株与河北株和广西株遗传距离较近,而与美国株和湖北株较远;当地流行毒株与PCV-2b基因型接近,并可分为明显不同的2个基因亚型。说明该市养殖猪群普遍存在PCV-2感染,其流行有明显的季节性和毒株基因型差异;结合当地引种情况,当地流行毒株可能来源于外省,建议引种时防范种猪携带PCV-2的风险,严格进行隔离和检疫。