卵巢肿瘤组织中Wee1蛋白激酶的表达及意义

目的:评估Wee1蛋白激酶在卵巢肿瘤组织中的表达水平及其临床意义。方法:采用免疫组化染色技术,对包含14例良性、9例交界性及36例恶性卵巢肿瘤组织的组织芯片中Wee1蛋白激酶表达水平进行检测。采用Kaplan-Meier法绘制Wee1蛋白激酶高、低表达卵巢恶性肿瘤患者的生存曲线,采用Cox回归分析Wee1蛋白激酶表达与卵巢恶性肿瘤预后的关联。结果:良性、交界性和恶性卵巢肿瘤组织中Wee1蛋白激酶表达水平分别为(1.29±0.47)、(2.22±0.83)和(2.03±1.00),3组比较,差异有统计学意义(P=0.017),恶性和交界性肿瘤组织中Wee1蛋白激酶表达水平高于良性肿瘤组织(P<0.05)。卵巢恶性肿瘤患者中15例Wee1蛋白激酶高表达,21例低表达;Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,高表达组生存状况差于低表达组(P<0.001);Cox回归分析结果显示,Wee1蛋白激酶高表达者预后差,HR(95%CI)为6.38(1.54~26.52)。结论:卵巢恶性肿瘤组织中Wee1蛋白激酶表达水平高于良性肿瘤组织,且与恶性肿瘤预后有关。

IL-2R结构及功能研究的进展

白细胞介素2受体(IL-2R)在介导IL-2的免疫反应中起重要作用.近年来对IL-2R的深入研究,更增加了人们对IL-2R的进一步认识,本文重点介绍IL-2R结构和功能研究的一些最新进展.

衰老与白细胞介素2及其受体关系的研究进展

在衰老与免疫系统关系的研究中,发现衰老与机体的白细胞介素2(IL-2)产生和白细胞介素2受体(IL-2R)表达水平有较为密切关系。本文对衰老与白细胞介素2及其受体关系的研究进展作一综述。

人嗜T淋巴细胞白血病病毒I型(HTLV-Ⅰ)核心蛋白(p24)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

人嗜Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ⅰ）核心蛋白（ｐ２４）基因的克隆及在大肠杆菌中的表达段震峰，滕志平，纪志武，陈国敏，张永利，曾毅（中国预防医学科学院病毒学研究所，北京１０００５２）关键词人嗜Ｔ淋巴细胞白血病病毒Ｉ型（ＨＴＬＶ－Ｉ），聚合酶链反...

人T细胞白血病病霉Ⅰ型env基因的克隆与表达

本文通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ），从整合有人Ｔ细胞白血病病毒Ⅰ型（ＨＴＬＶ－Ｉ）的ＭＴ－２细胞株中，扩增出ＨＴＬＶ－Ｉ外膜蛋白（ｅｎｖ）的全基因（１．４５ｋｂ），并成功地克隆入ｐＵＣ１９载体，构建成ｅｎｖ基因克隆ｅｎｖ／ｐＵＣ１９．利用原核高效表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ，在大肠杆菌中有效地表达了与谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）融合的ｅｎｖ羧基末端抗原的重组蛋白，融合基因的转录由ｔａｃ启动子调控。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，有一约５２ｋＤ的目的蛋白带，表达量占菌体总蛋白的１０％；ＷｅｓｔｅｒＮｂｌｏｔｔ及ＥＬＩＳＡ结果显示，表达产物能与ＨＴＬＶ－Ｉ多抗血清结合。本研究为研制ＨＴＬＶ－Ｉ的诊断试剂及进一步了解ｅｎｖ的免疫学和生物学性质打下了基础。

DNA载体介导的小干扰RNA Tet-on基因表达系统的调控效应检测

目的观察构建的DNA载体介导的小干扰RNA Tet-on基因表达系统的调控效应。方法构建DNA载体介导的小干扰RNA(siRNA)Tet-on表达载体,pDIRS4.1 siRNA。以增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因和白细胞介素6(IL-6)基因为目的基因,应用脂质体介导的瞬时转染方法,分别将pDIRS4.1/EGFP siRNA载体和p EGFP-N3质粒、pDIRS4.1IL-6siRNA载体和p IRESIL-6质粒共转染人成骨肉瘤细胞,加入系列浓度的四环素(Dox)后,观察其诱导效应。结果 pDIRS4.1 siRNA在人成骨肉瘤细胞中能够高效转染;随着Dox浓度升高,pDIRS4.1 siRNA载体在人成骨肉瘤细胞中对目的基因的沉默作用有较好的调控性,且目的基因的表达与Dox具有严格的剂量依赖关系,高浓度Dox时,IL-6表达水平降低约12倍。结论该研究构建的以DNA载体介导的能够高效调控siRNA沉默基因效应的Tet-On基因表达系统,能够促进其在更多模型系统中进行基因功能研究的应用。

脊索瘤组织中Brachyury表达与预后的关系

目的:探讨脊索瘤组织中Brachyury的表达及意义。方法:征集78例脊索瘤组织、7例脊索瘤癌旁正常组织和6例胚胎脊索组织用于制作组织芯片,采用免疫组化法检测Brahcyury的表达。采用回顾性分析,临床追踪57例患者,其中无病存活患者27例,带瘤存活患者7例,因脊索瘤死亡患者23例。结果:Brachyury在脊索瘤组织中的阳性表达率为75.64%(59/78),与癌旁正常组织中的4/7比较差异无统计学意义(H=22.669,P=0.263),其在骶骨发病者的阳性表达水平高于发病于活动脊柱者(H=2.292,P=0.022)。不同Brachyury表达水平的患者Kaplan-Meier生存曲线差异无统计学意义(χ2=0.432,P=0.933)。不同疾病状态患者脊索瘤组织中Brachyury的表达水平差异亦无统计学意义(H=2.605,P=0.272)。结论:Brachyury并不能作为预测脊索瘤预后的特异性分子标志物。

食管癌患者SIL_(-2R)和IL_(-6)的研究

本文对25例食管癌患者和31例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)经 PHA 刺激后 IL_(-6)产生能力和细胞培养上清中 SIL-_(2R)水平做了研究,同时检测了血清中 SIL_(-2R)水平。结果显示,食管癌患者产生 IL_(?)能力显著升高(P<0.001);食管癌患血清 SIL_(-2R)水平同健康者相比也显著升高(P<0.001),而细胞培养上清SIL_(-2R)浓度,两者比较差异无显著性(P>0.05)。

食管癌患者SIL—2R和IL—6的研究

本文对25例食管癌患者和31例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC),经PHA刺激后IL—6产生能力和细胞培养上清中SIL—2R水平做了研究,同时检测了血清中SIL—2R水平。结果显示,食管癌患者产生IL—6能力显著升高(P<0.001)。食管癌患者血清SIL—2R水平同健康对照者相比也显著升高(P<0.001)。而细胞培养上清SIL—2R浓度,两者比较差异无显著性(P>0.05)。

老年人可溶性白细胞介素-2受体和白细胞介素-6的研究

本文对老年人血清中可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)浓度、外周血单个核细胞(PBMC)经 PHA 刺激后白细胞介素-6(IL-6)产生和增殖能力做了研究;同时检测了血清中免疫球蛋白和 C_3含量。结果显示,老年人血清 SIL-2R水平(878.57±256.54U/ml)比青年人 SIL2R 水平(583.65±171.29U/ml)显著升高(P<0.05),IL-6产生能力也显著升高(P<0.001),而老年人淋巴细胞增殖反应明显降低(P<0.001)。老年人血清中免疫球蛋白浓度与青年人相比,IgG 无显著差异(P>0.05);IgM、IgA 均显著升高(P<0.001;P<0.01)。老年人血清中 C_3浓度比青年人明显升高(P<0.001)。这些结果提示,老年人的细胞免疫和体液免疫功能均有改变。

四君子汤提取物对人乳腺癌MDA-MB-468细胞生长的抑制作用

目的探究四君子汤提取物(Sijunzi Decoction extract,SDE)对人三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞生长的作用。方法采用不同质量浓度SDE作用于MDA-MB-468细胞,CCK-8实验和细胞划痕实验检测SDE对细胞增殖和迁移能力的影响;克隆形成实验检测SDE对细胞集落形成能力的影响;Hoechst33342染色技术和流式细胞术(FCM)检测SDE对细胞凋亡和周期的影响;Western blotting技术检测SDE对信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)表达的影响。结果与对照组比较,SDE对MDA-MB-468细胞有一定的抑制作用(P<0.05),且呈质量浓度和时间依赖性。克隆形成实验结果表明SDE能够抑制细胞克隆形成。细胞迁移实验结果显示,SDE中、高质量浓度能够明显减弱细胞划痕愈合能力(P<0.001)。FCM检测凋亡结果显示,SDE各质量浓度组细胞早期凋亡率和总凋亡率逐渐上升,呈质量浓度依赖性,且中、高质量浓度的SDE能显著诱导细胞凋亡(P<0.01、0.001)。SDE能够影响细胞周期,使G2期细胞显著减少(P<0.01)。Westernblotting结果显示,SDE处理细胞后,STAT3蛋白表达水平显著降低。结论SDE能够抑制MDA-MB-468细胞的增殖和克隆形成,促进其凋亡,使G2期细胞减少。其机制可能与调控STAT3通路有关。

BI2536对顺铂耐药的非小细胞肺癌细胞增殖的影响及机制

目的:观察BI2536在体外对顺铂敏感及耐药的非小细胞肺癌细胞增殖的影响。方法:用不同浓度的BI2536处理人非小细胞肺癌细胞A549和顺铂耐药的非小细胞肺癌细胞A549/DDP48 h后,采用MTT法测定BI2536对细胞增殖活性的影响,应用流式细胞术检测细胞凋亡的变化,Western blot法检测PLK1及PARP蛋白的表达水平的变化。结果:BI2536对A549/DDP增殖的抑制作用显著大于其对A549增殖的抑制作用,其IC50值分别为(9.9±0.4)nmol·L-1和(25.9±1.0)nmol·L-1(P<0.01)。BI2536处理48 h后流式细胞仪检测A549/DDP的凋亡率显著高于A549细胞(60.6%vs 20.3%,P<0.01)。Western blot法检测可见随BI2536浓度升高PLK1及PARP表达下降,且A549/DDP组PARP蛋白表达下调更明显(P<0.05)。结论:BI2536可抑制顺铂耐药的A549/DDP细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制PLK1及PARP表达有关。